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请问有DPD二氢嘧啶脱氢酶活性检测的
试剂盒吗？HPLC方法有些麻烦。
转氨酶升高是个很常见的情况，并不一定是肝脏出了问题。因为转氨酶非常敏感，很多因素会引起转氨酶正常值的上下波动，健康人在一天之内的不同时间检查，转氨酶测量结果都可能不一样，早期的转氨酶高一般都用五味子来降低转氨酶。
非病理原因导致转氨酶高得情况
1、健康人如果剧烈运动后检查转氨酶就会发现转氨酶升高。
2、如果过于劳累，会导致转氨酶升高。
3、检查前如果吃过油腻的食物或酗酒都会导致转氨酶升高。
4、怀孕的人，也会导致内分泌失调，使得转氨酶升高;
5、营养不足 饮食结构不合理如低蛋白饮食，尤其是当食物中缺乏胱氨酸、维生素E时，亦可使ALT升高。
6、日常服用的药物所产生的副作用也会导致转氨酶升高，比如红霉素、安眠药、解热镇痛药、避孕药膏还有半夏、槟榔、青黛等中药。
病理性原因导致转氨酶高得情况
1、病毒性肝炎这是引起转氨酶高常见的疾病，其他类型的肝炎也可导致转氨酶高。
2、多种药物和化学制剂都能引起转氨酶高，但停药后可恢复正常。
3、肝硬化与肝癌肝硬化活动时，一般都会出现转氨酶高。
4、胆道疾病如胆囊炎、胆石症急性发作时，除伴有发热、腹痛、恶心、呕吐、黄疸等情况外，还可引起血胆红素及转氨酶高。转氨酶是从胆管排出的，如果有胆管、胆囊及胰腺疾患，胆管梗阻，也可使转氨酶升高。病床上常见的有胆囊炎、胆管蛔虫、肝胆管结石、胆囊及胆管肿瘤、壶腹部周围癌症、先天性胆管扩张症、急慢性胰腺炎、胰头痛以及出血坏死性胰腺炎。
5、心脏疾病急性心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭时，可引起转氨酶高。
6、其他某些感染性疾病，：除肝脏外，体内其他脏器组织如心、肾、肺、脑、睾丸、肌肉也都含有此酶。因此，当心肌炎、肾盂肾炎、大叶性肺炎、肺结核、多发性肌炎、甲状腺功能亢进症、急性败血症、肠伤寒、流脑、疟疾、钩端螺旋体病、流行性感冒、麻疹、血吸虫病、挤压综合征等患者中，亦可见血中转氨酶升高。
7、是否服用过对肝脏有损害的药物，如果有，一定要注意药物性肝炎的可能；
8、女性还要注意有无自身免疫性肝炎的可能，检查自身免疫抗体（抗核抗体、抗平滑肌抗体等）是否为阳性；
9、既往是否有胆囊炎、心脏病、肾炎等疾病，这些病也可以引起转氨酶升高；
综上所述，引起转氨酶升高的原因很多，必须认真检查，明确病因，针对病因加以治疗。
转氨酶水平在0—40之间是正常的。如果超出正常范围，医生会建议再查一次，排除由于实验室设备故障和操作错误等因素造成误差的可能。如果转氨酶水平还高，多半是由病毒性肝炎或其他肝病所致。但要确定是不是病毒性肝炎，还需要做其他检查，结合病史、症状、体征等全面分析。展开
做磷酸化蛋白WB，提取蛋白时不加磷酸酶抑制剂会有影响，大不大要看具体的实验结果
不加磷酸化抑制剂也可以做磷酸化蛋白WB，但是有可能会影响具体的实验结果，大部分时候不加磷酸化抑制剂也能得到结果的。
需要注意蛋白的磷酸化是一个非常迅速的反应，所以取样品的过程要迅速，样品要新鲜。
所以做磷酸化蛋白WB，提取蛋白时不加磷酸酶抑制剂会有影响
在书上看到这一个词，不知道什么意思，帮忙解救一下，谢谢！！！！！！！！！！！！！！
荧光素酶报告基因
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。
中文名
荧光素酶报告基因
外文名
Luciferase
底 物
荧光素(luciferin)
生物荧光
bioluminescence
转录因子
反式作用因子
转录因子
行使调控基因表达的蛋白质分子
简介
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。
应用原理
转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase assay）是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。
其原理简述如下：
（1）构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒，如pGL3-basic等。
（2） 将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子，则荧光素酶基因就会表达，荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比。
（3） 加入特定的荧光素酶底物，荧光素酶与底物反应，产生荧光，通过检测荧光的强度可以测定荧光素酶的活性，从而判断转录因子是否能与此靶启动子片段有作用。
技术流程
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。
（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
（4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照，提纯备用。
（5） 培养293（或其它目的细胞），并接种于24孔板中，生长10-24小时（80%汇合度）。
（6） 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。
（7）提取蛋白并用于荧光素酶检测。
（8） 加入底物，测定荧光素酶的活性。
（9） 计算相对荧光强度，并与空载对照比较。
发展
双荧光素酶报告基因测试∶ 结合萤火虫和海洋腔肠荧光素酶先进的共报告基因测试技术在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时, 通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal, GUS)不够便利,因为各自的测试化学,处理要求检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL 载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供 PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品。对于正在使用萤火虫荧光素酶报告基因载体的研究人员。双荧光素酶报告基因测试系统将使他们体会到该系统的便利。
体外分泌的荧光素基因:目前NEB公司提供新型的可在细胞外分泌的荧光素酶,分别是Gluc和Cluc,具体使用帮助可在NEB官方网站找到.展开
酶抑制剂是一类可以结合酶并降低其活性的分子。由于抑制特定酶的活性可以杀死病原体或校正新陈代谢的不平衡，许多相关药物就是酶抑制剂。一些酶抑制剂还被用作除草剂或农药。并非所有能和酶结合的分子都是酶抑制剂，酶激活剂也可以与酶结合并提高其活性。
酶抑制剂新药发现的途径：一是来源于天然化合物，包括动植物和各种微生物等，二是化学合成物。在目前上市的药物中，以受体为作用靶点的药物占52%，以酶为靶点的药物占22%，以离子通道为靶点的药物占6%，以核酸为靶点的药物占3%。因此，酶抑制剂的开发是新药来源的一个主要途径。以酶为靶点开发新药存在巨大潜力，今后很长一段时间仍然是发现新药的重要着手点。
丁友们好！我现在在做酶切实验，用的是钙蛋白酶。可是我按照文献上的条件重复了两次，一直没有重复出来（目的蛋白没有被切的迹象）。我怀疑是这个酶失活了，咨询了一下这个产品的总代理商，他们说这个酶的保质期是1到2个月，但说明书上并没有说明（不知道代理商的话是否准确）。说明书上说如果要长期保存需要-20℃下加入carrierprotein，但我们并没有加。现在距离我们买这个酶已经6个月了。心里很忐忑。特意向来向大家请教，还请用过这种酶的朋友们多多指教，先谢谢啦～
酶抑制作用（enzyme inhibition）是指酶的功能基团受到某种物质的影响，而导致酶活力降低或丧失的作用。该物质即称为酶抑制剂。酶抑制剂对酶有选择性，是研究酶作用机理的重要工具。很多药物，毒物和用于化学战争的毒剂都是酶抑制剂。此外，还有一些具有一定功能的存在于动植物体内的生物大分子也是酶抑制剂。 酶受抑制时其蛋白部分并未变性。由于酶蛋白变性造成的酶失活作用，以及除去活化剂（如酶活力所必需的金属离子）而造成酶活力的降低或丧失，不属于酶抑制作用的范畴。
软脂酰辅酶A一次β氧化的产物经过三羧酸循环和氧化磷酸化生成ATP的摩尔数为，
A9 B12 C17 D36
正确答案C
一次氧化的产物不是乙酰COA么，那么产生的ATP为什么不是十个
Title：Notch Signaling, γ-Secretase Inhibitors, and Cancer Therapy
Author:Shih IeM, Wang TL.
Resource：Cancer Res. 2007 Mar 1;67(5):1879-82.
Impact Factor：8.0（2005）
Abstract：The Notch signaling pathway represents a critical component in the molecular circuits that control cell fate during development. Aberrant activation of this pathway contributes to tumorigenesis. The role of Notch in human cancer has been highlighted recently by the presence of activating mutations and amplification of Notch genes in human cancer and by the demonstration that genes in the Notch signaling pathway could be potential therapeutic targets. It has become clear that one of the major therapeutic targets in the Notch pathway are the Notch receptors, in which gamma-secretase inhibitors prevent the generation of the oncogenic (intracellular) domain of Notch molecules and suppress the Notch activity. This review article summarizes the biological roles of Notch molecules in cancer development with special emphasis on the promise and challenges in applying gamma-secretase inhibitors as a new line of targeted therapeutic agents.
PMID: 17332312
相关疾病：肝炎肝癌肝硬化药物性肝病酒精性脂肪肝第八版的诊断书上的这三句话看起来是矛盾的……请问肝硬化时到底应该是怎样的？
这个问题非常的宽泛，当然根据研究需要由很多方法，目前临床前对于药物代谢通路研究最常用的方法为体外人肝微粒体孵育模型，因其含有完整的人肝脏药物代谢酶类型而广泛采用，可通过先后尝试应用不同类型的药物代谢酶抗体阻断某一特定类型代谢酶亚型，观察研究药物代谢情况，若其代谢受到抑制，说明药物为该酶底物，另外结合质谱技术，可确定药物代谢产物结构特征，希望能够帮到你！
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