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제품특징
□ 제품 설명
Advantage Genomic LA Polymerase Mix and Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix- "길고 정확한" PCR 증폭- 에러가 거의 없는 PCR 산물- 최대 41 kb까지 target 증폭- Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix는 복잡한 구조와 GC-rich genome 주형에 최적Advantage Genomic LA Polymerase Mix 및 Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix는 일반적인 PCR 효소에서는 증폭이 어려운 복잡한 구조나 GC 함량이 높은 주형 등 매우 다양한 주형에서 긴 단편의 정확한 증폭이 가능한 PCR 효소이다.
□ 최상의 혼합 효소
두 제품은 모두 Advantage Genomic LA Polymerase를 사용한다. Advantage Genomic LA Polymerase는 완전한 길이의 내열성 Taq DNA polymerase와 소량의 proofreading 효소 및 hot start antibody가 포함되어 있다. Proofreading 효소가 가지는 3′→5′exonuclease 활성은 잘못 삽입된 염기를 제거하고 지속적으로 신장 반응을 진행하여 긴 사슬 DNA 단편의 증폭이 가능하다. Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix는 Clontech 고유의 GC-Melt Reagent가 포함되어 있으며, GC 함량이 높은 서열의 증폭을 극적으로 향상시킨다. 이 PCR 효소를 이용하면 human genomic DNA를 주형으로 30 kb까지 (GC 함량이 높은 경우는 20 kb) 또한 복잡하지 않은 일반적인 주형의 경우 48 kb 이상의 증폭이 가능하다(Figure 1, 3).
□ 높은 정확성 & 높은 증폭효율
3′→5′exonuclease 활성을 가지는 이 혼합 효소는 wild-type Taq DNA Poly merase보다 6.5 배 더 높은 정확성을 나타낸다 (internal data는 reference 1 에서 얻었다). 이 강력한 효소 시스템은 background를 최소화하며, 매우 높은 증폭효율을 보장하고, 다른 종류의 "long and accurate" polymerase에 비하여 PCR 조건 검토가 용이하다. 또한, 두 제품에 첨부된 버퍼는 높은 증폭효율과 정확성을 향상시키는데 최적화되어 있다.
□ 뛰어난 반응 특이성
Hot start antibody는 실온에서는 DNA polymerase 활성을 저해하여 자동으로 hot start PCR을 할 수 있다. PCR 초기 변성 과정에서 antibody가 변성되면 polymerase의 활성이 복원되며, hot start antibody는 PCR 시작 전에 비특이적 증폭 및 잘못된 primer 산물을 감소시키거나 제거하여 PCR 효율과 반응 특이성을 크게 향상시킨다. 또한, Advantage GC Genomic LA Polymerase Mix로 증폭된 PCR 산물들은 3′→A 돌출이 있어 TA-vector에 cloning이 가능하다.
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如果女方的该基因为双显,则后代不会换此病(基因突变除外,所有基因都可能突变,但概率何其小);如果女方为单显,则男孩有一半的概率致病,女孩不会致病;如果女方也为隐性,则男孩致病,那就要个女孩吧。
结论,能不能生育去医院做精液检查就清楚了,如果可育,再让女方做个DNA鉴定以决定生儿育女。
酶只是催化剂,其本身无法直接氧化它。
酶是具有生物催化功能的生物大分子,即生物催化剂,它能够加快生化反应的速度,但是不改变反应的方向和产物。其只能用于改变各类生化反应的速度,但并不是生化反应本身。只是催化剂的一种。
所以NADPH氧化酶只是促进了NADPH的氧化过程,无法直接氧化NADPH。
求助,做蛋白酶抑制试验,胃蛋白酶抑制剂不溶于水,需要先溶于甲醇再加入酶液里面吗,还是直接加入酶液里面就可以起作用呢,求大神指点啊
Nutrition.2005Jul-Aug;21(7-8):838-47.
OBJECTIVE:Involvementoflipoxygenase(LOX)andcyclo-oxygenase(COX)oncellulardifferentiationorapoptosisinducedbybutyratehasbeenreportedrecently,buttheeffectontightjunction(TJ)permeabilityhasnotbeenreported.Onemajoractivityofbutyrateand,toalesserextent,propionateistomodulategenetranscriptionviahistoneacetylationbytheirhistonedeacetylaseinhibitoractivity.Inthisstudy,weevaluatedtheactivationofLOXandCOXinTJpermeabilitychangesbyshort-chainfattyacids,butyrate,propionate,andacetateinintestinalmonolayercellsandtheirpossIBLemechanismbyhistoneacetylation.METHODS:TheeffectsofLOXandCOXinhibitorsonTJpermeabilityandtheexpressionofLOXorCOXmRNAinducedbyshort-chainfattyacidswereinvestigatedinCaco-2cellsusingTranswellchambers.Theeffectsofhydroxyeicosatetraenoicacid(aproductofLOX)onTJpermeabilitywerealsoevaluated.Theeffectsofshort-chainfattyacidswerecomparedwiththoseoftrichostatinA(histonedeacetylaseinhibitor).RESULTS:ALOXinhibitorclearlyinhibitedtheeffectofbutyrateonTJpermeability,whereasCOXinhibitorsdidnot.TheLOXandCOXinhibitorspartlyinhibitedtheeffectsofpropionatebutnotofacetate.ButyrateincreasedLOXmRNAexpression,andhydroxyeicosatetraenoicacidandtrichostatinAmimickeditseffect.CONCLUSION:Theseresultssuggestthatshort-chainfattyacids,especiallybutyrate,induceTJpermeabilitychangesthroughLOXactivationthroughhistoneacetylation.
在肠腔,短链脂肪酸可以通过激活脂肪氧化酶的活性从而改变单层细胞间紧密连接的通透性
目的:最近,有文献报道了丁酸盐可以诱导细胞的分化或者凋亡,并且这种效应与脂肪氧化酶(LOX)以及环氧合酶(COX)有关,但是,关于丁酸盐对紧密连接的影响目前未见报道。人们已经知道,丁酸盐以及丙酸盐都可以通过他们对组蛋白去乙酰化酶的抑制作用从而引起组蛋白的乙酰化,并最终实现对基因转录的调控。在我们的研究中,我们研究了短链脂肪酸、丁酸盐、丙酸盐以及醋酸盐对肠上皮细胞间紧密连接通透性的影响,以及这种变化过程中LOX和COX的活化情况,并且研究了这些物质引起组蛋白乙酰化的可能机制。
方法:实验者利用Caco-2细胞以及Transwell小室建立肠腔的体外模型,研究了几种LOX、COX抑制物质对紧密连接通透性的影响,以及对LOX、COXmRNA水平的影响。同时,还研究了羟基二十碳四烯酸(这是一种LOX的催化产物)对TJ通透性的影响。在实验中,研究者还将几种短链脂肪酸的效应与曲古抑菌素A(一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂)的效应进行了比较。
结果:使用LOX抑制剂能够明显的抑制丁酸盐所引起的紧密连接通透性的增加,而COX抑制剂则没有这种作用。丁酸盐能够增加细胞中LOXmRNA的表达水平,而羟基二十碳四烯酸以及曲古抑菌素A也都有类似的作用。
结论:以上结果表明,短链脂肪酸,尤其是丁酸盐,能够通过对组蛋白的乙酰化作用活化LOX,并且导致肠上皮细胞间紧密连接通透性的增加。
不加磷酸化抑制剂也可以做磷酸化蛋白WB,但是有可能会影响具体的实验结果,大部分时候不加磷酸化抑制剂也能得到结果的。
需要注意蛋白的磷酸化是一个非常迅速的反应,所以取样品的过程要迅速,样品要新鲜。
所以做磷酸化蛋白WB,提取蛋白时不加磷酸酶抑制剂会有影响

