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| Description: | This assay employs a quantitative enzyme immunoassay technique that measures the specified antigen in samples. |
| Type: | AssayMax™ ELISA Kits |
| Samples: | Cell Culture Tissue Extract |
| Catalog Number: | EA5403-1 |
| Species: | Human |
| Format: | Sandwich ELISA |
| Size: | 96 Well Plate |
| Range: | 0.156 - 10 ng/ml |
| Research Area: | Redox Proteins, Metabolism, Homeostasis |
| Entrez Gene: | 57016 |
| Omim: | 604707 |
| UniProt: | O60218 |
| Unigene: | Hs.116724 |
| Synonyms: | AKR1B10, Aldo-Keto Reductase Family 1 Member B10, ARL-1, Aldose Reductase-Like, Aldose Reductase-Related Protein, ARP, hARP, Small Intestine Reductase, SI Reductase, AKR1B10, AKR1B11 |
| Note: | For Research Use Only, Not To Be Used For Diagnostic Purposes |
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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售后申请： 耐心讲解 优质服务
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2017-06-13
“2017(第五届)分子诊断产业高峰论坛”将于2017年6月19日－20日在杭州三立开元大酒店召开。2016年，国家精准医疗计划和个体化医学的发展要求持续推动了国内分子诊断技术的进步，进一步开拓新兴技术在临床的应用。液态活检作为精准医疗新技术，既有极高的科研价值，又具备助力推进精准医疗临床实践的巨大潜能，可用于癌症早期筛查、诊断、监控、治疗方案指导和疗效评估及产前诊断、器官移植诊断等领域。伴随诊断应用的发展，液态... 查看更多
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2021-07-26
2013年8月9日-10日，国际分子诊断产业高峰论坛在武汉光明万丽酒店举行，公司负责人周主任作为公司代表，参加了论坛会议。作为分子诊断产业的第一战略峰会，该论坛邀请了罗氏、雅培、凯杰、华大、Illumina,LlifeTech等行业领衔者聚集会场，大会就分子诊断产业现状及政策解析、基因诊断和分型在个体化医疗中的应用、分子癌变与癌变早期检测、核酸质谱Massarray分析技术在分子诊断中的应用、仪器企业与试剂企业的发展、基因测序技术在... 查看更多
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2021-08-07
嘉美生物是一家主要从事Annexin V,信号转导抗体,重组人和动物蛋白,磷酸化抗体,各种动物ELISA试剂盒,生物实验服务等研发与销售的高科技生物公司,免费热线:400-698-4168。 查看更多
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2019-01-23
【行业应用】PCR 技术，即聚合酶链反应(polymerase chain reaction，P 查看更多
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脑脊液（Cerebrospinal Fluid, CSF）是诊断中枢神经系统感染的重要标本，目前主要依赖常规生化、染色镜检、培养和血清学检测判断病原。然而这些方法有的灵敏度、特异度有限，易受抗菌药物影响，有的周期较长，临床仍有相当一部分感染的病原体（15～60% 脑膜炎和 40～70% 的脑炎）不能确定。近年来，分子检测技术突飞猛进，越来越多地应用到了病原体检测领域。它是指利用标 查看更多
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2017-12-05
关于苏州市广济医院采购“微滴式数字PCR仪”进口产品专家论证意见公示 查看更多
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2021-08-08
BD两款新型分子诊断试剂通过FDA和CE认证 查看更多
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2021-06-03
靶向化药物和个性化治疗的发展和应用，是当代医学发展的主要潮流和方向，尤其是在恶性肿瘤、自身免疫、心脑血 查看更多
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2021-07-23
6月15日，《新英格兰医学杂志》(NewEnglandJournalofMedicine，NEJM)的官网上挂出了FDA局长MargaretHamburg和美国国立卫生研究院(NIH)院长FrancisCollins共同撰写的文章。 两大机构的领导者在该文中称，两者正在共同致力于寻求最佳途径来开发新的治疗方法和 查看更多
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2021-08-20
“分子诊断技术在我国大有用武之地，原因之一是我国人口多，民族多，从临床生物学角度来讲，人口基因库信息丰富，有待分子诊断技术进行解密； 查看更多
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2021-08-14
飞利浦医疗（苏州）有限公司报告，由于螺母不恰当安装可能会导致球管组件、探测器盒脱落或床面板晃动等原因，飞利浦医疗（苏州）有限公司对其生产的数字化医用 X 射线摄影系统 DuraDiagnost[注册号：苏食药监械（准）字 2013 第 2310215 号、苏食药监械（准）字 2013 第 2301194 号、苏食药监械（准）字 2013 第 230610 号] 主动召回。 召回级别为二级。涉及产品的型号、规格及批 查看更多
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2021-09-05
亚洲成癌症早期分子诊断新兴市场 查看更多
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蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
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赛默飞世尔科技中国 赛默飞世尔科技中国公司 赛默飞世尔科技中国...123
2017-10-03
环境是人类赖以生存的自然条件，包括水、土壤、空气等物质。环境中的变化会对人类的日常生活造成潜移默化的影响。
水质分析
水是生命之源，清洁的环境水质是社会可持续发展的重要目标。
>水质常规指标检测解决方案
> 化学污染物指标测试
空气质量监测
生命离不开空气。保障空气质量安全，维护公共健康是政府和个人都关心的问题。赛默飞通过先进的空气质量监测技术，操作简便和性能可靠的监测仪器，高效稳定的系统，能开展气体检测和温室气体分析。
> 环境空气质量自动系统
> 大气复合污染（灰霾）监测解决方案
> 污染源烟气连续自动监测解决方案
> 汞监测解决方案
> 温室气体解决方案
> 在线环境及流程监控
> 气溶胶及气体组分在线离子色谱监测系统
辐射测量与安全
赛默飞是全球最重要的辐射测量和安全仪器供应商之一，产品应用于核电站、国土安全、军队、辐射管理部门、环保和医疗机构、应急响应等众多领域和机构。
> 便携式多功能辐射巡测系列产品
> 分布式网络辐射监测软件系统
> 长寿命放射性核素监测
土壤和固体废弃物
土壤及固体废弃物监测是环境监测中未来的重点领域。环境污染物可在土壤中长期积累，造成持久性污染。在未来几十年内城市化进程中，固体废弃物污染造成的环境污染将是多数城市都无法回避的问题。
> 欧盟环保指令-RoHS指令和无卤分析
> 持久性有机污染物分析
> 样品前处理
服务中国空气检测40年，专利EPA认证PM2.5监测产品遍布各大城市。 保障食品安全的重要手段是在食用之前，对食物从原材料、生产到出厂都经过严格的检测和管理。优异的实验室集成服务还可高效率大批量处理样本，以低成本运营，并在保证产品质量符合法规要求的基础上，提升产量和效益。
应对食品安全领域各项挑战
> 环境污染物
> 微生物检测
> 非法添加剂
> 农药、兽药残留
> 转基因
> 重金属
> 食品原产地与等级区分
> 食品重属鉴别
> 食品掺杂分析
> 危害分析与关键控制点管理
> 食品中非目标物筛查……
食品安全检测方法屡获“技术创新大奖”
食品安全快速响应中心快速响应15个食品安全危机事件。 赛默飞致力于生命科学领域的技术创新，带来更好的科学成果。
生命科学是研究生命现象、生命活动的本质、特征和发生、发展规律，以及各种生物之间和生物与环境之间相互关系的科学。
遗传分析
从金级标准的Sanger测序到简单、可扩展的Ion Torrent二代测序，优化的应用、优质的耗材以及简化的解决方案实现快速、准确且经济的结果。
基因检测与功能分析
汇集核酸分析领域的顶级品牌，包括定量PCR、数字PCR技术、克隆、反转录与基因调控产品，RNA研究领域的翘楚产品。
蛋白质功能分析
包括创新化学试剂、高效分离产品、领先色谱质谱技术，以及蛋白质组学数据处理软件，能更有信心地面对蛋白质研究的挑战。
细胞培养与分析
Ion Torrent测序仪在超过90份同行出版物被引用，是出版物中引用频率较高的台式测序。
医疗健康
研制各种专业诊断的仪器和试剂，实验室常规设备和耗材，以及各种医学研究用的先进平台与产品、
病理诊断
从常规病理检测，到数字病理分析，再到分子病理诊断。针对病理 实验室特殊环境需求及高负荷工作需求，一流的仪器设备耗材，流程设计及工作优化方案，帮助病理工作者更安全，高效地完成诊断，同 时提高诊断准确率。
感染诊断
涵盖各类型培养基、血培养系统、微生物鉴定、 药敏检测，以及降钙素原检测、PCR、qPCR、测序等系列产品，可帮助临床医生作出早期感染诊断、控制感染、指导抗生素合理使用、监测治疗和疾病 预后。
过敏诊断
过敏原自身免疫疾病诊断设备与试剂采用抗原包被技术、高特异性和高稳定性，被誉为过敏原检测的金标准。
移植诊断
通过移植前对受体/供体的组织相容性抗原（HLA）的配型、相关特异性抗体以及非HLA因素的一系列检测，为移植前 准确筛选供体、移植后有效预防抗体介导性排斥反应提供科学准确的依据，提高移植手术成功率。
转化医学研究
在转化医学领域，产品和技术广泛应用于从细胞到蛋白组学，再到基因组学的研究，加速生物标记物用于伴随诊断及个体化医疗 医药产业是一个国家国民经济的重要组成部分，与国民生命健康和生活质量等利益密切相关。
赛默飞专注制药生产的每个环节。
> 研究阶段
- 基础研究 靶标发现 药物设计
- 基因功能分析
- 蛋白质分析
- 细胞培养分析
- 化合物分析和筛选
> 技术市场化阶段
- 预临床研究 一期临床 两期临床 三期临床
- 临床前评价
- 临床试验
> 生产上市阶段
- 药物生产 药物上市 四期临床
- 大规模生产
- 过程控制
- 质检和质控
- 大规模临床试验
中医药现代化整体解决方案
中医药是中华文明长期发展中积累下的宝贵财富，其有效的实践和丰富的知识中蕴含了深厚的科学内涵。
生物仿制药解决方案
在快速发展的生物仿制药领域，用简单、可靠的解决方案，提供安全的产品，最大限度缩短上市所需时间。 除医疗、生物制药、食品安全和环境还有法医行业外，赛默飞的产品与技术也在众多工业行业得到广泛应用，服务生活及工业制造的方方面面，满足各行各业的需求。
石油化工
从石化上游的原油开采、输送、炼油和乙烯生产，到下游合成材料、精细化工、橡胶加工等完整的产业体系，解决石油化工行业各业务环节中的实际问题。
> 石油炼制 > 天然气加工
> 石油产品分析 > 精细化工
> 化石生产 > 生物柴油
> 化工产品
钢铁
从材料处理到金属加工再到最终产品监控，在线及实验室的严苛金属分析，改善工作流程，提供优异的元素分析产品和服务。
> 原料处理 > 冷轧
> 炼钢 >钢加工
> 热轧 > 中心监测站
水泥
独一无二的创新技术为整个水泥加工流程提供了综合解决方案，兼顾原材料、能耗、替代性燃料使用和添加剂优化。其中具 有可靠、耐用、紧密和高性价比的分析技术，可为从小型水泥生产厂，到大规模生产研磨站的众多客户提供服务。综合的化学和包括游离氧化钙在内的物想分析， 在线确保更优的简仓控制。
能源
科学家和工程师对前沿能源相关重要材料的化学、结构和性能间相互作用实现控制。
> 燃料电池
> 发电厂
> 太阳能
机电
伴随微电子和半导体器件制作尺寸的越来越小，使用元素和化合物种类的不断增加，由此产生了一系列复杂的材料问题，为材料工程师带来了更严峻的挑战。对于这一蓬勃发展的行业，市场上并不存在有一项能够完全满足所有相关材料分析的技术。
材料
材料科学家和工程师研究和开发先进的涂料和涂层、陶瓷和玻璃、纸张和油墨等众多材料，实现对包括塑模、文物、印刷、光学部件、汽车组件等在内应用的提升。
水质分析
水是生命之源，清洁的环境水质是社会可持续发展的重要目标。
>水质常规指标检测解决方案
> 化学污染物指标测试
空气质量监测
生命离不开空气。保障空气质量安全，维护公共健康是政府和个人都关心的问题。赛默飞通过先进的空气质量监测技术，操作简便和性能可靠的监测仪器，高效稳定的系统，能开展气体检测和温室气体分析。
> 环境空气质量自动系统
> 大气复合污染（灰霾）监测解决方案
> 污染源烟气连续自动监测解决方案
> 汞监测解决方案
> 温室气体解决方案
> 在线环境及流程监控
> 气溶胶及气体组分在线离子色谱监测系统
辐射测量与安全
赛默飞是全球最重要的辐射测量和安全仪器供应商之一，产品应用于核电站、国土安全、军队、辐射管理部门、环保和医疗机构、应急响应等众多领域和机构。
> 便携式多功能辐射巡测系列产品
> 分布式网络辐射监测软件系统
> 长寿命放射性核素监测
土壤和固体废弃物
土壤及固体废弃物监测是环境监测中未来的重点领域。环境污染物可在土壤中长期积累，造成持久性污染。在未来几十年内城市化进程中，固体废弃物污染造成的环境污染将是多数城市都无法回避的问题。
> 欧盟环保指令-RoHS指令和无卤分析
> 持久性有机污染物分析
> 样品前处理
服务中国空气检测40年，专利EPA认证PM2.5监测产品遍布各大城市。 保障食品安全的重要手段是在食用之前，对食物从原材料、生产到出厂都经过严格的检测和管理。优异的实验室集成服务还可高效率大批量处理样本，以低成本运营，并在保证产品质量符合法规要求的基础上，提升产量和效益。
应对食品安全领域各项挑战
> 环境污染物
> 微生物检测
> 非法添加剂
> 农药、兽药残留
> 转基因
> 重金属
> 食品原产地与等级区分
> 食品重属鉴别
> 食品掺杂分析
> 危害分析与关键控制点管理
> 食品中非目标物筛查……
食品安全检测方法屡获“技术创新大奖”
食品安全快速响应中心快速响应15个食品安全危机事件。 赛默飞致力于生命科学领域的技术创新，带来更好的科学成果。
生命科学是研究生命现象、生命活动的本质、特征和发生、发展规律，以及各种生物之间和生物与环境之间相互关系的科学。
遗传分析
从金级标准的Sanger测序到简单、可扩展的Ion Torrent二代测序，优化的应用、优质的耗材以及简化的解决方案实现快速、准确且经济的结果。
基因检测与功能分析
汇集核酸分析领域的顶级品牌，包括定量PCR、数字PCR技术、克隆、反转录与基因调控产品，RNA研究领域的翘楚产品。
蛋白质功能分析
包括创新化学试剂、高效分离产品、领先色谱质谱技术，以及蛋白质组学数据处理软件，能更有信心地面对蛋白质研究的挑战。
细胞培养与分析
Ion Torrent测序仪在超过90份同行出版物被引用，是出版物中引用频率较高的台式测序。
医疗健康
研制各种专业诊断的仪器和试剂，实验室常规设备和耗材，以及各种医学研究用的先进平台与产品、
病理诊断
从常规病理检测，到数字病理分析，再到分子病理诊断。针对病理 实验室特殊环境需求及高负荷工作需求，一流的仪器设备耗材，流程设计及工作优化方案，帮助病理工作者更安全，高效地完成诊断，同 时提高诊断准确率。
感染诊断
涵盖各类型培养基、血培养系统、微生物鉴定、 药敏检测，以及降钙素原检测、PCR、qPCR、测序等系列产品，可帮助临床医生作出早期感染诊断、控制感染、指导抗生素合理使用、监测治疗和疾病 预后。
过敏诊断
过敏原自身免疫疾病诊断设备与试剂采用抗原包被技术、高特异性和高稳定性，被誉为过敏原检测的金标准。
移植诊断
通过移植前对受体/供体的组织相容性抗原（HLA）的配型、相关特异性抗体以及非HLA因素的一系列检测，为移植前 准确筛选供体、移植后有效预防抗体介导性排斥反应提供科学准确的依据，提高移植手术成功率。
转化医学研究
在转化医学领域，产品和技术广泛应用于从细胞到蛋白组学，再到基因组学的研究，加速生物标记物用于伴随诊断及个体化医疗 医药产业是一个国家国民经济的重要组成部分，与国民生命健康和生活质量等利益密切相关。
赛默飞专注制药生产的每个环节。
> 研究阶段
- 基础研究 靶标发现 药物设计
- 基因功能分析
- 蛋白质分析
- 细胞培养分析
- 化合物分析和筛选
> 技术市场化阶段
- 预临床研究 一期临床 两期临床 三期临床
- 临床前评价
- 临床试验
> 生产上市阶段
- 药物生产 药物上市 四期临床
- 大规模生产
- 过程控制
- 质检和质控
- 大规模临床试验
中医药现代化整体解决方案
中医药是中华文明长期发展中积累下的宝贵财富，其有效的实践和丰富的知识中蕴含了深厚的科学内涵。
生物仿制药解决方案
在快速发展的生物仿制药领域，用简单、可靠的解决方案，提供安全的产品，最大限度缩短上市所需时间。 除医疗、生物制药、食品安全和环境还有法医行业外，赛默飞的产品与技术也在众多工业行业得到广泛应用，服务生活及工业制造的方方面面，满足各行各业的需求。
石油化工
从石化上游的原油开采、输送、炼油和乙烯生产，到下游合成材料、精细化工、橡胶加工等完整的产业体系，解决石油化工行业各业务环节中的实际问题。
> 石油炼制 > 天然气加工
> 石油产品分析 > 精细化工
> 化石生产 > 生物柴油
> 化工产品
钢铁
从材料处理到金属加工再到最终产品监控，在线及实验室的严苛金属分析，改善工作流程，提供优异的元素分析产品和服务。
> 原料处理 > 冷轧
> 炼钢 >钢加工
> 热轧 > 中心监测站
水泥
独一无二的创新技术为整个水泥加工流程提供了综合解决方案，兼顾原材料、能耗、替代性燃料使用和添加剂优化。其中具 有可靠、耐用、紧密和高性价比的分析技术，可为从小型水泥生产厂，到大规模生产研磨站的众多客户提供服务。综合的化学和包括游离氧化钙在内的物想分析， 在线确保更优的简仓控制。
能源
科学家和工程师对前沿能源相关重要材料的化学、结构和性能间相互作用实现控制。
> 燃料电池
> 发电厂
> 太阳能
机电
伴随微电子和半导体器件制作尺寸的越来越小，使用元素和化合物种类的不断增加，由此产生了一系列复杂的材料问题，为材料工程师带来了更严峻的挑战。对于这一蓬勃发展的行业，市场上并不存在有一项能够完全满足所有相关材料分析的技术。
材料
材料科学家和工程师研究和开发先进的涂料和涂层、陶瓷和玻璃、纸张和油墨等众多材料，实现对包括塑模、文物、印刷、光学部件、汽车组件等在内应用的提升。
食品检测在数字PCR技术中的问题及发展趋势123
fsj19872021-08-01
请问大家谁有数字PCR相关的资料，可不可提供一下啊，谢谢
如何利用数字PCR评估基因编辑效率_问答详情_数字PCR系统_分子...123
唯美小倩02762017-10-03
在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
数字pcr为什么对抑制剂不敏感123
wangu742017-10-03
数字pcr为什么对抑制剂不敏感
在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
...与大家分享 酶切连接 核酸基因技术讨论版123
yyangyingy2021-07-24
参考体系
酶切体系（参考）：
质粒17ul
buffer2ul
酶1ul
－－－－－－－－－－37度，过夜。
酶切位点
在质粒上，所选的两个酶的酶切位点不可以靠的太近，如6bp
建议载体质粒不要用双酶切,用两次单酶切之后切胶回收.另外建议加多以下两个个步骤:
1.PCR产物的酶切片断做TA克隆,之后再酶切回收,与载体相连.
2.目的片段与载体连接之后建议先转化DH5α这些容易转化的菌株.然后筛选到的阳性克隆测序之后,提质粒,用质粒转化BL21,转化率很高.质粒不一定要新鲜提取,我的质粒放在-20度冻了大半年,作为载体完全没问题,只要确定不降解.
酶切的量、小提的质粒浓度和纯度
浓度:
根据我的实验，OD值0.5左右吧，不一定很准确。260：280通常是1.8左右。3ml菌过夜，进行小提,并没有对OD限定.小提的效果好不好主要决定于你的溶液I，II,III的质量以及你的操作手法，
特别是加溶液II时最为关键。现在有很多试剂盒既便宜效果又好，条件允许的话可以考虑购买。
琼脂糖电泳目测,不一定测OD,连接比例更重要.
质粒表达载体不用测序的，通常都是跑电泳看一下质量，然后再根据图谱选择适当的酶，看能不能够切开，如果能够切开，基本上就可以采用了。
纯度:
酶切对质粒的纯度要求高，如果蛋白和RNA去的不干净会影响酶切；
我们用于酶切的质粒的ratio值一般在1.8左右。
酶量；
在量上最好不超过酶的酶切能力，一般酶都为10U/ul,就是说酶切体系里加
1ul的酶可以在合适的温度下，1小时内消化10ugDNA，但在实际操作当中
一般酶都是过量的，而且延长了酶的作用时间，比如作用6小时。
因为酶切产物用于连接，所以我们酶切时质粒的用量尽量多，用20ul的体系
时可以如下加样，我们也有用50ul的体系切过。
回收目的片段与阳标一起进行酶切:
PCR后，电泳回收目的片断（比如玻璃奶或者一次性回收柱回收），再进行酶切。除非产物非常特异，直接酶切PCR产物效果有时不是很好，还有一般PCR体系里过量得dNTPs会影响酶切效果。酶切后，可以用标准得乙醇沉淀法沉淀酶切产物，获得高纯度得酶切产物，也即是你的黏性目断片断供后边得试验。而DNA的纯度对酶切效果是有很大的影响的。而酶切时应加个阳标(如含相应酶切位点的质粒载体)来确定酶和酶切体系是不是work的。如果这两步没问题，你的酶切肯定能顺利的。如果有阳标一起来切，容易找出问题的所在。
酶切不下
酶切这一步，本来问题不大，你严格按说明书上的要求进行就行了，包括酶量，酶切体系以及DNA的量也要按要求加入。而DNA的纯度和浓度是有必要测定的，最好OD260/280要接近2.0。DNA的量过大或是纯度太低都会影响酶切效果。万一如果无法充分酶切，但有所需要的片段，就可以根据Markers的位置回收所需片段。
因为基因组大部分是甲基化的，酶切不下来的原因一可能是内切酶活性低，或者是基因组杂质含量较高，或者盐离子浓度太高(不同的酶有不同的盐浓度).还有就是基因组酶切酶的量要求比较多，大概1ugDNA/10u酶，如果不行还可以加大量，酶量不能超过酶切体系的1/10，浓度过高里面的甘油会影响酶的活性。接头5-端是去磷酸化的，这样就可以避免接头自连，pcr结果就会有东西出来。
连接酶反应温度
空掉开低一点,一般16度连接2-3小时;
放进4度冰箱中，连接过夜，16小时
多片段连接:
将三个片断放在一起连的,效果的确不好.还是应该一个一个地连接.
连接比例
我用T载体连接PCR产物，请问片段和载体的摩尔比怎么选择连接效率好？根据什么因素来调节？有没有经验值？
一般片段：载体＝3～8：1。根据片段的大小、连接时间、温度、感受态细胞等因素来调节。经验值就是3～8：1。4度连接过夜，用新鲜制备的感受态细胞，一般可以得到很好的克隆效率。
补充一句：如果PCR产物片段比较大(>1kb)的话一般用3：1的比例，如果比较小就几百bp的话用>3：1的比例连接效率能高一些。3-10：1一般没问题.
建议仔细参看Teasy的说明书
接头处理
接头的处理和连接这一步其实是挺头疼的。建议先制备和接头两粘端连接的线性质粒分子。因为这对于你接头是否完成了磷酸化和退火处理提供了一个评价体系。你接头处理完，并通过评价，你就可以放心用了。退火时的处理一般要使用专门的annealingbuffer，否则效果不好。而对于粘端连接来说，应该问题不大，唯一担心的是能进行连接的片段太少了，影响下面的PCR扩增，所以酶切这一步是很关键的。
最后一步是高保真PCR，首先建议用Taq酶进行扩增，然后再用Pfu酶扩增，因为后者效率比较低。其实你用Taq酶如果扩出来，测序经blast/n后，如果有突变，你也完全可以根据正确的序列重新设计引物将之调出来。
注意感受态
如果还是不行，建议检查一下感受态菌的质量。
我的感觉是感受态很重要，你可以转化连接产物的同时用纯质粒转化进行感受态活性的验证，后者取1ul转化，10ul涂板，好的感受态一般要长50个菌落以上。其次是连接体系，目的片断与载体的摩尔比为3-10：1，除此，连接酶也很重要，最好不要使用储存太久的酶，建议你下次做的时候用别人的酶试一下。
转化要用空质粒作对照，保证感受态没问题，细菌一般长12到16小时就形成可见的菌落，转化后的菌落一般比为转化的菌落小一些。
酶切体系（参考）：
质粒17ul
buffer2ul
酶1ul
－－－－－－－－－－37度，过夜。
酶切位点
在质粒上，所选的两个酶的酶切位点不可以靠的太近，如6bp
建议载体质粒不要用双酶切,用两次单酶切之后切胶回收.另外建议加多以下两个个步骤:
1.PCR产物的酶切片断做TA克隆,之后再酶切回收,与载体相连.
2.目的片段与载体连接之后建议先转化DH5α这些容易转化的菌株.然后筛选到的阳性克隆测序之后,提质粒,用质粒转化BL21,转化率很高.质粒不一定要新鲜提取,我的质粒放在-20度冻了大半年,作为载体完全没问题,只要确定不降解.
酶切的量、小提的质粒浓度和纯度
浓度:
根据我的实验，OD值0.5左右吧，不一定很准确。260：280通常是1.8左右。3ml菌过夜，进行小提,并没有对OD限定.小提的效果好不好主要决定于你的溶液I，II,III的质量以及你的操作手法，
特别是加溶液II时最为关键。现在有很多试剂盒既便宜效果又好，条件允许的话可以考虑购买。
琼脂糖电泳目测,不一定测OD,连接比例更重要.
质粒表达载体不用测序的，通常都是跑电泳看一下质量，然后再根据图谱选择适当的酶，看能不能够切开，如果能够切开，基本上就可以采用了。
纯度:
酶切对质粒的纯度要求高，如果蛋白和RNA去的不干净会影响酶切；
我们用于酶切的质粒的ratio值一般在1.8左右。
酶量；
在量上最好不超过酶的酶切能力，一般酶都为10U/ul,就是说酶切体系里加
1ul的酶可以在合适的温度下，1小时内消化10ugDNA，但在实际操作当中
一般酶都是过量的，而且延长了酶的作用时间，比如作用6小时。
因为酶切产物用于连接，所以我们酶切时质粒的用量尽量多，用20ul的体系
时可以如下加样，我们也有用50ul的体系切过。
回收目的片段与阳标一起进行酶切:
PCR后，电泳回收目的片断（比如玻璃奶或者一次性回收柱回收），再进行酶切。除非产物非常特异，直接酶切PCR产物效果有时不是很好，还有一般PCR体系里过量得dNTPs会影响酶切效果。酶切后，可以用标准得乙醇沉淀法沉淀酶切产物，获得高纯度得酶切产物，也即是你的黏性目断片断供后边得试验。而DNA的纯度对酶切效果是有很大的影响的。而酶切时应加个阳标(如含相应酶切位点的质粒载体)来确定酶和酶切体系是不是work的。如果这两步没问题，你的酶切肯定能顺利的。如果有阳标一起来切，容易找出问题的所在。
酶切不下
酶切这一步，本来问题不大，你严格按说明书上的要求进行就行了，包括酶量，酶切体系以及DNA的量也要按要求加入。而DNA的纯度和浓度是有必要测定的，最好OD260/280要接近2.0。DNA的量过大或是纯度太低都会影响酶切效果。万一如果无法充分酶切，但有所需要的片段，就可以根据Markers的位置回收所需片段。
因为基因组大部分是甲基化的，酶切不下来的原因一可能是内切酶活性低，或者是基因组杂质含量较高，或者盐离子浓度太高(不同的酶有不同的盐浓度).还有就是基因组酶切酶的量要求比较多，大概1ugDNA/10u酶，如果不行还可以加大量，酶量不能超过酶切体系的1/10，浓度过高里面的甘油会影响酶的活性。接头5-端是去磷酸化的，这样就可以避免接头自连，pcr结果就会有东西出来。
连接酶反应温度
空掉开低一点,一般16度连接2-3小时;
放进4度冰箱中，连接过夜，16小时
多片段连接:
将三个片断放在一起连的,效果的确不好.还是应该一个一个地连接.
连接比例
我用T载体连接PCR产物，请问片段和载体的摩尔比怎么选择连接效率好？根据什么因素来调节？有没有经验值？
一般片段：载体＝3～8：1。根据片段的大小、连接时间、温度、感受态细胞等因素来调节。经验值就是3～8：1。4度连接过夜，用新鲜制备的感受态细胞，一般可以得到很好的克隆效率。
补充一句：如果PCR产物片段比较大(>1kb)的话一般用3：1的比例，如果比较小就几百bp的话用>3：1的比例连接效率能高一些。3-10：1一般没问题.
建议仔细参看Teasy的说明书
接头处理
接头的处理和连接这一步其实是挺头疼的。建议先制备和接头两粘端连接的线性质粒分子。因为这对于你接头是否完成了磷酸化和退火处理提供了一个评价体系。你接头处理完，并通过评价，你就可以放心用了。退火时的处理一般要使用专门的annealingbuffer，否则效果不好。而对于粘端连接来说，应该问题不大，唯一担心的是能进行连接的片段太少了，影响下面的PCR扩增，所以酶切这一步是很关键的。
最后一步是高保真PCR，首先建议用Taq酶进行扩增，然后再用Pfu酶扩增，因为后者效率比较低。其实你用Taq酶如果扩出来，测序经blast/n后，如果有突变，你也完全可以根据正确的序列重新设计引物将之调出来。
注意感受态
如果还是不行，建议检查一下感受态菌的质量。
我的感觉是感受态很重要，你可以转化连接产物的同时用纯质粒转化进行感受态活性的验证，后者取1ul转化，10ul涂板，好的感受态一般要长50个菌落以上。其次是连接体系，目的片断与载体的摩尔比为3-10：1，除此，连接酶也很重要，最好不要使用储存太久的酶，建议你下次做的时候用别人的酶试一下。
转化要用空质粒作对照，保证感受态没问题，细菌一般长12到16小时就形成可见的菌落，转化后的菌落一般比为转化的菌落小一些。
起始进样量20ngdna的情况下,数字pcr检测ctdna单个位点的检测灵敏...123
ayの0623e萨2017-10-03
数字PCR可以绝对定量，理论上可以检测单个拷贝的突变，但是实际上如果突变分子比例太低，你可能取不到。20ng人基因组大致拷贝数是5.8E6，目前看文献报道，可以检出万分之一的突变比例，至于十万分之一，估计有点难度
ABI7500与伯乐CFX96的对比123
刘鹏KRrj52017-10-03
伯乐的不错，实验目前用的就是这块，产品质量可以
系统适应性超标算不算OOS质量控制蒲公英 制药技术的传播者...123
将这迪斯科燃尽2017-10-03
色谱分析做系统适用性试验主要是为了确定分析使用的色谱系统是有效的、适用的。系统适用性通常用四个参数来确定系统的适用性：分离度、柱效、重复性和拖尾因子。 其中分离度和柱效是二个最重要、也更具有实用意义的参数。分离度是判断两物质在一个方法中分离的程度，虽然与柱效相关，但在衡量系统适用性时，首先强调的应该是分离度，只有当色谱图中仅有一个色谱峰或测定微量成分时，规定柱效才有其特殊重要性。重复性和拖尾因子，分别对重现性和色谱峰的峰形做出了要求。重现性保证了方法的可重复性，对柱效能提出了要求，柱子老化、塌陷，拖尾因子则难以达到要求数字PCR 和色谱分析系统及中高压层析系统提醒你：色谱分析以分离出来时间位置来判断是何种物质，以峰的积分面积来分析其含量。色谱分析法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 ---即是一种分析方法色谱分析系统，是基于色谱分析法的一种分析仪器，如：液相色谱、气相色谱、离子色谱、凝胶色谱等。
lyncee数字全息显微镜—动态3D细胞显微镜性能参数,报价/价格,图片...123
yaoyaotutu01022021-08-02
在科学研究中细胞培养等技术已是相当成熟，可对细胞的状态完全无保留的呈现给研究者是一直以来的难点。不过，现在一种新的成像技术的出现，给研究者们带来了曙光，那就是全息成像技术，前期这种技术大多应用在摄影方面，目前瑞典Phiab公司采用这种全息技术新开发出HoloMonitorTMM4激光全息成像及分析系统，成功将这种高新技术应用到生命科学领域。
那这位新晋之主能为我们带来哪些惊喜呢？
1，长期、非侵入性细胞检测
M4是采用物理干涉成像技术，实现了对细胞非侵入、无标记性的观察，最大程度地体现细胞的真实状态，并可以排除实验处理的假阳性。在系统的分析软件中，可以对观察细胞实现3D重建，并对图片添加伪彩，增加细胞与背景的对比度，让你实验图片焕然多彩，不再只是黑或白。
2，细胞追踪
M4可以对细胞进行长时间延时拍摄，实现细胞边培养边拍摄，自动记录细胞的运动性。目前在许多科学研究中，细胞运动性，细胞迁移率是判断细胞敏感性的重要指标，在M4系统中不仅可以获得细胞长时间的形态上的直观图片，同时，分析软件中的Trackcells可以给予单细胞，多细胞的运动轨迹，迁移方向，迁移距离等多种数据，避免了你在实验之后的数据统计和数据分析过程，真可谓是省时省力。
3，数量统计
M4分析系统中采用细胞分割识别的方法，可以进行多种统计方法的细胞识别。（也可以进行手动调节哦！）根据采集图像区域与培养皿体积的相关性，对整个培养皿的细胞数量进行统计。除此之外，系统会自动生成任一细胞参数的数量统计柱形图，比如细胞体积的柱状图即不同细胞体积下的细胞数量分布。
4，形态学分析
形态学分析是M4系统中相当强大的功能。无论是实时成像还是延时成像，对图片中每个细胞的各个形态参数都有记录，如：体积、面积、最大厚度、平均厚度、周长、不规则度等。软件中Analyzecell可以对细胞参数之间的相互关系及细胞的分布情况直接输出散点图，研究者同时可以对散点图进行标记，记录实验所需的实验分析区域。并对每个区域又仅进行细胞形态学及统计学分析。该功能对细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期等领域有很好的应用。
5，数据输出
M4不仅可以输出图片也可以对延时拍摄图片制作成视频进行输出，更加直观的对细胞形态及细胞活动进行观察，为你的科研汇报更添佐证。
HoloMonitorTMM4激光全息成像及分析系统利用全息技术将细胞的每个点都几录下来，每个全息图中包含了图像中的全部数据，对于科研要求越来越严格的研究人员来讲，这无疑是细胞生物学的一个新的里程碑。
HoloMonitorTMM4激光全息成像及分析系统已经应用到了许多生命科学研究方面，如肿瘤侵袭与转移、细胞耐药性、纳米微阵列、混合纳米聚合物胶束、细胞周期、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡、神经细胞观察等。目前研究者仍在挖掘M4的更多技术，更多应用、更多创新。
3D数字PCR为精准医疗带来哪些优势 – 手机爱问123
zxn雫1522021-07-31
PCR（Polymerase Chain Reaction）技术，即聚合酶连反应，是一种扩大和复制目的片段DNA的技术，其发现对于生命科学的发展具有重要的意义。而3D数字PCR到底是什么鬼？它其实是最新出现的一款PCR仪，其具有对目的DNA分子做出绝对定量的优点，进而提供无与伦比的准确性、灵敏度。原理3D数字PCR是基于纳米流体芯片进行检测，通过一次检测，将样品分到数千个单独的PCR，检测结果部分为阳性，部分为阴性，之后进行绝对分子数统计，不需做标曲。目前可检测到2万个0.8nL的液滴（样品），能够精确的进行靶位点进行绝对定量研究。应用前景基因表达的绝对定量应用该技术，实现对DNA进行精确绝对定量，精确度可通过复制次数实现。通过准确性的进行定量检测基因，有助于临床上在治疗癌症、病毒感染等疾病作参考。同时，其具有高通量，检测速度快，成本相对低等优点，为后期精准治疗奠定基础。罕见基因的检测对于临床上的罕见的基因进行检测，不依靠参考标准，节约样本与试剂，并具有一定的精确度。3D数字PCR为液体活检提供技术支持液体活检是一种非侵入性的检测肿瘤基因及临床治疗效果的一种方法，目前可能正在开展有关3D数字PCR在在液体活检中的疗效，为后期临床提供更多可靠的指导作用。最新报道称“无创伤性肺癌检测技术即将登陆中国”。随着基因检测技术，如类似3D数字PCR技术的发展，推动我们将进入了“DNA的应用商城”这样的新时代，如23 and me、华大基因等专业的检测服务机构，提供更加专业的基因检测结果，经基因报告解读师或遗传咨询师进行通俗的解读，让我们每一个人都能够了解自己的基因，拥有自己的“生命之书”，让我们更加健康的生活。精准医疗其实本质是应用生物学信息与大数据科学的交叉发展的新型医学概念与医疗模式。对于精准医疗，重点在于“精准”，不仅仅是简单的基因测序如此简单，更需要精准的诊断与精准的治疗。
什么是色谱系统适应性123
lai11202017-10-03
色谱分析做系统适用性试验主要是为了确定分析使用的色谱系统是有效的、适用的。系统适用性通常用四个参数来确定系统的适用性：分离度、柱效、重复性和拖尾因子。
其中分离度和柱效是二个最重要、也更具有实用意义的参数。分离度是判断两物质在一个方法中分离的程度，虽然与柱效相关，但在衡量系统适用性时，首先强调的应该是分离度，只有当色谱图中仅有一个色谱峰或测定微量成分时，规定柱效才有其特殊重要性。重复性和拖尾因子，分别对重现性和色谱峰的峰形做出了要求。重现性保证了方法的可重复性，对柱效能提出了要求，柱子老化、塌陷，拖尾因子则难以达到要求
数字PCR 和色谱分析系统及中高压层析系统提醒你：
色谱分析以分离出来时间位置来判断是何种物质，以峰的积分面积来分析其含量。色谱分析法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 ---即是一种分析方法
色谱分析系统，是基于色谱分析法的一种分析仪器，如：液相色谱、气相色谱、离子色谱、凝胶色谱等。
其中分离度和柱效是二个最重要、也更具有实用意义的参数。分离度是判断两物质在一个方法中分离的程度，虽然与柱效相关，但在衡量系统适用性时，首先强调的应该是分离度，只有当色谱图中仅有一个色谱峰或测定微量成分时，规定柱效才有其特殊重要性。重复性和拖尾因子，分别对重现性和色谱峰的峰形做出了要求。重现性保证了方法的可重复性，对柱效能提出了要求，柱子老化、塌陷，拖尾因子则难以达到要求
数字PCR 和色谱分析系统及中高压层析系统提醒你：
色谱分析以分离出来时间位置来判断是何种物质，以峰的积分面积来分析其含量。色谱分析法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 ---即是一种分析方法
色谱分析系统，是基于色谱分析法的一种分析仪器，如：液相色谱、气相色谱、离子色谱、凝胶色谱等。
关于数字PCR,这些干货请收好[心得点评]123
周艳ing2021-07-28
请问论坛有做数字PCR的吗？为什么用外周血检测突变时，有扩增的微滴才几百个啊？大家一般有效微滴是多少个呢？
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