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转氨酶与肝功能
大多数肝病患者都把转氨酶和肝功能相提并论，提起肝功能，马上就想到转氨酶的高低。其实这种想法是有一定错误的，转氨酶只不过是临床上常用的检查肝脏功能的一项指标，转氨酶的正常与否，并不能代表肝功能的好坏，转氨酶的高低也不是与肝脏功能状态呈比例的。
一、肝脏有哪些功能
人体的肝脏一般在1250克左右，是一个重要的器官，人不能离开肝脏而存活。有人称肝脏为人体的“加工厂”，这不仅不过分，而且也只表达了肝脏的一部分功能而已。肝脏的功能包括：第一，代谢功能。其中包括了合成代谢、分解代谢和能量代谢。人每天摄入的食物中含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质等各种营养物质，这些物质在胃肠内初步消化吸收后被送到肝脏，在肝脏里被分解，“由大变小”，蛋白质变（分解）为氨基酸、脂肪分解为脂肪酸、淀粉分解为葡萄糖，等等，分解后的“小物质”又会根据身体需要再在肝脏内被合成为蛋白质、脂肪和一些特殊的碳水化合物或能量物质等，这是一个“由小变大”的过程。经过这个过程之后，摄入的营养物质就变成了人体的一部分，也就不会“吃猪肉长猪肉了”。在此顺便纠正一下人们普遍存在的某些错误的诸如吃肺补肺，吃肝补肝，吃脑补脑，甚至吃雄性动物的生殖器能够“壮阳”等荒谬的所谓“理论”。可想而知，如果肝脏“罢工”，人体的营养来源就会中断，生命也就危险了。第二，解毒功能。人体代谢过程中所产生的一些有害废物及外来的毒物、毒素、药物的代谢和分解产物，均在肝脏解毒。第三，胆汁生成和排泄：胆红素的摄取、结合和排泄，胆汁酸的生成和排泄都由肝脏承担。肝细胞制造、分泌的胆汁，经胆管输送到胆囊，胆囊浓缩后排放入小肠，帮助脂肪的消化和吸收。第四，造血、储血和调节循环血量的功能。新生儿的肝脏有造血功能，长大后不再造血，但由于血液通过两根血管（门静脉和肝动脉）流入肝脏，同时经过另一根血管（肝静脉）流出肝脏，因此肝脏的血流量很大，肝脏的血容量相应地也很大。如此说来肝脏就象一个仓库，在需要时可以供出一部分血液来，为其他器官所用，比如一个人发生了消化道大出血，血液容量急剧下降，心、脑、肾经受不住缺血，肝脏就可以帮一些忙了。第五，免疫防御功能。肝脏是最大的网状内皮细胞吞噬系统，它能通过吞噬、隔离和消除入侵和内生的各种抗原。另外，肝脏里的淋巴细胞也有很高含量，尤其是在有炎症反应时，血液或其他淋巴组织里的淋巴细胞很快“赶”到肝脏，解决炎症的问题。
二、如何正确认识“转氨酶”
通过以上所述大家对于功能已有基本的发解。是以，“转氨酶”水平的高低几乎不能反应肝脏的功能，转氨酶不过是肝细胞里面的一种成分而已，相比较而言这种成分在肝细胞中的含量比较高，肝细胞一旦遭到打击和破坏，转氨酶就被释放到了血液。而在这个时候，如果损害的肝脏细胞不多，肝脏完全能够正常工作。我们又可以再次用“加工厂”来说明这个问题，要维持正常人的生存，或正常的生命活动，大约只要有1/3的肝脏“开工”即可，就象有些工厂，生产能力大于市场需求，部分工人或部分机器停工不会影响生产线的正常运转。
但是，如何正确认识转氨酶的确是有点学问的。我们说转氨酶水平的高低不能完全代表肝功能的好坏，更确切地说转氨酶水平与肝功能状态不成平行关系。概要地有这么几种情况：①转氨酶水平正常，肝脏损害持续存在。见于某些肝炎病人，比如所谓慢性乙型肝炎病毒携带者，这些人乙型肝炎病毒指标一直阳性，但转氨酶从来没有升高过，可是如果对这样的病人做肝脏活组织检查却能发现肝脏的炎症反应很严重，有的已经发生了纤维化，甚至肝硬化和肝癌；还有不少急性和慢性丙型肝炎病人也有类似情况。②转氨酶水平很高，但不过是一时性的肝损害，不会给肝功能造成很大影响，后果也不很严重，比如服用某种对肝脏毒性较强的药物。我们医院就曾经有位老教授，生病住院期间，就因为吃了一粒药物，转氨酶升高到2 000多单位，停药后两天就恢复到正常；另外，大多数急性甲型肝炎病人在发病期转氨酶水平很高，经过短期休息和治疗后很快恢复正常；一次性大量喝酒也会有类似现象。③黄疸很深，转氨酶不高，甚至正常。有三种情况：一是胆道阻塞，胆汁排泄不畅，做肝功能试验检查时发现血液胆红素很高，而转氨酶不高或轻度升高，可见于胆管结石、胆道和胰头周围的肿瘤患者；二是重型肝炎。这是一种很严重的肝病，病死率很高。患病的早期，转氨酶有不同程度的升高，胆红素在较高的水平上，但随着病情的进展，胆红素越来越高，转氨酶反而下降，及至正常，医学上称之为“胆酶分离”，这是病情严重的信号，靠药物治疗恐已无济于事，条件允许时最好及时做肝移植手术。我们医院在这两年里就处理过十几例这样的病人，其中有一家三兄弟均为严重肝病，经过肝移植后恢复得很好。三是淤胆型肝炎。可由多种原因引起，以肝内小胆管损害为主，导致胆汁分泌异常，比如各种少数急性黄疸型肝
炎、药物性肝炎、妊娠等。④某些肝硬化和肝癌病人，尽管得了晚期肝病，肝功能很糟糕，但转氨酶却是正常的。不少人因为有了大量腹水、消化道出血，或者体检时发现其他异常才得知原发疾病。需要提醒的是，这些所谓“少数”病人在我们医生的病例记载里却不算少，在人们的生活水平普遍提高的今天，每年1～2次健康体检是不可缺少的，能发现不少发病很隐匿、进展很缓慢的疾病，隐源性肝硬化是其中一种。⑤转氨酶长期异常，但水平不高。这多见于慢性肝炎病人，包括慢性乙型和丙型肝炎、自身免疫性肝炎、长期大量饮酒后的酒精性肝炎等。像这种转氨酶水平不是很高，大多在100～200单位之间，或者小于100单位的慢性肝炎病人最需要重视，因为这类病人的人数最众，病情持续发展，预后也最差，最终要发展为肝硬化或肝癌。宜及早采取恰当的治疗，尤其是病毒性肝炎病人的抗病毒治疗。⑥最后还有一类现代文明病，即脂肪肝，表现为转氨酶轻度升高，一般不超过100单位，这种人一般体重超标，或严重超标。近几年来在我们国家“脂肪肝”的发病率逐年上升，这与饮食结构不当、饮食过量、嗜酒无度、缺乏运动等有关，是典型的“富贵病”。过去人们称结核病为“富贵病”，意思是说只有富贵人才生得起的病，实在是一种讽刺。现代人中发病率不断攀升的脂肪肝、高血压、糖尿病、冠心病、胆石症才是真正的富贵病，该引起我们警惕了！
关于“转氨酶”还有一个称谓的问题值得一提。在大众口头上，“转氨酶、GPT、PT、大PT、小PT”用得比较混乱。医学上被简称为转氨酶的有两种，分别是“丙氨酰氨基转移酶”和“门冬氨酸氨基转移酶”。过去分别用英文字母GPT、GOT来简称，现在称ALT和 AST，各家医院的肝功能化验单上都注明了这两种转氨酶，他们都是肝细胞内的酶，如果两种都比较高，而且AST水平超过ALT，一般说明肝细胞损害比较严重，而且特别多见于酒精性肝炎。
参考资料：http://www.labmed.cn/jiaoxue/hychsh/200507/839.html展开
辅酶Q-10是细胞自身产生的天然抗氧化剂，可阻止自由基的形成，有助于维护免疫系统的正常运作及延缓衰老；为心肌提供充足氧气，预防突发性心脏病，尤其在心肌缺氧过程中发挥关键作用；帮助把食物转化为细胞生存必需的能量（如ATP），使细胞保持最佳状态，使人感觉精力更充沛，在预防冠心病，缓解牙周炎，治疗十二指肠溃疡、胃溃疡及缓解心绞痛方面有显著效果。
1、保护心脏，辅酶Q-10有助于为心肌提供充足氧气，预防突发性心脏病，尤其在心肌缺氧过程中辅酶Q10发挥关键作用；
2、促进能量转化，提升精力；辅酶Q-10帮助把食物转化为细胞生存必需的能量（如ATP），使细胞保持最佳状态，使人感觉精力更充沛；
3、提高免疫力，延缓衰老；辅酶Q-10是细胞自身产生的天然抗氧化剂，可阻止自由基的形成，有助于维护免疫系统的正常运作及延缓衰老；
4、在预防冠心病，缓解牙周炎，治疗十二指肠溃疡、胃溃疡及缓解心绞痛方面有显著效果；
5、抗肿瘤作用，临床对于晚期转移性癌症有一定疗效。
辅酶Q10补充剂量：
从事与辅酶Q10研究的一些专家认为：许多人特别是老年人和从事于激烈运动的人会缺乏辅酶Q10，并可从补充中获益，表明辅酶 Q10作为唯一体内合成的脂溶性抗氧化剂在抗衰老、抗疲劳维持机体的青春及活力方面的卓越作用。对健康维持推荐的每日剂量为30mg：在治疗各种疾病中需要相当高的量，而对补充已发现了益处。辅酶 Q10应与含有脂肪的膳食一起服用，甚至较佳地与豆油或植物油结合，这可增加它的完全实质性的吸收。人体可迅速吸收辅酶 Q10的补充。已报告每日剂量高达400mg。
研究者表示：“类维生素辅酶Ｑ10可能是新世纪细胞、生化治疗的‘引路人’,它是对现行医疗方法的补充和延伸”。如今，欧美、日本等发达国家，已把人体内辅酶Q10含量的高低作为衡量身体健康与否的重要指标之一。
营养屋辅酶Q10产品特点
1、加拿大营养屋原装进口，CGMP车间生产，国际国内双重认证；
2、采用国际先进的MFE法制取，生物活性高，吸收利用率好。
参考资料来源： http://news.qianyecao.com/news/new-4661.html
有很多的，这里只举些例子，更多的可以关注一下药学网站医学杂志。
美洛西林舒巴坦、头孢哌哃钠舒巴他钠、头孢哌酮他唑巴坦、哌拉西林舒巴坦。
这几个是比较常用的酶抑制剂抗生素。
请问有DPD二氢嘧啶脱氢酶活性检测的
试剂盒吗？HPLC方法有些麻烦。
酶抑制作用（enzyme inhibition）是指酶的功能基团受到某种物质的影响，而导致酶活力降低或丧失的作用。该物质即称为酶抑制剂。酶抑制剂对酶有选择性，是研究酶作用机理的重要工具。很多药物，毒物和用于化学战争的毒剂都是酶抑制剂。此外，还有一些具有一定功能的存在于动植物体内的生物大分子也是酶抑制剂。 酶受抑制时其蛋白部分并未变性。由于酶蛋白变性造成的酶失活作用，以及除去活化剂（如酶活力所必需的金属离子）而造成酶活力的降低或丧失，不属于酶抑制作用的范畴。
转氨酶升高是个很常见的情况，并不一定是肝脏出了问题。因为转氨酶非常敏感，很多因素会引起转氨酶正常值的上下波动，健康人在一天之内的不同时间检查，转氨酶测量结果都可能不一样，早期的转氨酶高一般都用五味子来降低转氨酶。
非病理原因导致转氨酶高得情况
1、健康人如果剧烈运动后检查转氨酶就会发现转氨酶升高。
2、如果过于劳累，会导致转氨酶升高。
3、检查前如果吃过油腻的食物或酗酒都会导致转氨酶升高。
4、怀孕的人，也会导致内分泌失调，使得转氨酶升高;
5、营养不足 饮食结构不合理如低蛋白饮食，尤其是当食物中缺乏胱氨酸、维生素E时，亦可使ALT升高。
6、日常服用的药物所产生的副作用也会导致转氨酶升高，比如红霉素、安眠药、解热镇痛药、避孕药膏还有半夏、槟榔、青黛等中药。
病理性原因导致转氨酶高得情况
1、病毒性肝炎这是引起转氨酶高常见的疾病，其他类型的肝炎也可导致转氨酶高。
2、多种药物和化学制剂都能引起转氨酶高，但停药后可恢复正常。
3、肝硬化与肝癌肝硬化活动时，一般都会出现转氨酶高。
4、胆道疾病如胆囊炎、胆石症急性发作时，除伴有发热、腹痛、恶心、呕吐、黄疸等情况外，还可引起血胆红素及转氨酶高。转氨酶是从胆管排出的，如果有胆管、胆囊及胰腺疾患，胆管梗阻，也可使转氨酶升高。病床上常见的有胆囊炎、胆管蛔虫、肝胆管结石、胆囊及胆管肿瘤、壶腹部周围癌症、先天性胆管扩张症、急慢性胰腺炎、胰头痛以及出血坏死性胰腺炎。
5、心脏疾病急性心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭时，可引起转氨酶高。
6、其他某些感染性疾病，：除肝脏外，体内其他脏器组织如心、肾、肺、脑、睾丸、肌肉也都含有此酶。因此，当心肌炎、肾盂肾炎、大叶性肺炎、肺结核、多发性肌炎、甲状腺功能亢进症、急性败血症、肠伤寒、流脑、疟疾、钩端螺旋体病、流行性感冒、麻疹、血吸虫病、挤压综合征等患者中，亦可见血中转氨酶升高。
7、是否服用过对肝脏有损害的药物，如果有，一定要注意药物性肝炎的可能；
8、女性还要注意有无自身免疫性肝炎的可能，检查自身免疫抗体（抗核抗体、抗平滑肌抗体等）是否为阳性；
9、既往是否有胆囊炎、心脏病、肾炎等疾病，这些病也可以引起转氨酶升高；
综上所述，引起转氨酶升高的原因很多，必须认真检查，明确病因，针对病因加以治疗。
转氨酶水平在0—40之间是正常的。如果超出正常范围，医生会建议再查一次，排除由于实验室设备故障和操作错误等因素造成误差的可能。如果转氨酶水平还高，多半是由病毒性肝炎或其他肝病所致。但要确定是不是病毒性肝炎，还需要做其他检查，结合病史、症状、体征等全面分析。展开
相关疾病：性功能障碍盲子宫内膜异位症男性，50岁，腰部及双下肢疼痛3周。入院查体 : 体温36.5℃，脉搏64次/min，呼吸20次/m...
同题，请大神指正
1.反应混合液
0.2MTris-HCl缓冲液pH=8.00.20ml
15mM4-AA溶液0.10ml
0.2%（w/v）苯酚溶液0.10ml
2.0M甲醇溶液0.25ml
50U/mlPOD溶溶液0.10ml
超纯水0.25ml
备注：
*50U/mlPOD溶液：将500U的POD溶于10ml超纯水中并混匀。
2.反应终止液
无水乙醇
3.酶稀释缓冲液
10mMTris-HCl缓冲液pH=8.0
4.说明
（1）4-AA：4-氨基安替比林
（2）POD：辣根过氧化物酶
5.过程
精确称量约20mg样品，加酶稀释缓冲液至总量为20ml，用酶稀释缓冲液稀释，根据需要调节浓度（χ，χ≤0.04mg/ml）
6.实验
1.准确地吸取1.0ml反应混合液到小试管中后，在37℃预孵育。
2.5分钟后，加入50μL酶溶液，并在37℃混合开始反应。在空白对照中，加入50μL酶稀释缓冲液代替酶溶液。
3.在反应开始5分钟后，加入2.0ml反应终止液以终止反应。
4.测量480nm处的吸光度。
吸光度样本溶液：As
空白对照：Ab
△A=（As-Ab）≤0.20Abs
辅酶 Q10在脏器(心脏、肝脏、肾脏）、牛肉、豆油、沙丁鱼、鲭鱼和花生等食物中含量相对较高，摄入大约1斤沙丁鱼、2斤牛肉或3斤花生可分别提供约30mg辅酶Q10。
辅酶Q10是1957年被发现，1958年被卡鲁福鲁卡斯博士认定了化学结构，并且获得 了美国化学学会的最高荣誉Priestly Medal，被称为辅酶Q10的研究之父，当时他提出辅酶Q10对心脏机能起着重要的作用。在实际生活中，卡鲁福鲁卡斯博士，40年来，一直服用Q10，直到91岁去世为止，作为现役教授他一直都是精力充沛的从事科研活动。
辅酶 Q10在脏器(心脏、肝脏、肾脏）、牛肉、豆油、沙丁鱼、鲭鱼和花生等食物中含量相对较高，摄入大约1斤沙丁鱼、2斤牛肉或3斤花生可分别提供约30mg辅酶Q10。
辅酶Q10是1957年被发现，1958年被卡鲁福鲁卡斯博士认定了化学结构，并且获得 了美国化学学会的最高荣誉Priestly Medal，被称为辅酶Q10的研究之父，当时他提出辅酶Q10对心脏机能起着重要的作用。在实际生活中，卡鲁福鲁卡斯博士，40年来，一直服用Q10，直到91岁去世为止，作为现役教授他一直都是精力充沛的从事科研活动。
病情分析：你好，在化验肝功能时，转氨酶高提示肝细胞有损伤的情况的，不过如果只是稍微高一点，这个到不要紧的意见建议：有时在化验前休息不好，睡眠不足，饮食不节，过度饮酒或劳累，精神压力大，都有可能引起转肝功能轻度异常的，如果你没有不适的症状，可以先观察一段时间，在这个期间有一个合理的生活和饮食习惯，保持心情舒畅，避免过度劳累，这样会很好的。
荧光素酶报告基因
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。
中文名
荧光素酶报告基因
外文名
Luciferase
底 物
荧光素(luciferin)
生物荧光
bioluminescence
转录因子
反式作用因子
转录因子
行使调控基因表达的蛋白质分子
简介
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。
应用原理
转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase assay）是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。
其原理简述如下：
（1）构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒，如pGL3-basic等。
（2） 将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子，则荧光素酶基因就会表达，荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比。
（3） 加入特定的荧光素酶底物，荧光素酶与底物反应，产生荧光，通过检测荧光的强度可以测定荧光素酶的活性，从而判断转录因子是否能与此靶启动子片段有作用。
技术流程
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。
（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
（4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照，提纯备用。
（5） 培养293（或其它目的细胞），并接种于24孔板中，生长10-24小时（80%汇合度）。
（6） 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。
（7）提取蛋白并用于荧光素酶检测。
（8） 加入底物，测定荧光素酶的活性。
（9） 计算相对荧光强度，并与空载对照比较。
发展
双荧光素酶报告基因测试∶ 结合萤火虫和海洋腔肠荧光素酶先进的共报告基因测试技术在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时, 通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal, GUS)不够便利,因为各自的测试化学,处理要求检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL 载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供 PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品。对于正在使用萤火虫荧光素酶报告基因载体的研究人员。双荧光素酶报告基因测试系统将使他们体会到该系统的便利。
体外分泌的荧光素基因:目前NEB公司提供新型的可在细胞外分泌的荧光素酶,分别是Gluc和Cluc,具体使用帮助可在NEB官方网站找到.展开
做磷酸化蛋白WB，提取蛋白时不加磷酸酶抑制剂会有影响，大不大要看具体的实验结果
不加磷酸化抑制剂也可以做磷酸化蛋白WB，但是有可能会影响具体的实验结果，大部分时候不加磷酸化抑制剂也能得到结果的。
需要注意蛋白的磷酸化是一个非常迅速的反应，所以取样品的过程要迅速，样品要新鲜。
所以做磷酸化蛋白WB，提取蛋白时不加磷酸酶抑制剂会有影响
苏公网安备 32059002001627号