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Braintree/Accuris qMAX Green qPCR Mix 20ul volume/Low Rox, reactions 1000/PR2000 L-1000
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AccurisqMAX™GreenqPCRMix

  • Superiorsensitivityandfastcyclingwithexceptionalresults 
  • IncludesAccurisHotStartTaqPolymeraseforgreaterspecificityandaccuracy 
  • Idealforlowcopynumbertemplates 
  • EarlyCtvaluesanddetectionacrossabroaddynamicrange
  • Readytouse2XMasterMix

Suppliedasaready-to-use2Xmastermix,qMaxGreenhasbeenengineeredforhighsensitivity,factcyclingandexcellentreproducibility. AccurisHotStartPolymeraseprovidesaccuratePCRofavarietyoftemplatesincludinglowcopynumberanddifficultsequences,whiletheproprietaryqMaxGreenintercalatingdyeexhibitshigherfluorescenceandlowerPCRinhibitionthanotherpopulargreendyes. Thesetwocomponentsaresupportedbyaspeciallyformulatedbufferwithanexactingcombinationofsalts,PCRenhancers,stABIlizersandpHthatresultsinearlierCtvaluesandahighspecificityacrossabroaddynamicrange. qMaxGreenqPCRMixisidealforgeneexpressionanalysis,genotypingstudiesanddetectionofDNAandCDNA. BothahighROX™andlowROXformulationareavailableforcompatibilitywithallpopularqPCRinstruments. Tocheckcompatibilitywithaspecificinstrument,useourreagentselectoratwww.accuris-usa.com/PCRselector.

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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POC分子诊断兴起于欧美,其实现了核酸提取、(扩增)、检测一体化的优势,为分子诊断带来巨大的发展机会,也在国内分级诊疗大潮下获得“万孚生物”的青睐。 查看更多>
近年来,随着中国医疗不断的改革,人们对自身健康愈加关注都驱动了体外诊断试剂市场的需求,加上国家政策的大力扶持,体外诊断试剂未来将成为并购高发的产业地带。体外诊断试剂是指在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中,对人体样本进行体外检测的试剂,具体来说就是对人体的各种体液、细胞、组织样本进行检测的试剂,和人们健康息息相关,例如人们去体检时候检测病原、抗体、查询血型、基因以及遗传疾病都需要体外诊断试剂进行... 查看更多>
飞利浦医疗(苏州)有限公司报告,由于螺母不恰当安装可能会导致球管组件、探测器盒脱落或床面板晃动等原因,飞利浦医疗(苏州)有限公司对其生产的数字化医用 X 射线摄影系统 DuraDiagnost[注册号:苏食药监械(准)字 2013 第 2310215 号、苏食药监械(准)字 2013 第 2301194 号、苏食药监械(准)字 2013 第 230610 号] 主动召回。 召回级别为二级。涉及产品的型号、规格及批 查看更多>
分子诊断是精准医疗的技术基础,也是IVD增速最快的子行业,且国内外技术差异最小。分子诊断细分技术多,目前PCR最为成熟且应用最广,基因测序相对最新。而随着贝瑞和康和华大基因的先后上市,投资市场对基因领域怀有极大希望和热情。我国分子诊断技术发展现状分子诊断主要是应用分子生物学方法检测生物体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。由于分子诊断可以从基因层次进行检测,因此检测灵敏度和准确性的优势较为明显,可在感染初期识别病毒或者提早... 查看更多>
(25 个/包) 37 4 DNA 末端修复和纯化 Enzymatics 末端修复试剂盒 24 盒(48 次/盒) 1、7、17 5 接头连接和纯化 T4 DNA Ligase 试剂盒 24 盒(48 次/... 查看更多>
  2013年8月9日-10日,国际分子诊断产业高峰论坛在武汉光明万丽酒店举行,公司负责人周主任作为公司代表,参加了论坛会议。作为分子诊断产业的第一战略峰会,该论坛邀请了罗氏、雅培、凯杰、华大、Illumina,LlifeTech等行业领衔者聚集会场,大会就分子诊断产业现状及政策解析、基因诊断和分型在个体化医疗中的应用、分子癌变与癌变早期检测、核酸质谱Massarray分析技术在分子诊断中的应用、仪器企业与试剂企业的发展、基因测序技术在... 查看更多>
科佰生物参加2017第五届分子诊断产业高峰论坛 来源:科佰生物 日期:2017年6月22日 10:45 六月的杭州,碧荷连天,红莲映日,别有一番风味。6月19日,第五届分子诊断产业高峰论坛在这座秀丽古城举办,为西子湖畔增添了一丝别样的色彩。就像六月的红莲一样,如今的分子诊断产业正值火红时期,近几年来,分子诊断市场正以超过20%的增速飞速增长,未来随着医疗改革的持续推进等因素,分子诊断产业... 查看更多>
解放军总医院聋病分子诊断中心将于2011年8月6日—8月13日,举办耳聋基因诊断高级研讨班(北京市继续医学教育项目)暨全国第五届耳聋基因诊断学习班(国家级继续医学教育项目),诚邀国内耳鼻咽喉-头颈外科医生、实验室和检验科人员,计划生育、妇幼保健、残联等相关人员,以及所有对此领域感兴趣的朋友参加。 本届耳聋基因诊断高级研讨会将作为2011北京国际耳科 查看更多>
“2015(第三届)分子诊断产业高峰论坛”于10月16-17日在成都隆重举行,此次会议焦点为“覆盖分子诊断,了解行业新趋势;聚焦基因检测,挖掘市场新蓝海”,来自分子诊断领域的200余位专家代表参加了此次盛会。     全式金生物(TransGen Biotech)作为国内领先的分子、细胞生物学试剂生产厂家,在会场NO.1展台设展。现场为大家展示和介绍蛋白提取试剂盒、42-65℃高温反转录试剂盒、全封闭热启动Taq酶、新型高灵敏qPC... 查看更多>
我司获批组建广东省临床医学分子诊断工程实验室2011-04-29近日,广东省发展和改革委员会正式下达了《关于组建第一批广东省工程实验室的通知(粤发改高技术[2010]1286号)》,全省共有12个实验室获批,其中我公司获批组建广东省临床医学分子诊断工程实验室,成为广东省生物医药领域三家获批工程实验室之一。实验室将围绕临床医学分子诊断技术的需求,研发新型分子诊断试剂、核心原料、仪器设备和配套软件,建设分子诊断技术公共服务平台,为实现中国一... 查看更多>
2015第四届国际分子诊断技术与应用论坛 查看更多>
脑脊液(Cerebrospinal Fluid, CSF)是诊断中枢神经系统感染的重要标本,目前主要依赖常规生化、染色镜检、培养和血清学检测判断病原。然而这些方法有的灵敏度、特异度有限,易受抗菌药物影响,有的周期较长,临床仍有相当一部分感染的病原体(15~60% 脑膜炎和 40~70% 的脑炎)不能确定。近年来,分子检测技术突飞猛进,越来越多地应用到了病原体检测领域。它是指利用标 查看更多>
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在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
可能是不是机器没信号造成的啊,我看你这个情况很像,建议楼主查找下说明书,按照说明书来具体操作呢
伯乐生命ddPCR(即微滴式数字PCR)系统能够确定核酸分子的绝对数目,让科研人员更加精确地研究生物学。已经被广泛应用到医学、生物学等方面,如拷贝数变异、突变检测、单细胞基因表达分析等。并且已经在癌症分子标志物的发现、传染病研究、基因组结构变异分析、基因表达分析等领域展现了强大的优势。
参考体系
酶切体系(参考):
质粒17ul
buffer2ul
酶1ul
----------37度,过夜。

酶切位点
在质粒上,所选的两个酶的酶切位点不可以靠的太近,如6bp
建议载体质粒不要用双酶切,用两次单酶切之后切胶回收.另外建议加多以下两个个步骤:
1.PCR产物的酶切片断做TA克隆,之后再酶切回收,与载体相连.
2.目的片段与载体连接之后建议先转化DH5α这些容易转化的菌株.然后筛选到的阳性克隆测序之后,提质粒,用质粒转化BL21,转化率很高.质粒不一定要新鲜提取,我的质粒放在-20度冻了大半年,作为载体完全没问题,只要确定不降解.

酶切的量、小提的质粒浓度和纯度
浓度:
根据我的实验,OD值0.5左右吧,不一定很准确。260:280通常是1.8左右。3ml菌过夜,进行小提,并没有对OD限定.小提的效果好不好主要决定于你的溶液I,II,III的质量以及你的操作手法,
特别是加溶液II时最为关键。现在有很多试剂盒既便宜效果又好,条件允许的话可以考虑购买。
琼脂糖电泳目测,不一定测OD,连接比例更重要.
质粒表达载体不用测序的,通常都是跑电泳看一下质量,然后再根据图谱选择适当的酶,看能不能够切开,如果能够切开,基本上就可以采用了。
纯度:
酶切对质粒的纯度要求高,如果蛋白和RNA去的不干净会影响酶切;
我们用于酶切的质粒的ratio值一般在1.8左右。
酶量;
在量上最好不超过酶的酶切能力,一般酶都为10U/ul,就是说酶切体系里加
1ul的酶可以在合适的温度下,1小时内消化10ugDNA,但在实际操作当中
一般酶都是过量的,而且延长了酶的作用时间,比如作用6小时。
因为酶切产物用于连接,所以我们酶切时质粒的用量尽量多,用20ul的体系
时可以如下加样,我们也有用50ul的体系切过。

回收目的片段与阳标一起进行酶切:
PCR后,电泳回收目的片断(比如玻璃奶或者一次性回收柱回收),再进行酶切。除非产物非常特异,直接酶切PCR产物效果有时不是很好,还有一般PCR体系里过量得dNTPs会影响酶切效果。酶切后,可以用标准得乙醇沉淀法沉淀酶切产物,获得高纯度得酶切产物,也即是你的黏性目断片断供后边得试验。而DNA的纯度对酶切效果是有很大的影响的。而酶切时应加个阳标(如含相应酶切位点的质粒载体)来确定酶和酶切体系是不是work的。如果这两步没问题,你的酶切肯定能顺利的。如果有阳标一起来切,容易找出问题的所在。

酶切不下
酶切这一步,本来问题不大,你严格按说明书上的要求进行就行了,包括酶量,酶切体系以及DNA的量也要按要求加入。而DNA的纯度和浓度是有必要测定的,最好OD260/280要接近2.0。DNA的量过大或是纯度太低都会影响酶切效果。万一如果无法充分酶切,但有所需要的片段,就可以根据Markers的位置回收所需片段。
因为基因组大部分是甲基化的,酶切不下来的原因一可能是内切酶活性低,或者是基因组杂质含量较高,或者盐离子浓度太高(不同的酶有不同的盐浓度).还有就是基因组酶切酶的量要求比较多,大概1ugDNA/10u酶,如果不行还可以加大量,酶量不能超过酶切体系的1/10,浓度过高里面的甘油会影响酶的活性。接头5-端是去磷酸化的,这样就可以避免接头自连,pcr结果就会有东西出来。

连接酶反应温度
空掉开低一点,一般16度连接2-3小时;
放进4度冰箱中,连接过夜,16小时

多片段连接:
将三个片断放在一起连的,效果的确不好.还是应该一个一个地连接.

连接比例
我用T载体连接PCR产物,请问片段和载体的摩尔比怎么选择连接效率好?根据什么因素来调节?有没有经验值?
一般片段:载体=3~8:1。根据片段的大小、连接时间、温度、感受态细胞等因素来调节。经验值就是3~8:1。4度连接过夜,用新鲜制备的感受态细胞,一般可以得到很好的克隆效率。
补充一句:如果PCR产物片段比较大(>1kb)的话一般用3:1的比例,如果比较小就几百bp的话用>3:1的比例连接效率能高一些。3-10:1一般没问题.
建议仔细参看Teasy的说明书

接头处理
接头的处理和连接这一步其实是挺头疼的。建议先制备和接头两粘端连接的线性质粒分子。因为这对于你接头是否完成了磷酸化和退火处理提供了一个评价体系。你接头处理完,并通过评价,你就可以放心用了。退火时的处理一般要使用专门的annealingbuffer,否则效果不好。而对于粘端连接来说,应该问题不大,唯一担心的是能进行连接的片段太少了,影响下面的PCR扩增,所以酶切这一步是很关键的。
最后一步是高保真PCR,首先建议用Taq酶进行扩增,然后再用Pfu酶扩增,因为后者效率比较低。其实你用Taq酶如果扩出来,测序经blast/n后,如果有突变,你也完全可以根据正确的序列重新设计引物将之调出来。

注意感受态

如果还是不行,建议检查一下感受态菌的质量。
我的感觉是感受态很重要,你可以转化连接产物的同时用纯质粒转化进行感受态活性的验证,后者取1ul转化,10ul涂板,好的感受态一般要长50个菌落以上。其次是连接体系,目的片断与载体的摩尔比为3-10:1,除此,连接酶也很重要,最好不要使用储存太久的酶,建议你下次做的时候用别人的酶试一下。
转化要用空质粒作对照,保证感受态没问题,细菌一般长12到16小时就形成可见的菌落,转化后的菌落一般比为转化的菌落小一些。
PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖的酶促合成反应,扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。
数字PCR(Digital PCR)仪器  伯乐生命bio-rad QX200 微滴式数字PCR (ddPCR) 系统可对DNA或RNA分子进行绝对定量分析,适用于 EvaGreen 或基于探针的数字PCR应用领域。  QX200 Droplet数字PCR(Digital PCR) 系统的应用领域:  癌症生物标志物研究和拷贝数变异分析  以卓越的灵敏度和准确度测量癌症突变的变异程度、检测稀有的 DNA 靶拷贝以及解析拷贝数变异状态。  病原体检测  精确地对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析,从而检测和监测病原体。  与新一代测序 无缝对接  无需使用标准曲线,直接对 NGS 库执行绝对定量分析。  基因表达分析  可对少量 mRNA 和 miRNA 的细微变化进行准确及重复性极佳的检测。  环境监测  使用 QX200 系统可测试多种环境样品,例如土壤和水。  食品检测  采用经过验证的 ddPCR 方法对转基因生物体 (GMO) 进行评估。向左转|向右转
各位战友好!大家有没有了解过数字PCR仪!最近研究室准备采购一台,不知哪个公司的性能好,主流的好像有Raindance数字PCR仪和伯乐的QX100微滴式数字PCR仪,感觉都还行,犹豫中……希望各位战友给点建议啊!
20 世纪末,Vogelstein 等提出数字PCR( digitalPCR,dPCR) 的概念,通过将一个样本分成几十到几万份,分配到不同的反应单元,每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA 模板) ,在每个反应单元中分别对目标分子进行PCR 扩增,扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析。
数字PCR技术不断发展,Bio-Rad、LIFE Technologies及RainDance等厂家相继推出技术较为成熟的数字PCR产品。
QuantaLife公司开发出的微滴数字PCR技术。该产品还获得了2011年度Frost & Sullivan北美新产品创新奖。2011年10月,Bio-Rad公司收购了QuantaLife和ddPCR技术,相继推出了QX100、QX200微滴式数字PCR系统。
与其他数字PCR技术不同,Bio-Rad对样品进行微滴化处理。据该公司基因表达部门的销售经理Richard Kurtz介绍,他们的独特优势是能够产生非常均一、重复的1纳升液滴。这样的好处是每个样品形成20,000个液滴,而其他系统只能分成760-3,000个部分。分得越多,则意味着分析越准确。
数字PCR是一种核酸分子绝对定量技术。当前核酸分子的定量有三种方法,光度法基于核酸分子的吸光度来定量;实时荧光定量PCR(Real Time PCR)基于Ct值,Ct值就是指可以检测到荧光值对应的循环数;数字PCR是最新的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种绝对定量的方法。主要采用当前分析化学热门研究领域的微流控或微滴化方法,将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后,有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积,就可以推算出原始溶液的核酸浓度。向左转|向右转
在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
相关疾病:脑血管疾病【下载】《数字化卒中单元管理系统》单机试用版
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《数字化卒中单元管理系统》单机试用版
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用户名:ttyy_dsu
密码:123456

单机试用版版为免费
单机试用版光盘版收取一定材料费
正式单机版1万元
正是网络版5万元
联系电话:67050318或67050281

《数字化卒中单元管理系统》单机试用版本
1.按照提示进行安装,最好不要改变软件默认的安装目录。安装过程中提示需要密码,你可以填写任何密码。
2.在“C:ProgramFilestyy数字化卒中单元管理系统数字化卒中单元管理系统”内找到“DSU.exe”,创建快捷方式。
3.第一次登陆系统,用户名为:admin密码:123,然后以管理员身份添加不同工作人员,以便于行使不同的职责。
4.检查报告仍然以“北京天坛医院神经内科”为表头,这也是保护版权的一种办法,请大家谅解。
5.试用版本可以添加96名患者,如果超过,试用期结束。如还需要本软件,请于天坛医院神经内科联系,mailto:yzh@bjtth.com。
6.试用版本数据储存于安装目录下的dsu.mdb文件内,如果以后想安装网络版本,试用期内的患者资料不能进入网络版的数据库。
7.《天坛国际脑血管病会议》以后,很多朋友对本软件产生兴趣,在不到一周的时间内,作者完成了单机试用版,该版本没有经过长时间调试,可能会存在一定的漏洞,如果发现请按照以上的邮箱地址发信给我。
现在申请上传:《数字化卒中单元管理系统》单机试用版

1。第一次使用的时候,首先以用户名:admin密码:123登陆
2。然后看到主界面-帮助-增加用户
3。添加新用户:语言师、康复师、心理师、主管医生、责任护士等
4。然后以责任护士的身份从新进入程序:看到主界面-操作-卒中登记,添加新患者,这样就可以在患者列表中看到患者名字
5。不同的用户只能进行自己责任的操作,而对于其他职能的工作你只能看到,不能修改。

软件为原创、独家,申请加5分,请各位朋友们支持!

卒中单元数字化管理系统.ppt(122.0k)
优点
1、多种染料及淬灭基团自由选择。
2、专利的ZENTM或TAOTM双重淬灭
基团探针设计:
·更低的背景荧光
·增强endpoint信号强度
·较少交叉污染
多种荧光及淬灭剂用于多种实验需求
PrimeTimeqPCR探针灵敏度高,可靠性大,可用于多重或数字PCR。
淬灭基团染料有多种选择(如下图),与常见的qPCR平台兼容。

为您提供严格质控的高质量探针
所有的PrimeTime探针均通过质谱和HPLC纯化验证,不同批次间产物高度一致,为您减少后顾之忧。
双淬灭基团探针提高检测灵敏度
使用ZEN或者TAODouble-Quenched探针减少背景干扰,提高检测灵敏度。独有的内部淬火剂总是位于5’端荧光基团后9个碱基与3’端IowaBlack®淬灭剂一起作用最大化探针性能(如下图)。

与传统方法相比,可以将背景噪音降低4倍(如下图A)和信号值提高大约30%(如下图B),ZENDouble-Quenched探针给出更优的表现。

对于长探针同样高效适用
对于40碱基的长探针也可以有效淬灭,这意味着在探针设计上有更多选择,比如富含AT的区域。

希望对有需要的朋友有帮助,IDT探针合成,2073904839qq.com,www.nanodigmbio.com,
色谱分析做系统适用性试验主要是为了确定分析使用的色谱系统是有效的、适用的。系统适用性通常用四个参数来确定系统的适用性:分离度、柱效、重复性和拖尾因子。
  其中分离度和柱效是二个最重要、也更具有实用意义的参数。分离度是判断两物质在一个方法中分离的程度,虽然与柱效相关,但在衡量系统适用性时,首先强调的应该是分离度,只有当色谱图中仅有一个色谱峰或测定微量成分时,规定柱效才有其特殊重要性。重复性和拖尾因子,分别对重现性和色谱峰的峰形做出了要求。重现性保证了方法的可重复性,对柱效能提出了要求,柱子老化、塌陷,拖尾因子则难以达到要求
数字PCR 和色谱分析系统及中高压层析系统提醒你:
色谱分析以分离出来时间位置来判断是何种物质,以峰的积分面积来分析其含量。色谱分析法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 ---即是一种分析方法

色谱分析系统,是基于色谱分析法的一种分析仪器,如:液相色谱、气相色谱、离子色谱、凝胶色谱等。