本裂植酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备裂殖酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品,它具有以下列特点
1.一次制备,-80度保存,多次使用,免去每次转化都要制备裂殖酵母感应态细胞。
2.操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需30分钟。
3.主要用于裂殖酵母S.pombe,其他多种实验用酵母菌株最好选用酵母化学感受态细胞制备试剂(CAT#:81109)。
4.受体酵母可以不含质粒,也可用于携带有多种选择性的酵母(如双杂交体系中的酵母)
5.最高转换率可达到0.2-1X100000个转化子/Ug质粒DNA
6.得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化,例如YIP,YRP,YCP,YEP和YAC等。
7.可以用酵母双杂交,定点突变(SITE—DirectMutagenesis),基因破坏(Gene Disruption),等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8.本产品可以制备20只裂殖酵母感受态细胞(需要100ml裂殖酵母培养液),其中A型只用于制备感受态细胞,B型还带高效转化液。
使用及效果
将一个酵母菌落接种到SLD培养基中,30度摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0,沐浴15分钟后离心弃上清,用自备无菌水洗涤三次,然后用相当于菌液最初体积百分之一的溶液A重悬,按每管50UL分装,放-80度保存。