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EnVision是DAKO公司推出的一种两步法免疫组化技术,又称为ELPS法。EnVision比SP,ABC一般的显色比较:1 要敏感很多,定位比较好:EnVision系统是将二抗和酶联接成一个多聚体(即EnVision)直接放大信号40-50倍,再与已经结合的一抗反应,最后显色剂显色。采用该法可将一抗稀释度提高1~2倍,尤其对抗原表达较弱组织。也有人说SP法敏感度比EnVision高1-2倍,但SP法毕竟不宜用于富含亲生物素物质的组织。2 非特异性背景少: EnVision法是多聚物上连接二抗和酶,在组织中不含有这种多聚物,从而避免了组织中生物素的干扰。在含生物素较丰富的组织中,用EnVision法比较好。除血细胞较丰富的组织和坏死组织外,其实可省略内源性过氧化物封闭步骤。3 比较省时:染色步骤为两步,且第二抗体孵育时较短。EnVision程序:1) 脱蜡、水化组织切片。2) 预处理组织切片3) 蒸馏水漂洗,置于TBS中。4) 阻断内源性过氧化物酶(仅用于EnVision TM)5) 蒸馏水漂洗,置于TBS,10分钟6) 一抗孵育10-30分钟7) TBS漂洗10分钟8) EnVisionTM孵育10-30分钟9) TBS漂洗10分钟10) 色源底物溶液孵育10分钟11) 蒸馏水漂洗12) 复染及封片
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