| Description: TurboNucleaseTMisanultra-purerecombinantformofSerratiamarcescensextracellularendonuclease(encodedbythesamegeneasBenzonase)producedinE.coliusingaproprietaryprocess.Thisnon-specificendonucleasehydrolyzesbothsingle-anddouble-strandednucleicacids(DNAandRNA)to5’-phosphorylatedoligonucleotidesof1-4basesinlength.TurboNucleaseisahighlypurifiedhomodimerof27kDasubunitsthathasexceptionallyhighspecificactivityandisfreeofproteaseactivity.TurboNucleaseisidealtodigestnucleicacidsandtoreduceviscosityduringproteinpurificationandsamplepreparation. ProteinType: Endonuclease Source: E.coli UnitDefinition: OneunitofTurboNucleaseconverts1.0OD260ofsalmonspermDNAintoacid-solublenucleotidesin30minutesat37oCinareactionbufferof50mMTris-HCl,pH8.0and1mMMgCl2.Thiscorrespondstocompletedigestionof50µgofsalmonspermDNAintooligonucleotides.TurboNucleasehassimilarspecificactivityasBenzonase Storage: StoreTurboNucleaseat-20oC. EndotoxinLevel: < 0.1 EU / 1,000 units of TurboNuclease as determined by the Endo-Safe LAL Assay. |
Accelagen是一家快速成长的基因到蛋白质公司,提供优质的服务和产品.Accelagen团队在许多项目中展示了独立的研究能力,并提供了创新的解决方案。我们的科学家在抗体、GPCRs、激酶、核受体和许多其他药物靶标和治疗蛋白的生产方面有丰富的经验。多年来,Accelagen建立了项目及时完成的无与伦比的记录。
Accelagen
我公司全国总代理,华东地区代理accelagen专业经营进口胎牛血清、细胞因子、ELISA试剂盒、细胞、抗体、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、其产品吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA实验等。
Accelagen 是一个快速成长起来的gene-to-protein公司。可提供gene-to-protein全方位解决方案。该公司生产的重组蛋白已经广泛应用于基 于结构的药物设计(SBDD)和高通量筛选(HTS)领域,Turbo3C(HRV3C)Protease,TurboTEVProtease,TurboNuclease是该公司极具性价比的优质产品。Accelagen重组蛋白表达和纯化服务可为生物学科研人员及药物研究提供高品质的重组蛋 白。
Accelagen公司迅速的从基因研究到蛋白质研究成长起来的一个公司,它可以提供gene-to-protein全方位解决方案。Accelagen公司生产的重组蛋白已经广泛应用于基于结构的药物设计(SBDD)和高通量筛选(HTS)领域,用于各大药厂的药物研究与生产。其中Turbo3C(HRV3C)Protease、TurboTEVProtease、TurboNuclease是Accelagen公司极具性价比的优质产品。Accelagen重组蛋白表达和纯化服务可为生物学科研人员及药物研究提供高品质的重组蛋白。目前,嘉美公司有部分Turbo3C(HRV3C)Protease、TurboTEVProtease、TurboNuclease这三种产品的试用装,欢迎申请试用。

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求助,做蛋白酶抑制试验,胃蛋白酶抑制剂不溶于水,需要先溶于甲醇再加入酶液里面吗,还是直接加入酶液里面就可以起作用呢,求大神指点啊
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Exercisedampensaromataseinhibitor–relatedjointpain
http://www.internalmedicinenews.com/specialty-focus/oncology-hematology/single-article-page/exercise-dampens-aromatase-inhibitor-related-joint-pain/33383ff19a0cd42399a7cf8590708ebf.html
SANANTONIO–Adoptingastandardexerciseprogramresultedinaclinicallymeaningful30%reductioninaromataseinhibitor-associatedjointpaininbreastcancerpatientswhoparticipatedinayear-longrandomizedtrial.
TheexerciseprescriptionutilizedintheHOPE(HormonesandPhysicalExercise)trialwaswhat’srecommendedinnationalguidelinesbothforcancersurvivorsandhealthyadults:150minutesperweekofatleastmoderate-intensityaerobicactivity,suchasbriskwalking,alongwithtwostrength-trainingsessionsperweek,MelindaL.Irwin,Ph.D.,explainedattheSanAntonioBreastCancerSymposium.
TheHOPEstudiesenrolled121postmenopausalwomenwhohadstage1-3,hormonereceptor–positivebreastcancersandwerephysicallyinactiveandoverweightyetphysicallyabletoexercise.Atenrollment,theywereexperiencingmoderatearomataseinhibitor(AI)–associatedjointpain,definedasascoreof5-7onthe0-10BriefPainInventory(BPI),afterabout18monthsonthemedication.Roughlytwo-thirdsofparticipantshadnohistoryofjointpainpriortostartingAItherapy;therestreportedtheAIexacerbatedtheirpreexistingjointpain.Subjectswererandomizedtotheexerciseprogramortousualcare,whichincludedwritteninformationabouttheimportanceofexercise.
Theprimarystudyendpointwasthe12-monthchangeinBPIworstpainscore,whichdroppedbyanaverageof30%amongtheexercisegroup.Thistranslatedtoanimprovementinpainlevelfrommoderateatbaselinetomildatfollow-up.Inaddition,BPIscoresratingpainseverityandpaininterferenceimprovedbyabout20%.Incontrast,patientsintheusualcarecontrolgroupexperiencedaslightincreaseinBPIscoresinallthreedomainsovertime,addedDr.Irwin,co-leaderofthecancerpreventionandcontrolresearchprogramatYaleUniversityCancerCenter,NewHaven,Conn.
TheHOPEresultsreceivedanenthusiasticaudiencereception.Physicianswereparticularlyimpressedwiththe70%exerciseadherencerateoverthecourseofayear.Theyaskedhowtheycankeeptheirpreviouslysedentarypatients’commitmenttoregularexercisefromwaningafteraninitialburstofenthusiasm,assooftenhappens.
Dr.Irwinrepliedthatadherencetolifestylechangeisalwaysachallenge.Socialsupportisquitehelpful.TheexercisegroupinHOPEreceivedapaidgymmembershipandmetinsmallgroupswithapersonaltrainertwiceweekly.
"Thewomenreallybondedwitheachother.Andtherearenowagrowingnumberoffreeprogramsthroughoutthecountry,whichgivecancersurvivorsastartonanexerciseprogramwithafreegymmembershipforseveralmonths.Forexample,theLivestrongFoundationhaspartneredwiththeYMCAtoofferfreeexerciseprogramsforcancersurvivorsatlocalYs,"shesaid.
TheHOPEtrialwasfundedbytheNationalCancerInstitute.Dr.Irwinreportedhavingnofinancialconflictsofinterest.
Thisdegreeofimprovementinjointpainisgreaterthanreportedinstudiesofglucosamine,acupuncture,orvitaminDsupplementation,shenoted.
Theimprovementinpainscoresintheexercisegroupwasgreaterat12monthsthanat3or6,suggestingthatayear-longexerciseprogramisprobablynecessarytoseesustainedreductioninjointpain.
At12monthsoffollow-up,womenintheexercisegroupaveraged159minutesofphysicalactivityperweek,110minutesmorethancontrols.Compliancewiththesupervisedexerciseprogramwasnotablygood,withwomenattendinganaverageof70%ofthetwice-weeklysmall-groupstrength-trainingsessions.
InadditiontotheimprovementinAI-relatedarthralgias,theexercisegroupexperiencedancillarybenefits:amean6.5%improvementinpeakoxygenconsumption,orVO2max,comparedwithbaseline,alongwitha3%reductioninbodyweight.
HOPEwasthefirstrandomizedtrialtoexaminetheeffectsofexerciseonAIsideeffectsinbreastcancerpatients.TheimpetusforthestudywastherecognitionthatarthralgiasarethemostcommonreasonforpooradherencetoanddiscontinuationofAItherapy.Upto20%ofbreastcancerpatientsdiscontinuetheirAIwithinthefirstyear.Andbothearlydiscontinuationandpooradherencehavebeenshowntobepredictiveofincreasedmortalityrisk.
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。
中文名
荧光素酶报告基因
外文名
Luciferase
底 物
荧光素(luciferin)
生物荧光
bioluminescence
转录因子
反式作用因子
转录因子
行使调控基因表达的蛋白质分子
简介
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。
应用原理
转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子,也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合,这些特异性的序列被称为顺式作用元件,转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合,从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验(luciferase assay)是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。
其原理简述如下:
(1)构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒,如pGL3-basic等。
(2) 将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子,则荧光素酶基因就会表达,荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比。
(3) 加入特定的荧光素酶底物,荧光素酶与底物反应,产生荧光,通过检测荧光的强度可以测定荧光素酶的活性,从而判断转录因子是否能与此靶启动子片段有作用。
技术流程
(1) 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
(2)设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中。
(3)筛选阳性克隆,测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
(4) 扩增转录因子质粒,提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照,提纯备用。
(5) 培养293(或其它目的细胞),并接种于24孔板中,生长10-24小时(80%汇合度)。
(6) 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。
(7)提取蛋白并用于荧光素酶检测。
(8) 加入底物,测定荧光素酶的活性。
(9) 计算相对荧光强度,并与空载对照比较。
发展
双荧光素酶报告基因测试∶ 结合萤火虫和海洋腔肠荧光素酶先进的共报告基因测试技术在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时, 通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal, GUS)不够便利,因为各自的测试化学,处理要求检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL 载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供 PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品。对于正在使用萤火虫荧光素酶报告基因载体的研究人员。双荧光素酶报告基因测试系统将使他们体会到该系统的便利。
体外分泌的荧光素基因:目前NEB公司提供新型的可在细胞外分泌的荧光素酶,分别是Gluc和Cluc,具体使用帮助可在NEB官方网站找到.展开
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