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Everest Biotech/BrdU Immunohistochemistry Kit 20 slides/3100030205/20 slides
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4000-520-616
TheBrdUImmunohistochemistryKitisdesignedtomeasurecellproliferationinformalinfixed,paraffinembeddedcellsortissuesthathavebeenlabeledby5-bromo-2’-deoxyuridine(BrdU).BrdU,apyrimidineanalog,whenpresentintissuecultureorgiventoanimalswillbeincorporatedinplaceofthymidineintothenewlysynthesizedDNAofproliferatingcells.ThiskithasallthecomponentsoptimizedtodetectBrdUbyafastandrobusttwostepantigen-antibodyreaction.Usingthemostcommonheatinducedantigenretrievalmethodincitratebuffer,thiskitiscompatIBLewithmanyotherIHCassayfordoublestainingtheproteinofyourinterestforthecorrelationstudiesrelatedtocellproliferation.
KitContents
Reagentsprovidedinthekit
Thenumberoftestsisbasedontheuseof200μLeachofready-to-usereagentperslide.
PositiveControlSlide
•positivecontrolslide
EquilibriumBuffer
•EquilibriumBuffer
•Ready-to-usereagent
BlockingBuffer
•10XNon-specificblockingbuffer
•Diluteat1:10usingdistilledwaterpriortostaining;unusedworkingsolutionmaybestoredat4°Cfor3month.
RatBrdUantibody
•Ratanti-BrdUantibody
•DiluteinAntibodyDiluentsimmediatelybeforeuse(recommenduseat1:50dilution).
AntibodyDiluent
•AntibodyDilutent
•Ready-to-usereagent
WashBuffer(20x)
•TrisbufferedsalinewithTween20(pH7.6)
•Diluteat1:20usingdistilledordeionizedwaterpriortostaining;unusedworkingsolutionmaybestoredat4°Cfor3month.
RatHRPPolymer
•RatHRPPolymer
•Ready-to-usereagent
DABsubstratebuffer
•10XDABsubstratebuffer
•Beforeuse,add100μL10XDABsubstratebufferto1mLofdistilledordeionizedwatertomake1XDABsubstratebuffer.
HydrogenPeroxide(H2O2)forDABsubstratebuffer
•0.3%HydrogenPeroxidesolution
•Beforeuse,add15μLH2O2to1mLof1XDABsubstratebuffer.
DABChromogen
•Diaminobenzedinetetrahydrochloride(DAB)substratesolution
•Beforeuse,add25μLDABChromogento1mLof1XsubstratebufferwithH2O2.ThepreparedSubstrateworkingsolutionshouldbestoredat2-8°Candusedwithin1day.DonotexposeDABcomponentstodirectorbrightlightduringstorageandstainingprocess.
Materialsrequiredbutnotincludedinthekit
Reagents:
•Xylene
•Ethanol
•EndogenousPeroxidaseBlockingSolution(3%HydrogenPeroxide)
•Hematoxylin
•Mountingmedia
•Distilledordeionizedwater
•AntigenRetrievalBuffer(10X)0.1MCitrateBuffer(pH6.0)Diluteat1:10using
LabEquipment:
•Steamerormicrowaveoven(forantigenretrieval)
•Generallabequipmentforimmuno-histostainingsuchasslideracks,stainingjars,coverslips,timer,Pipettes,etc.Microscopeequipmentandaccessories
StorageandstABIlity
StoreIHCKitsat2‐8°C.Thekitisstableforsixmonthsat4°C.
Donotuseafterexpirationdate.
Precautions
Takereasonableprecautionswhenhandlingreagents.UsedisposablegloveswhenhandlingsUSPectedcarcinogensortoxicmaterials(examples:DAB,xyleneandH2O2).Unusedsolutionshouldbedisposedaccordingtoapplicablelocal,stateandfederalregulations.
TheBrdUImmunohistostainingKithasbeendesignedforthestainingoftissuesthathavebeenfixed(usuallyinneutralbufferedformalin)andsubsequentlyembeddedinparaffinbeforesectioning.Thisprotocolisrecommendedasastartingpoint.Wheneverusinganewantibodyorimmunohistochemistrykit,optimizationbytheindividualend‐usermayberequired.
Note:
- Donotallowspecimenstodryduringthestainingprocedure.Specimendryingmaycauseincreasednon‐specificstainingandbackground.
- Sometissuemayneedtobaketoremoveover‐coveredparaffinpriortotheprocedure.Ifneeded,bakeat55‐60°Cfor30minutes.
I.Deparaffinizationandrehydration
Priortostaining,tissuesectionsmustbedeparaffinizedandrehydrated.Incompleteremovalofparaffincancausepoorstainingofthesection.
- Immerseslidesinxyleneandincubatefor5minutes.Repeattwicewithfreshxyleneforanother5minuteseach.
- Immerseslidesin100%ethanolfor5minutes,andfollowwithimmersionin95%,75%and50%ethanolfor3minuteseach.
- Rinseslideswithdistilledwaterfor5minutes;keepinwateruntilreadytoperformantigenretrieval.
II.Heatinducedantigenretrieval(HIAR)
Mostformalin‐fixedtissuerequiresanantigenretrievalstepbeforeimmunohistochemicalstainingcanproceed.Heatinducedantigenretrievalcanbeperformedusingasteamer,pressurecooker,oramicrowave.Theretrievaltimewritteninthisprotocolisbasedonusingaretrievalsteamer.Theheatingtimemayneedtobeadjustedifyouuseadifferentdeviceandmethod.
- FillplasticCoplinjar/containerwithAntigenRetrievalBuffer.
- PlacetheCoplinjar/containerinsteamer.
- Turnonsteamerandpreheatto90‐100°C.CarefullyputslidesintotheCoplinjar/containerandsteamfor40min(95‐100°C).
- Turnoffthesteamer,removetheCoplinjar,placeatroomtemperatureandallowslidestocoolfor20min.
- Rinseslidebyincubationofslideindistilledwaterfor3minutes.Repeatthissteptwiceandbeginstainingprocedure.
III.Stainingprocedure
PeroxidaseBlockingisoptional.Ifnonon-specificstainingisobserved,skipthesestepsandgotostep3.
- Tapoffexcesswater.Apply200μlormoreofPeroxidaseBlockingSolutionsufficienttocoverspecimen,andincubatefor5minutes.
- Rinseslidebyincubationofslideindistilledwaterfor3minutes.Repeatthissteptwice.
- Tapoffexcesswater.Apply200μlBlockingReagenttocoverspecimenandincubatefor5minutes.
- RinseslidebyincubationofslideinPBSfor3minutes.
- TapoffexcessPBS.Apply200μlEquilibriumBuffertocoverspecimenfor30minutes
- TapoffexcessEquilibriumBuffer.Apply200μlAnti‐BrdUAntibody(recommend1:50dilutioninAntibodyDiluents)tocoverspecimen,andincubateatroomtemperaturefor2hours.
- Rinseslidebyincubationofslidein0.5-2mLWashBufferfor3minutes.Repeatthissteptwicewithfreshbuffer.
- RinseslidebyincubationofslideinPBSfor3minutes.
- TapoffexcessPBS.Apply200μlRatHRPPolymertocoverspecimen,andincubatefor60minutes.
- Rinseslidebyincubationofslidein0.5-2mLWashBufferfor3minutes.Repeatthissteptwicewithfreshbuffer.
- RinseslidebyincubationofslideinwithPBSfor3minutes.
- TapoffexcessPBS.ApplyenoughDABSubstrateSolutiontocoverspecimen.Checkdarkbrowncolordevelopmentundermicroscopeandincubateuntildesiredstainintensitydevelops.
- Rinseslideintapwaterfor3minutes.
- Ifdesired,completecounterstain(Seeinstructionforhematoxylincounterstaining).Rinseintapwatertoclear.
- Immerseslidesin70%,80%,95%Ethanolfor2minuteseach,and100%Ethanolfor10minutestwicefollowinXylenefor5minutestwice.
- Dryandmountslides.
Tomake1mLDABSubstrateSolution,add25μLDABChromogento1mLof1XsubstratebufferwithH2O2
VI.InstructionforHematoxylincounterstaining
- Immerseslidesinhematoxylinsolution.Incubatefor30secondsto5minutes,dependingonthestrengthofhematoxylinused.
- RinsetoclearwithtapwaterandcontinuebydehydrationfromStep14.
Problems | PossibleCauses | Solutions |
Overstaining | 1.Toolongincubationtimeofprimaryantibody,ortoohightemperaturewhendoingstaining 2.ToolongincubationtimeofDABsubstrate. 3.Slidedriedduringstainingprocess | •Dependingontissuesections,theincubationtimeofprimaryantibodycanbereducedto2hours;Checktheroomtemperaturerangeisat20-250Cwhendoingstaining. •ReduceincubationtimeofDABsubstrate •Avoidsectionstodryduringstainingprocess. |
Weakornostaining | 1.Incompleteremovalofparaffin 2.Tissuesover‐fixation 3.Notefficientantigenretrieval 4.Reagentsnotusedinproperorderoromittedsteps 5.Expiredantibodyorreagents | •Deparaffinizesectionslongerorchangetofreshxylene;sometissuearraymayneedtobaketo removeover‐coveredparaffin. •Increasingtheconcentrationofprimaryantibodyto1:40;ifthisdoesnotwork,reducedurationof post‐fixation. •Adjustantigenretrievaltimebasedonthesettingforsectionfixationandretrievaldeviceused. •Reviewnotesandprocedureused. •Checkkitexpirationdatesandkitstorageconditions |
Highbackground | 1Sectionsdriedduringstainingprocess 2Slidenotrinsedthoroughly 3Antigenover‐retrieval | •Donotallowsectionstodryduringstainingprocess;usehumidcontainerduringincubation withprimaryantibody. •Usefreshsolutioninbufferjars;rinseatleastthreetimesbetweensteps. •Optimizeantigenretrievaltimeifyouusedmicrowaveorpressurecookerforretrieval. |
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-09-03
免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学... 查看更多
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2018-04-17
上海研生实业有限公司所提供的表皮生长因子受体免疫组化试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-08-10
上海研生实业有限公司所提供的孕激素受体免疫组化试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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免疫组化实验中常见的几种溶液配制方法 查看更多
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2021-08-29
上海研生实业有限公司所提供的人谷胱甘肽-S-转移酶-π（GST-π）免疫组化试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-12-26
1. Run samples out on a gel. For bacterially expressed proteins, generally 5 uL is plenty (1ml cell culture; cells resuspeded in 50 ul loading buffer). Run the 查看更多
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2021-09-01
上海研生实业有限公司所提供的甲状腺转录因子-1（TTF-1）免疫组化试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-12-26
Western Blot MaterialsSemi-dry Transfer ApparatusBiorad, Cat# 170-3940, or equivalentPower Supply0 - 100 VDC (adj. current to 1 Amp)Immobilon-P transfer membra 查看更多
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2018-04-17
上海研生实业有限公司所提供的表皮生长因子受体磷酸化抗体免疫组化试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-07-22
上海沪震实业有限公司在发布的即用型SABC-POD免疫组化试剂盒 （适用人/大鼠/小鼠/山羊/兔中一种）供应信息，浏览与即用型SABC-POD免疫组化试剂盒 （适用人/大鼠/小鼠/山羊/兔中一种）相关的产品或在搜索更多与即用型SABC-POD免疫组化试剂盒 （适用人/大鼠/小鼠/山羊/兔中一种）相关的内容。 查看更多
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2021-08-30
上海研生实业有限公司所提供的前列腺特异性抗原（PSA）单克隆抗体免疫组化试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-09-09
上海研生实业有限公司所提供的p21活化的激酶1免疫组化试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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一般情况下，退货处理周期为客户收到产品一个月内（以快递公司显示签收时间为准），包装规格、数量、品种不符，外观毁损、短缺或缺陷，请在收到货24小时内申请退换货；特殊商品以合同条款为准。
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【求助】一个免疫组化试剂盒能做多少切片? 动物科学与动物医学...123
tianwenjia2021-07-22
免疫组化试剂盒哪个公司的好? 123
dadoudou2021-08-04
elisa试剂盒抗体能不能用于免疫组化?123
玩转TA00362017-10-01
elisa试剂盒抗体一般不能用于免疫组化。
一、免疫组化试剂盒一般包括：
1、特异性的一抗
2、免疫组化检测系统。
3、有的同时还具备显色系统。
二、不同的公司内容有差别，所以购买时一定了解清楚：
1、一抗是做人的还是兔、鼠的组织；
2、检测系统是ABC/SP/非生物素/其他；
3、试剂盒的内容都有什么？有没有显色系统？
4、如果没有，自己根据前面的检测系统需配哪个显色系统。（其他的辅助试剂如PBS缓冲液、抗原修复液等一般另卖或自配）
三、免疫组化抗体即指特异性一抗，是用来标记的指标，免疫组化过程的其他试剂一律另外配备。
另外：做实验时，如遇出结果困难，记得做阳性片对照，敢于怀疑检测系统或显色系统的问题。
一、免疫组化试剂盒一般包括：
1、特异性的一抗
2、免疫组化检测系统。
3、有的同时还具备显色系统。
二、不同的公司内容有差别，所以购买时一定了解清楚：
1、一抗是做人的还是兔、鼠的组织；
2、检测系统是ABC/SP/非生物素/其他；
3、试剂盒的内容都有什么？有没有显色系统？
4、如果没有，自己根据前面的检测系统需配哪个显色系统。（其他的辅助试剂如PBS缓冲液、抗原修复液等一般另卖或自配）
三、免疫组化抗体即指特异性一抗，是用来标记的指标，免疫组化过程的其他试剂一律另外配备。
另外：做实验时，如遇出结果困难，记得做阳性片对照，敢于怀疑检测系统或显色系统的问题。
【求助】做免疫组化单单购买免疫组化试剂盒就够吗? 实验动物 丁香 ...123
lijh12342021-07-29
ELISA试剂盒用哪个好一点 免疫学讨论版123
夏忻佳诤12017-10-01
本数据来源于百度地图，最终结果以百度地图最新数据为准。做TUNEL和MMP-2、MMP-9的免疫组化
通用SP检测试剂盒_IHC(免疫组化)_其它实验试剂_蛋白与免疫_...123
lzknfe无悔2017-10-01
即用型快速免疫组化maxvisiontm2试剂盒是什么方法– 960问答123
小白B8552017-10-01
即用型快捷免疫组化 MaxVision TM 试剂盒是根据聚合物技术把过氧化物酶与抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚物上形成多聚物分子。
【求助】北京中杉的免疫组化试剂盒的效果如何 细胞技术讨论版...123
dukaili2021-07-28
我做肉瘤的免疫组化，一抗用的ABCom，二抗和DAB用的博士德，但是做了几次都没有任何染色。由于烘箱60度烤片我只烤了20分钟，可能时间短了，但苏木素可以染上，是否说明烤片、脱蜡已足够。
用双氧水去除过氧化物酶时，我是自己配的3%双氧水滴到片上而非将片浸入双氧水，这样可否？
用博士德的DAB染色，配制方法为：1mlH20中加入DAB、H2O2、TBS各一滴，我配制的时候发现将DAB加入H20时很容易沉淀，要震荡才能混匀，且将配好的DAB滴到玻片上时，DAB会结为很小块的微颗粒悬浮在液体中但并不染色，是否DAB有问题？
现在打算换中衫的试剂盒，代理商说中衫的试剂盒包括了二抗和DAB，想请教一下该试剂盒的具体内容有些什么？
万分感谢！
用双氧水去除过氧化物酶时，我是自己配的3%双氧水滴到片上而非将片浸入双氧水，这样可否？
用博士德的DAB染色，配制方法为：1mlH20中加入DAB、H2O2、TBS各一滴，我配制的时候发现将DAB加入H20时很容易沉淀，要震荡才能混匀，且将配好的DAB滴到玻片上时，DAB会结为很小块的微颗粒悬浮在液体中但并不染色，是否DAB有问题？
现在打算换中衫的试剂盒，代理商说中衫的试剂盒包括了二抗和DAB，想请教一下该试剂盒的具体内容有些什么？
万分感谢！
哪家公司的免疫组化试剂盒好一些? 细胞技术讨论版论坛123
tiao2021-07-27
用哪家公司的免疫组化试剂盒好一些？打算用SABC染色的，其他方法也行。
【求助】免疫组化试剂盒选择问题 生物科学论坛学术科研...123
gb8209162021-08-03
免疫组化试剂盒哪个牌子的比较好 123
风渐远_诩粟92017-10-01
免疫组化试剂盒,有国产的和进口的
上海好多的供应商的，具体还是看你选择了，其实试剂盒产品都差不多，什么远慕生物，古朵生物...好多的额
上海好多的供应商的，具体还是看你选择了，其实试剂盒产品都差不多，什么远慕生物，古朵生物...好多的额
大家在实验室用的免疫组化试剂盒一般买什么牌子的啊? 123
lwh135400713872013-11-07
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