核酸提取(TheExtractionofNucleicAcid)资讯
| 货号： | #E7645L、#E7645S |
| 供应商： | 天津品心诺生物科技有限公司 |
| 数量： | 96次反应、24次反应 |
| 英文名： | NEBNext®Ultra™IIDNA文库制备试剂盒 |
| 保存条件： | -20°C |
NEBNextUltraIIDNA文库制备试剂盒能够用更低起始量的DNA构建高质量的文库。文库制备每一个步骤中的试剂都经过优化，能够从500pg至1μg的起始DNA高效构建高质量的文库。新一代的NEBNext试剂采用了快速、流程化、自动化的工作流程，在降低PCR循环数的同时提高了GC覆盖度。本试剂盒与PCR-free的工作流程兼容，且对于难以建库的样本，如FFPE样本，也有很好的效果。
优势：
更高的文库产量，满足您更多需求；
即使在DNA样本量非常低的情况下（低至500pg），依旧能够产生高质量的文库；
适用于所有DNA样本，包括富含GC的区域及FFPE-DNA样本；
提高靶向富集等应用的产量及质量
流程化的操作过程，操作时间大大减少，与自动化建库设备兼容；试剂盒和模块提供了极大的选择灵活性。
了解更多NEBNextUltraII解决低起始量及难以建库样本问题的信息，请下载技术手册。
图1：NEBNext® Ultra™ IIDNA 文库制备试剂盒从不同起始量 DNA 均能得到最高的文库产量及接头连接分子转化效率。
A：以人NA19240基因组DNA为样本制备文库，起始量和PCR循环数如图所示。文库构建按照各生产商推荐方法进行，省略片段筛选的步骤。
B： 以人NA19240基因组DNA为样本制备文库，起始量和制备试剂盒如图所示，文库的构建按照生产商推荐的方法进行，不进行扩增步骤。接头连接的分子用qPCR进行定量，定量的结果以UltraII的转化率为基准进行标准化处理。对于不同起始量DNA，UltraII试剂盒均能产生最高的接头连接分子转化效率。
查看更多有关文库产量的数据
图2.：对于不同GC含量及起始量的微生物基因组DNA，NEBNextUltraII能获得均一的GC覆盖度。
以500pg，1ng及100ng的基因组DNA为起始样本，使用UltraIIDNA文库制备试剂盒进行建库后
使用IlluminaMiSeq® 测序。使用Bowtie2.2.4将Reads进行比对并使用PicardsCollectGCBias
Metrics(v1.117)计算GC覆盖度。预期的标准化覆盖度1.0以灰色的水平线表示，不同GC%中100bp区域的数量以灰色条形图显示。不同颜色的线形图表示标准化后的文库覆盖度。
查看更多文库质量的数据
图3：NEBNextUltraII在PCR-free实验流程中可以得到非常高的产量。
以100ng人NA19240基因组DNA为起始样本构建文库，文库制备试剂盒如图所示，文库的构建按照生产商推荐的方法进行，不进行扩增步骤。文库产量用NEBNext文库定量试剂盒进行qPCR定量。使用
NEBNextUltraII试剂盒得到的文库产量最高。
表1：使用NEBNextUltraII能够在PCR-free实验中获得最高的测序质量。
.png)
以100ng人NA19240基因组DNA为起始样本构建文库，使用的文库制备试剂盒如图所示，文库的构建按照生产商推荐的方法进行，不进行扩增步骤。文库使用IlluminaNextSeq500进行测序。测序得到的
Reads使用Bowtie2.2.4比对到GRCh37参考基因组。数据显示NEBNextUltraIIDNA文库制备试剂盒
在PCR-free实验流程中得到高质量的测序读数，即使在起始量非常低的情况下。
%Mapped:比对到人GRCh37参考基因组的百分比。
%Duplication:比对序列中重复的百分比。 .png)
%Chimeras:序列中超过最大插入片段或两端比对到不同染色体上的百分比。
表2：NEBNextUltraII能够从FFPEDNA样本中构建高质量文库。
以17-30ng的FFPE组织样本中提取的DNA为起始样本制备文库，组织来源如上表所示，扩增循环数为10个循环，用IlluminaMiSeq进行测序。
测序得到的Reads使用Bowtie2.2.4比对到GRCh37参考基因组
%Mapped:比对到人GRCh37参考基因组的百分比。
% MappedinPairs: matepair也能比对到参考基因组的百分比。
%Duplication:比对序列中重复的百分比。
%Duplication:比对序列中重复的百分比。
%Chimeras:序列中超过最大插入片段或两端比对到不同染色体上的百分比。
数据显示使用NEBNextDNA文库制备试剂盒能够获得高质量的测序结果，即使是起始量非常低的FFPE样本。
查看更多FFPEDNA样本的数据
图4：NEBNextUltraII可为靶向富集提供高产量文库。
当使用Nimblegen进行靶向富集时，首先以100ng人HG02922基因组DNA为起始样本，分别使用
NEBNextUltraII及NEBNext接头引物，或Kapa文库制备试剂盒SeqCap® 接头(Roche)。随后的靶向富集使用NimbleGenSeqCapHumanExomev3试剂盒完成。
当使用Sureselect进行靶向富集，首先以200ng人HG02922基因组DNA为起始样本，分别使用
NEBNextUltraII及NEBNext接头引物，Kapa文库制备试剂盒及NEBNext接头引物，和SureSelect
ReagentKit，Illumina(ILM)平台配合Herculase® IIFusionDNA聚合酶进行建库。随后的靶向富集使用SureSelect® HumanAllExonV6试剂盒完成。
实验均按照生产商推荐的方法进行，包括推荐的PCR循环数及捕获前和捕获后处理。使用NEBNext
UltraII构建的文库在两种富集方法下均可获得更高的捕获后产量。
查看更多靶向富集相关数据
批间质控
本批次的试剂盒是单独管理并通过功能验证。每个组分均通过标准的酶活性检测及质控，并通过严格的额外质量控制，质控情况可在每个组分的单独页面查询。
试剂盒组分
本试剂盒提供以下组分
优势及特点
特点
更高的文库产量，满足您更多需求
即使在DNA样本量非常低的情况下（低至500pg），依旧能够产生高质量的文库
适用于所有DNA样本，包括富含GC的区域及FFPE-DNA样本
提高靶向富集等应用的产量及质量
流程化的操作过程，操作时间大大减少，与自动化建库设备兼容；试剂盒和模块提供了极大的选择灵活性
性能和使用
需要但试剂盒中不提供的试剂及材料：
1.80%Ethanol(新鲜制备)
2.Nuclease-freeWater
3.0.1XTE(1mMTris-HCl,pH8.0,0.1mMEDTA)
4.DNALoBindTubes(Eppendorf#022431021)
5.SPRIselect® ReagentKit(BeckmanCoulter,Inc.#B23317)或
6.AMPure® XPBeads(BeckmanCoulter,Inc.#A63881)
7.NEBNextSingleplexorMultiplexOligosforIllumina(E7350, E7335, E7500, E7600)
8.磁力架
9. PCR仪
可选试剂：
1.10mMTris-HCl,pH8.0或
2.10mMTris-HCl,pH8.0with10mMNaCl(用于起始量≤100ng时接头稀释)
贮存温度：
-20°C
温馨提示：不可用于临床治疗。
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2019-02-22
阅读（169）
▍
相关分类
▍
相关文章
大型大量质粒提取试剂盒操作方法及步骤说明书
GREEN MOUNTAIN(谷瑞盟)品牌详细介绍、口碑点评怎么样以及官网...
QSP 移液器吸头
核酸提取(TheExtractionofNucleicAcid)资讯
AxyPrep 细菌基因组 DNA
公司简介 株式会社松本交商
德国美天妮磁珠分选
BIOFARMACIJA Bio Cinkas 30mg N20 | Parfumerija Douglas ...
Transworld Commddities Llc进口数据及联系方式
姐妹染色单体分化染色中IdUrd和BrdUrd的效果比较1)
分离纯化总RNA
超声波清洗机和传统清洗手段相比有哪些优势?_表面
▍
相关问答
