LifespanBiosciences公司是分子病理学行业的领头军,销售抗体、免疫组化服务以及蛋白质定位数据库。1995年创立的LifeSpanBiosciences已开发了针对药物标靶主要种类的专有抗体,用以研究这些蛋白质在人正常和患病组织中的表达。LifeSpanBiosciences在高通量成像和癌症鉴别软件产品中也处于领先地位,正在开发用于在在临诊前期毒理学和癌症诊断方面进行病理学解读的仪器和软件。
关于LifeSpanBioSciences,Inc.(LSBIo)LifeSpanBioSciences为全球研究人员提供高质量的抗体,蛋白质,生化试剂,ELISA和化验试剂盒,免疫组化数据和服务。由Drs。于1995年创立。约瑟夫·布朗和格兰纳·伯默(LSG)成立于LSBio,是一家分子病理学公司,致力于IHC在人体疾病组织中的蛋白质定位。通过执行数千项IHC研究以及生成和测试成千上万种抗体获得的经验,LSBio已成为抗体行业的世界领导者,并以卓越的声誉而著称。 LSBio拥有针对20,000个靶标的550,000单克隆和多克隆抗体目录。抗体可用于大多数物种和所有主要研究应用,例如免疫印迹,IHC,免疫荧光和荧光激活的细胞分选。通过广泛的正在进行的内部测试,这些抗体中的14,000多种也被鉴定为特殊的IHC试剂,并获得了IHC-plus™品牌。 LSBio还提供30,000种高质量的免疫测定,包括夹心ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒,竞争性EIA(酶免疫测定)试剂盒以及基于细胞和DNA结合的试剂盒。 LSBio还提供45,000种天然蛋白提取物以及经过工程改造的重组蛋白,其形式为细胞裂解液或高度纯化的试剂。 最近,LSBio发布了他们不断增长的化验试剂盒和生化试剂系列,旨在补充研究社区的其他产品线。 十多年来,研究人员一直依靠LSBio的专业知识来满足其分子病理学外包需求。LSBio的服务包括:抗体生产和鉴定,定制的IHC研究(由庞大的档案人类组织库支持)以及组织交叉反应性筛选。 LSBio坚持其产品和服务的质量,并提供无与伦比的客户服务和支持。在未来的几年中,LSBio计划继续扩大其高质量蛋白质组学产品的目录,为客户提供出色的试剂,服务和支持,以加速他们的研究。
免疫组织化学服务与LifeSpan合作设计定制的免疫组织化学,以解决您的特定生物学问题。将整个定位过程外包,而不必担心寻找和表征靶标特异性抗体,寻找和鉴定难以发现的组织,并具有解释与复杂的人类病理学有关的免疫染色的能力。TCR筛选服务在免疫组织化学中针对大量正常的冷冻人类组织类型测试您的治疗性抗体,以确定潜在的意外结合。我们的非GLPTCR服务是根据FDA的建议设计的,该建议在其“用于人类的单克隆抗体产品的生产和测试要考虑的要点”中概述。免疫组织化学验证抗体的领导者新冠肺炎LSBio提供了许多与冠状病毒有关的产品,包括抗体,蛋白质,检测试剂盒和可表达的ORF克隆。SARS-CoV-2/COVID-19冠状病毒检测冠状病毒和COVID-19抑制剂冠状病毒蛋白质组学细胞因子释放综合征一般冠状病毒信息抗体我们收集了针对大多数靶蛋白的565,268单克隆和多克隆抗体。它们涵盖了所有主要的研究物种,应用,并且有多种共轭形式。我们的IHC-plus™抗体非常适合用于FFPE人体组织免疫组织化学。所有抗体Path- Plus ™癌症病理抗体Path- Plus ™神经抗体原发性抗体Path- Plus ™癌症抗体二抗IHC- Plus ™抗体同型对照ELISA和测定试剂盒我们的传统三明治,竞争性EIA和直接ELISA试剂盒提供了一种定量测量数千个目标靶标的方法,而我们的基于细胞和DNA结合的ELISA试剂盒是进行体外研究和转录因子分析的理想选择。化学发光CLIA试剂盒可对低拷贝靶标进行高灵敏度检测,我们的开发试剂盒使研究人员能够经济高效地进行大量测定。我们不断增加的化验试剂盒集合为研究人员提供了监测多种生物过程的方法,例如细胞凋亡,细胞增殖,新陈代谢等。所有套件检测试剂盒传统ELISA试剂盒基于细胞的ELISA试剂盒磷酸特异性ELISA试剂盒DNA结合ELISA试剂盒ELISA开发试剂盒化学发光CLIA试剂盒蛋白质类蛋白质可用于各种各样的应用中,例如用于功能测定的开发,小分子筛选,原位受体活化或仅用作WesternBlot的对照。我们提供提取的天然蛋白和重组蛋白,其形式为细胞裂解物,或者从细菌或哺乳动物表达系统中纯化。许多蛋白质具有生物活性并经过认证的低内毒素。所有蛋白质重组蛋白天然蛋白质过表达裂解物生物活性蛋白无动物蛋白合成肽细胞和组织产品LSBio提供广泛的细胞和组织产品,包括FFPE组织切片,面板和阵列,第一链CDNA,基因组DNA,总RNA,细胞和组织裂解物,以及各种相关的测定试剂盒。所有细胞和组织产品组织切片和阵列细胞和组织裂解液RNA和DNA提取物分子生物学LSBio提供了超过13,000个cDNA的广泛选择,每个cDNA均可在克隆载体或十四种不同的即用型表达载体之一中获得。cDNA/ORF克隆是研究蛋白质功能和基因表达的基础。经过验证的表达就绪ORF克隆为研究人员提供了直接启动蛋白质分析和表达研究的选择,而无需花费宝贵的时间进行RNA分离,cDNA合成,框内克隆和测序。所有分子生物学产品cDNA克隆表达就绪的ORF克隆免疫组化试剂LSBio提供设计和执行定制免疫组织化学实验所需的所有组件,从抗原回收到盖玻片。用于AP或HRP底物开发的高质量,值得信赖的品牌封闭剂,检测柱和Avidin-Biotin系统。使用我们的鼠标鼠标和多路检测系统,轻松完成具有挑战性的项目。所有IHC试剂抗原提取封闭剂检测聚合物ABC检测试剂盒基材特别/柜台污渍安装介质免疫组织化学数据和服务在过去的20年中,我们进行了1000项自定义IHC研究。我们的病理学家团队在设计有效的IHC研究和解释与正常和疾病过程相关的结果方面经验丰富。这些服务得到了我们庞大的组织库的支持,该组织库几乎包含每种组织类型和疾病。定制免疫组织化学研究组织交叉反应筛选免疫组织化学报告IHC-plus™抗体关于我们的组织银行生化产品特色产品类别包括激动剂,拮抗剂,抑制剂和调节剂,可满足您的生物医学研究需求。高质量的产品可用于癌症研究,心血管疾病,细胞生物学,脂质研究,免疫学,新陈代谢,神经科学,氧化损伤和毒理学。所有生化试剂
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另外,超滤膜在过滤方式上也分为内压和外压两种,那么哪种过滤方式能让超滤膜的使用寿命更长呢?内压式超滤膜被截留的污染物在超滤膜管内,可以被直冲洗水流全部冲走。而外压式超滤膜的污染物存在于膜管之间,污染物无法全部冲洗干净,日累月积,引起超滤膜堵塞。所以相对而言内压式超滤膜的使用寿命更长。
见到论坛上很多做蛋白纯化的小伙伴,经常在使用超滤技术的时候遇到各种相同的问题,反复的在版块上出现,根据自己的经验,我把此方面的内容整理一下,便于初学者以及遇到问题的小伙伴了解掌握。
如果大家有问题可以留言,咱们切磋交流,我没有将我在使用中的经验、教训一一罗列,更多的是将该技术相关的基础知识和背景进行了总结,因为我认为我们对任何一种技术的研究运用,都应当立足于其基础知识和背景来进行,而非“明知不可而为之”。
超滤(此处仅指用于蛋白样品处理的超滤技术)
定义:是以压力为推动力进行大分子和小分子分离的膜分离技术之一。
关键概念:截留分子量(MWCO),所有的膜分离技术均涉及的问题。其定义为:用已知分子量的球状物质进行测定。膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能。以前参加研讨会的时候有老师称,一般大分子量90%截留,小分子量50%截留。与超滤有关的另一个概念是浓差极化,在膜分离过程中,大分子物质被膜所截留不断累积在膜表面上,使其在膜表面的浓度远高于其在主体溶液中的浓度,从而形成浓度差,并促使其反向主体溶液中扩散。一方面造成局部浓度过高,对蛋白本身的稳定性造成挑战,极易沉淀,另一方面对分离产生阻力,影响分离的成败和成本。
常见用途:去除盐类,浓缩样品
主要误区:经常有人认为或建议别人使用超滤技术进行两个不同大小分子量的蛋白分离,但几乎很少有人尝试成功过,即使成功了,也很难重复出来。仔细理解定义,我们可以看出超滤技术的局限性在哪里,关键词就在于:已知分子量的球状物质、截留率。这也是导致误区的所在。我们所拿到的标示10KD截留分子量的超滤装置,仅代表10KD球状蛋白可以很大概率的被截留在膜上面。定义中是进行的一个标准实验,实际使用中情况千差万别(我们的蛋白形状未必都是球状的,其他杂质存在干扰,膜及装置的差别等),所以不必太纠结这个MWCO的存在,参考而已。在使用时,一般会选择1/3目标蛋白分子量的超滤装置规格进行使用。以保证目标蛋白的浓缩。
常见超滤装置:
超滤是以压力为推动力的,常用的压力来源有使用惰性气体、离心力以及电驱动泵动力几种情况。我使用比较多的是下面的前两张图,左图是使用氮气罐进行正压超滤,可以进行搅拌,避免浓差极化,一般使用的压力为0.15-0.2MPa。过高的压力一方面超出装置的耐受,另一方面高压也容易引起蛋白质的失活变性。右图是不同规格的超滤管,搭配离心机进行使用,离心力一般几千g,不同厂家的有垂直的膜,也有水平的膜,我认为水平的效果稍好,使用这个装置的话,不可避免的损失比前者大(但其实每一种膜分离技术,损失都是不可避免的),我做过有时的损失会达到50%-70%,浓度越低损失越大。第三种是中空纤维浓缩,自动化程度可实现较高,处理样品的体积可以很大,可实现高倍浓缩,是其主要优势。
使用中常见注意事项:
超滤膜保存非常重要,不管使用哪一种装置,在使用后进行高盐+水清洗,以及低浓度乙醇保存,中空纤维的可以使用NaOH保存,尤其是前两种,膜一旦干了,就会导致孔径变化,或膜裂,无法继续使用;
不同蛋白最好不要混用超滤膜,非常容易引起交叉污染;
以上装置仅适用于澄清样品处理,浑浊样品会加剧膜孔径的堵塞和损坏;
使用过程中压力或离心力不要超出要求,以免损坏装饰;
一些超滤膜是分正反面的,即孔径分布呈梯度,也有一些超滤膜是不分正反面的,孔径均匀分布;
以上3种装置,我在使用中均遇到过蛋白沉淀的情况,因此蛋白质的稳定性问题需多考虑解决;
。。。。。。待补充
1、一般好的滤芯总是比较整齐:大品牌的滤芯在色泽上也比较白净、光鲜,如果差的滤芯没孔不通畅,而且材质发黄,保存不好的有发霉迹象,因为滤芯被安置在净水器内部,所以看起来比较困难,而市场上销售的滤芯样品是千挑万选的,所以看不出来问题。因此购买之前,尽量叫销售人员拆装;虽然要求过分,但是管用。当然这也只能从外观上判断,专业的做法是要气压试水,如果漏气,则滤芯不达标。消费者无法测试气压,只能在使用过程中体验,所以对售后服务要求比较高。
2、还有一种方法是看滤芯的外壳材质:一般厂家都使用食品级ABS材料(色泽黄,光滑,而且,个别为了节约成本,使用PVC(日丰管,下水道使用,白色,无光泽)。
1、理论说单纯超滤处理工艺除溶解状态重金属离
2、水重金属块、重金属颗粒除
3、我通超滤膜核滤材净水器俗称超滤净水器超滤净水器并用超滤膜项处理工艺另外KDF、离交换纤维等其滤工艺除重金属
结论:超滤净水器能除重金属要看重金属水存状态及净水器整体配置
超滤净水器RO纯水机区别
1、超虑净水器超滤膜滤精度般0.01微米左右RO膜滤精度万微米(根发直径约6070微米间) 2、纯水机要用电净水器要 3、纯水机要压力桶净水器要
4、纯水机用RO反渗透膜滤净水器用超滤膜滤
5、纯水机滤水含任何物质H2O水净水器除水杂质铁锈悬浮物细菌病毒保留水质钙镁离
首先两种产品使用材质同
超滤净水器净水器种主要使用滤芯滤水质超滤说明种产品水处理数比较般超滤净水器都五级滤RO纯水机除采用滤芯滤外内部压力桶渗透膜二处理水质水滤效更佳
其水滤效同
超滤净水器内部超滤膜概0.1微米水些污染物要比种所能除水部污染物产水量较适合厨房使用;RO膜滤度0.01微米能直接解决水99%污染产更干净水源RO纯水机产水量相少且处理水污染同水部营养物除双各自身优缺点
两者间价格
净水设备价格主要产品使用材质水处理效等等计算相说RO纯水机要比超滤净水器价格高些般RO纯水机价格1000-2000左右超滤净水器价格概500-1000消费者根据实际需求选择
由于超滤技术诸优点故用作:
(1)物质脱盐浓缩及物质溶剂系统交换平衡
(2)物质级离
(3)化制剂或其制剂热原处理
超滤技术已制药工业、食品工业、电工业及环境保护诸领域缺少力工具 超滤技术关键膜膜各种同类型规格根据工作需要选用早期膜各向同性均匀膜即用微孔薄膜其孔径通0.05mm 0.025mm近几产些各向异性称超滤膜其种各向异性扩散膜由层非薄、具定孔径孔皮肤层(厚约0.1mm~1.0mm)层相厚(约1mm)更易通渗、作支撑用海绵层组皮肤层决定膜选择性海绵层增加机械强度由于皮肤层非薄高效、通透性、流量且易溶质阻塞导致流速降用膜般由乙酸纤维或硝酸纤维或二者混合物制近适应制药食品工业灭菌需要发展非纤维型各向膜例聚砜膜、聚砜酰胺膜聚丙烯腈膜等种膜pH 1~14都稳定且能90℃工作超滤膜通比较稳定若使用恰能连续用1~2暂用浸1%甲醛溶液或0.2%NaN3保存超滤膜基本性能指标主要:水通量[cm3/(cm2?h)];截留率(百率%表示);化物理稳定性(包括机械强度)等
超滤装置般由若干超滤组件构通板框式、管式、螺旋卷式空纤维式四种主要类型由于超滤处理液体数含水溶性物、机胶体、糖及微物等些物质极易粘附沉积于膜表面造严重浓差极化堵塞超滤关键问题要克服浓差极化通加液体流量加强湍流加强搅拌
物制品应用超滤高经济效益例供静脉注射25%胎盘血白蛋白(即胎白)通用硫酸铵盐析、透析脱盐、真空浓缩等工艺制备该工艺流程硫酸铵耗量能源消耗操作间透析程易产污染改用超滤工艺平均收率达97.18%;吸附损失1.69%;透损失1.23%;截留率98.77%幅度提高白蛋白产量质量每节省硫酸铵6.2吨自水16000吨目前外产超滤膜超滤装置名厂家美Milipore公司德Sartorius公司内知名厂家立升
超滤废水处理应用
(1)原性染料废水处理;
(2)电泳涂漆废水处理;
(3)含乳化油废水处理;
(4)污水处理 种孔径规格致额定孔径范围0.001-0.02微米微孔滤膜采用超滤膜压力差推力膜
滤超滤膜滤超滤膜由醋酯纤维或与其性能类似高材料制适于处理溶液溶质离增浓用于其离技术难完胶状悬浮液离其应用领域断扩压力差推力膜滤区超滤膜滤、微孔膜滤逆渗透膜滤三类区根据膜层所能截留粒尺寸或量膜额定孔径范围作区标准则微孔膜(MF)额定孔径范围0.02~10μm;超滤膜(UF)0.001~0.02μm;逆渗透膜(RO)0.0001~0.001μm由知超滤膜适于处理溶液溶质离增浓或采用其离技术所难完胶状悬浮液离超滤膜制膜技术即获预期尺寸窄布微孔技术极其重要孔控制素较根据制膜溶液种类浓度、蒸发及凝聚条件等同同孔径及孔径布超滤膜超滤膜般高离膜用作超滤膜高材料主要纤维素衍物、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺及聚碳酸酯等超滤膜做平面膜、卷式膜、管式膜或空纤维膜等形式广泛用于医药工业、食品工业、环境工程等我都知道筛用筛东西能细物体放行较截留您听说能筛筛超膜--种超级筛能尺寸等筛底超滤膜呢 超滤膜种具超级筛离功能孔膜孔径几纳米几十纳米说根发丝1‰膜侧施适压力能筛于孔径溶质离量于500道尔顿、粒径于2~20纳米颗粒超滤膜结构称非称前者各向同性没皮层所向孔隙都属于深层滤;者具较致密表层指状结构主底层表层厚度0.1微米或更并具排列序微孔底层厚度200~250微米属于表层滤工业使用超滤膜般非称膜超滤膜膜材料主要纤维素及其衍物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、交链聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物等等
超滤厨饮用两用机:①PP棉滤芯、②性碳、③纳米膜表超滤膜滤芯、④复合滤芯五级滤设备加置性炭六级加矿化滤芯立市场见直饮水机更级加更针性滤芯 (1)增压泵超滤膜力差推力进行滤原水水压能满足滤需求系统需要增加泵加压实现超滤膜离作用由于超滤膜工作压力较低般于O·7MPa故系统设计般选用离泵选择离泵主要依据扬程、流量、泵体材质其泵体积、外观造型价格等
①扬程流量选择根据超滤系统设计所需要进水工作压力跨膜压差通水流量选择泵扬程流量般选择水泵扬程流量应等于或略于设计供水量工作压力满足超滤系统运行
②泵体材质选择根据原水水质情况选择合适泵体材质减少投资本其材质能与原水产任何反应能溶解现象原水pH值6.5~8.5选用铸铁泵体;原水海水应选耐海水腐蚀塑料泵体;医药食品工业水处理却般选择使用锈钢泵体
化清洗泵般选择耐化药剂泵体
(2)减压阀 原水水压于系统设计水压要原水进行减压般采用减静压减压阀实现减压阀减压精度视超滤系统定另根据原水水质选择适合材质减压阀般选材质铜、锈钢、铁、塑胶
(3)物理清洗化清洗系统 清洗系统主要由配药箱、净水箱、循环泵组采用气水混合清洗包括空压机般物理清洗等压冲洗反冲洗等压冲洗关闭产水阀全浓水阀使原水快于工作状态流速冲刷膜表面除污垢反冲洗关闭原水阀采用循环泵净水箱水产水口打入膜组件使净水按滤反向透膜冲刷掉膜表面污染物并使其浓水口排反冲洗马进行等压冲洗能更效截留污染物排加强清洗效顺冲采用气水混合液进行冲洗
化清洗系统用循环泵配药箱内清洗液送入超滤系统进行循环清洗浸泡靠化药品作用除膜表面污垢恢复膜产水能力维持设计流量要求
(4)消毒灭菌系统超滤消毒灭菌系统所用设备操作程序与化清洗系统相同仅需要清洗液换灭菌液即般使用灭菌剂氯酸钠氧化氢选择灭菌剂要考虑剂膜材质灭菌剂浓度例Ps材质膜能采用含阴离表面性剂灭菌剂否则膜造逆通量损失
(5)自化计量、监控仪表
①计量水流量采用流量表计量流量计转流量计、浮流量计、电磁流量计、挣针式流量计等超滤系统采用玻璃浮(转)流量计主要显示直观价格低台超滤系统少需要设置两流量计便观察产水流量计浓水流量计或原水进水流量计 流量计规格选择根据系统流量定浮流量计选择通选用量程1.5~2倍实际测量流量
②监控系统及仪表超滤系统运行必须严格按照设计参数进行操作需要系统相关参数进行监控其主要监控项目水质、流量、压力手操作采用仪表编程控制器系统进行自控制
水质监控采用水质监测仪进行水压监控采用压力关压力表进行流量控制采用电流量计进行监测并监测信号反馈PLC控制泵阀门及清洗系统实现系统自化
压力超滤系统重要参数故压力表选择要注意其精度耐用性压力表量程选择使用压力能使指针处于刻度盘1/2~2/3位置宜并要考虑水锤压力表冲击图" class="ikqb_img_alink">
其滤精度0.01~0.1微米属于二十世纪高新技术种利用压差膜离技术滤除水铁锈、泥沙、悬浮物、胶体、细菌、机物等害物质并能保留体益些矿物质元素
矿泉水、山泉水产工艺核部件超滤工艺水收率高达95%并且便实现冲洗与反冲洗易堵塞使用寿命相较
超滤净水器需要加电加压仅依靠自水压力进行滤流量使用本低廉较适合家庭饮用水全面净化未饮用水净化超滤技术主并结合其滤材料达较宽处理范围更全面消除水污染物质
钠滤(NF)
其滤精度介于超滤反渗透间脱盐率比反渗透低种需要加电、加压膜离技术水加收率较低般用于工业纯水制造
——广东震昊机电希望您帮助