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提取总RNA的方法现在主要的就是用商用试剂盒，比如凯杰，欧米伽等厂家，还有就是用传统的酚氯仿，trizol提取，一般trizol提取的质量相对比较好，但是操作起来比较麻烦，全程冰上操作，包括离心，这要看你们实验室有没有相应的试剂或仪器了，如果用商用试剂盒的话，通常是针对比较特殊的要求的样本的，比如石蜡样本，植物样本等，你需要根据你的样本类型选择不同的试剂，你可以咨询一下凯杰生物的技术支持

各位同仁好友，师兄师姐，能否对你用过的人组织基因组DNA提取试剂盒以及小RNA提取试剂盒发表一下高见，效果如何，给菜鸟推荐个好用的试剂盒,国外国内的都行，跪谢！

你看看说明书上，上面应该有详细的说明，吉恩特的试剂盒说明很详细，会一步步教你怎么做的，方便实用，你找小高吧

包括：细菌总RNA分离试剂盒 ，细菌RNA快速提取试剂盒，细菌基因组RNA提取试剂盒，细胞细菌总rna提取试剂盒.....等等，上海远慕生物细菌总rna试剂盒。

TRNA保存于－20度（未加DEPC－H2o），安全吗、？可以保存多长时间？

请问有关线粒体基因组研究中,发表文章的tRNA二级结构图是用什么软件做的.例如:

非常欢迎您经常来到核酸版！请您下次发帖时规范发帖！老战友了就不要被标记为“不规范发帖”，规范了应助的人就会很多的。谢谢了。

实验非常不顺，想构建CDNA文库，但是从mRNA开始屡次失败，考虑主要是纯化过程中损失过多。想从总RNA入手，但是不知道实验步骤。不知那位大侠能提供总RNA建库的实验步骤。另外我现在手头有OligoDT,RT酶，苦于没有第二连合成试剂盒，不知道能否用普通PCR试剂盒Teq酶替代第二链合成过程中的DNA聚合酶I。好像有种方法合成第二链时，不需要另外的引物，利用降解的RNA作引物即可，我想直接设定PCR两个循环，合成第二链，不知方法可行否？愁啊，等着毕业，时间紧急，恳请帮忙。谢谢。

对于多个分子生物学和基因组学应用，从克隆和PCR到基因组测序和芯片分析，DNA纯化都是必经之路。然而，选择最佳的纯化试剂盒却并非易事。例如，在您纯化基因组DNA时，您需要一个试剂盒，能温和地处理核酸，同时又不分离质粒DNA。而且，新一代测序技术对样品的要求颇高，我们也需要一些专门的产品来纯化DNA。在此，我们介绍一些新选择。盐沉淀方法Epicentre（Illumina旗下公司）的MasterPure™CompleteDNAPurificationKit采用一种专利的盐沉淀方法。这一系列试剂盒覆盖各种样品类型，包括血液、固定组织、植物、酵母、昆虫等，在短短30分钟内可带来高产量的核酸，而损失极少。据Epicentre的资深产品经理CristineKinross介绍，有了这些试剂盒，用户在测序或其他分子生物学应用的样品制备之前无需再进行额外的纯化。它们可去除蛋白及其他细胞碎片，而不引入那些必须去除的毒性化合物，从而避免了多次洗涤，并改善核酸产量。Kinross谈道：“利用MasterPure回收核酸的出色纯度让样品可直接进入测序文库的制备。”当然，对于其他应用，包括芯片、qPCR和克隆，它也是适合的。此外，这个试剂盒也能用于RNA的纯化。在获得总的核酸后，经过DNase处理，就能得到总RNA。多种试剂盒Promega提供广泛的核酸纯化试剂盒，采用几种不同的策略。例如，Wizard®GenomicDNAPurificationKit是基于经典的沉淀法，可从全血、组织培养细胞、动物及植物组织、酵母和细菌中提取基因组DNA，灵活高效；而ReliaPrep™系列试剂盒采用柱提法，简单快速。此外，Promega还提供基于磁珠纯化的试剂盒。Promega公司基因组学的全球产品经理EricVincent表示：“尽管溶液的确切组分会有不同，但裂解、结合、洗涤和洗脱的基本过程适用于不同的结合方法（如硅胶或纤维素），不同的纯化形式（纯化柱或磁珠），以及手动和自动纯化操作。”对于一些非常重要的样品类型（如FFPE样品），还需要一些专门的操作或处理。“我们开发了独特的结合/洗涤缓冲液，它们能有效去除抑制下游反应的物质，而优化的系统让研究人员能够捕获少量的核酸并以小体积（不到30μl）洗脱，我们还开发出自动化的解决方案，适合各种试剂和通量，”Vincent说。这些试剂盒提供了完整的解决方案，能够以极小的体积洗脱核酸，同时又避免抑制剂残留在洗脱液中。经过这些试剂盒纯化后，核酸可用于PCR、Sanger测序、新一代测序、芯片等下游分析。经典的硅胶膜QIAGEN的核酸纯化试剂盒依赖DNA与纯化柱上的硅胶膜结合。抑制剂被洗掉，而完整的DNA随后从柱上洗脱，产量高，纯度高，带来更高质量的新一代测序文库。MarcoPolidori-QIAGEN样本制备的全球产品经理-认为，在处理极少量的样品或困难的样品如FFPE时，高产量就变得格外关键。FFPE样品所产生的DNA可能会出现“随机胞嘧啶脱氨”事件，这会导致人为的单核苷酸多态性（SNP）。不过，QIAGEN的GeneReadDNAFFPEKit能够去除脱氨的胞嘧啶，避免在NGS实验中产生错误的结果。此产品尚未正式推出，若有兴趣试用，可填写资料。“我们的大部分试剂盒都已在NGS应用中得以证明，从循环肿瘤DNA的全基因组测序到微生物组，”Polidori谈道。这些试剂盒能让用户从各种样品中获得高质量的DNA，避免FFPE样品出现C-T的假象，并在很短的时间内带来高分子量的DNA。MagAttractHMWDNAkit就能够利用简单的磁珠操作，实现100-200kbDNA的纯化。整个纯化过程温和去除污染物及抑制剂，并具有极高的产量和纯度。离液盐Sigma-Aldrich公司提供GenElute™MammalianGenomicDNAPurificationKit，这是基于离液盐试剂的产品。在含有离液盐的溶液中，样品被裂解，以确保大分子的彻底变性。添加乙醇，让DNA与硅胶膜结合。污染物被洗掉，而DNA被洗脱在Tris缓冲液中。通过专为分离基因组DNA而选择的硅胶膜，此试剂盒让用户能够从各种样品中纯化高质量的DNA，包括培养的细胞、组织（包括鼠尾）、新鲜的全血或白细胞。据介绍，此试剂盒综合了硅胶膜结合和微量离心形式的好处，避免了昂贵的树脂、乙醇沉淀以及有害的有机物，如苯酚、氯仿。更重要的是，它纯化所得的DNA可应用于限制性内切酶消化、PCR、Southernblot、测序等。（作者：JamesNetterwald/生物通编译）

beta-巯基乙醇是还原剂，可以还原蛋白高级结构中的二硫键，解开蛋白的高级结构，有一些裂解液中加入beta-巯基乙醇以后，裂解液的保质期会变短。

不管是扫描的图片或文本格式，只要简明且扼要

RNase指需要加在solution 1里面,就是悬浮菌液的那种液体.裂解液2和酸性溶液3不用加. 不同的盒子加的量多少是不一样的,其实多加点少加点关系也不大.

-磷酸二酯键的裂开，RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶； 4； 3，由于DNA是双链.RNase A 对核糖核酸有水解作用。可以用来去除DNA制品中的污染RNA，形成具有 2'，因为RNA酶无处不在，DNA的稳定性要远远大于RNA;，DNA； 2;-环磷酸衍生物寡聚核苷酸，在提取DNA的过程中大部分的RNA会降解,3'要去除DNA中的RNA其实不是很难： 1，但对脱氧核糖核酸则不起作用，所以RNA比较容易降解、RNA按稳定性来说;-与5'。核糖核酸酶A 在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'，所以要得到高纯度无RNA的DNA可以用RNase A（RNA水解酶A）