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Altogen/Beta-TC6 Transfection Kit (Pancreas, CRL-11506)/8.0 ml/6152
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Altogen/Beta-TC6 Transfection Kit (Pancreas, CRL-11506)/8.0 ml/6152
品牌 / 
Altogen Labs
货号 / 
6152
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Transfection Reagent for Beta-TC-6 Cells (Pancreas Tumor, CRL-11506)

  • Two component formulation enhances lipid mediated transfection efficiency
  • Optimized easy-to-use transfection protocol provided for transfection of siRNA, DNA, mRNA, and microRNA
  • Kit includes Transfection Enhancer reagent and recommended transfection protocol
  • High transfection efficacy in the presence of serum
  • Expand your RNAi application with a reagent optimized for delivery of both siRNA and plasmid
  • Reproducible transfection results
  • Works well for standard reverse transfection and high-throughput applications
  • Download in vitro Beta-TC6 transfection protocol: [PDF]
  • Download Beta-TC-6 CRISPR/Cas9 transfection protocol: [PDF]
  • Download PowerPoint presentation for Beta-TC6 cells transfection kit: [PPT]
  • Developed and manufactured by Altogen Biosystems

Transfection Efficiency:

Reagent exhibits at least 91% transfection efficiency of siRNA delivery. Transfection efficiency was determined by qRT-PCR.

Transfection Protocol and MSDS:

Download Altogen Biosystems Beta-TC6 Transfection Protocol: [PDF]

Download MSDS: [PDF]

Beta-TC-6 Cell Line:

Diabetes mellitus is a disorder that occurs when the body cannot make good use of the insulin it produces, or the pancreas fails to make enough insulin, which results in high blood sugar. Insulinoma is a rare neuroendocrine tumor that forms in pancreatic islet cells and is mainly treated via surgery. The rarity of insulinoma poses a challenge in the development of novel treatment drugs that can address it, as there are fewer participants in clinical trials, which makes comprehensive preclinical studies especially crucial in the quest to find a cure for it. Transfection studies carried out on viable cancer cell lines are a robust and widely-accepted method for conducting preclinical research on almost all types of cancer. The Beta-TC-6 cell line was established from pancreatic tumor tissue from a transgenic mouse (Mus musculus) suffered from insulinoma. These cells are transgenic for SV40 large T antigen and exhibit epithelial cell morphology (beta cell type). They have been known to produce glucagon, insulin, and somatostatin, secreting mainly insulin specifically in response to the presence of glucose. Beta-TC-6 cells are beneficial for biomedical research related to diabetes.

Data:

BetaTC6 Transfection Reagent

Figure 1. GAPDH mRNA levels were quantified using real-time RT-PCR in the Beta-TC6 cells transfected with siRNAs targeting GAPDH or non-silencing siRNA. Forty-eight hours post-transfection, the cells were harvested and analyzed by real-time RT-PCR for GAPDH mRNA expression levels. Data were normalized against the 18S rRNA signal. Control samples were either mock-transfected or untreated. Values are normalized to untreated sample. Data are means ± SD (n=5).

BetaTC6-cells-transfection-protocol

Figure 2. Protein expression of GAPDH in Beta-TC-6 cells. DNA plasmid expressing GAPDH or siRNA targeting GAPDH were transfected into Beta-TC-6 cells following Altogen Biosystems transfection protocol. At 72 hours post-transfection the cells were analyzed by Western Blot for protein expression levels (normalized by total protein, 10 µg of total protein loaded per each well). Untreated cells used as a negative control.

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Beta-TC6 Transfection Kit

Altogen Biosystems:

Altogen Biosystems is a life sciences company that manufactures over 100 cell type specific and pre-optimized transfection kits, electroporation buffers, and targeted in vivo delivery kits and reagents. Advanced formulation of reagents and optimized transfection protocols provide highly efficient intracellular delivery of biomolecules (proteins, DNA, mRNA, shRNA and siRNA, and small molecule compounds). Read more about transfection technology at Altogen’s Transfection Resource.

Selected in vivo transfection product citations (ALTOGEN® IN VIVO Transfection Kits used in the following publications):

  • Hypertension. 2015 65(2):430-9. Neurokinin 3 receptor and phosphocholine transferase… Parchim et al [PDF]
  • Gastroenterology. 2011 141(2) Differential type I interferon-mediated autophagic trafficking … Desai et al [PDF]
  • PLoS Pathog. 2014 10(10) Exosomes from hepatitis C infected patients transmit HCV … Bukong et al [PDF]

Altogen Labs Research Services:

Altogen Labs provides GLP-compliant contract research studies for pre-clinical research, IND applications, and drug development. Biology CRO services include: Xenograft models (30+), development of stable cell lines, ELISA assay development, cell-based and tissue targeted RNAi studies, safety pharm/tox assays, and other studies (visit AltogenLabs.com).

Volume Options:

  • 0.5 ml (Catalog #6150)
  • 1.5 ml (Catalog #6151)
  • 1.5 ml CRISPR (Catalog #2114)
  • 8.0 ml (Catalog #6152)

AltogenBiosystems是一家开发和制造用于生命科学研究,药物发现和开发的转染试剂盒的生物技术公司。转染试剂盒针对特定癌细胞系和原代细胞培养进行了优化,可将生物分子有效递送到靶组织中。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现体外(癌细胞系)和体内(动物组织靶向试剂、癌细胞系)递送货物分子,包括质粒DNA,各种类型的RNA(mRNA,siRNA,shRNA,microRNA),蛋白质和小分子研究。 


Altogen生命科学公司致力于研发,生产和销售特定细胞系的转染试剂,用于细胞间生物分子的传递,并通过对转染试剂类型的设计将siRNA和质粒DNA有效地转入不同的细胞系和原代细胞内。Altogen公司开发的聚合物,脂质体,纳米粒子为基础的转染技术分别针对分子生物学,组合化学,和细胞生物学而分别应用。Altogen定制服务提供符合GLP要求定制研究服务,包括代稳定的细胞系,细胞银行和冷冻保存,焦磷酸测序,克隆,RNA干扰(RNAi)和基因沉默服务,发展分析,siRNA文库筛选,并转染服务。稳定的肿瘤细胞株和原代细胞的产生,可以是非常昂贵和费时。该公司的细胞培养科学家的细胞株的选择,无论是利息或shRNA表达载体的稳定表达的基因改造。标准的RNAi技术服务,包括设计与合成的siRNA的利益,验证siRNA的沉默效率,siRNA转染条件的优化,使高效的基因沉默细胞系或原代培养细胞的靶基因。转染培养细胞的瞬时或稳定的引入外源性分子和遗传物质(即RNA或DNA),通常是在生物实验室用来研究基因功能,基因表达的调节,生化映射,突变分析,和蛋白质的生产。科学家利用各种载体分子,这种分子,使质粒DNA(PDNA),信使RNA(mRNA),短干扰RNA(siRNA),小分子RNA(miRNA)的,并进入肿瘤细胞株和原代细胞的蛋白质的基因交付。不幸的是,无单提货的方法或转染试剂,可以适用于所有类型的细胞,细胞的细胞毒性和转染效率显着不同,取决于试剂,协议,并正在利用细胞类型。Altogen生物系统公司提供超过60种类型的细胞的预优化转染试剂盒。纳米粒子,脂质和聚合物基ALTOGEN®在体内转染试剂,使交付功能的RNA和DNA分子在体内。PEG脂质体在体内输送系统减少由于PEG修饰的先天免疫反应,并提供高效的siRNA转染的DNA,并在体内的蛋白质。由科学“杂志(2010年12月17日):PEG脂质体在体内转染试剂盒siRNA的特色Altogen生物系统功能的特定细胞系转染试剂盒


120+细胞转染试剂和活体组织靶向试剂盒制造商AltogenBiosystems是一家生物技术公司,开发和制造用于生命科学研究、药物发现和开发的转染试剂盒。Altogen®体内转染试剂可有效地将生物分子导入靶组织。细胞转染试剂盒针对特定的癌细胞系和原代细胞进行了优化。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现货物分子(DNA、RNA、蛋白质)的高效传递。AltogenBiosystems利用高分子化学、分子和细胞生物学的专业知识,开发了新的体内外给药技术。转染是将外源分子导入培养细胞中,常用于研究基因功能、基因表达调控、生化定位和蛋白质生产。不幸的是,由于细胞毒性和转染效率的差异很大,并且取决于所使用的试剂、方案和细胞类型,因此没有一种单一的传递方法或转染试剂可应用于所有类型的细胞。AltogenBiosystems为120多个癌细胞系和原代细胞类型提供优化的转染试剂盒和电穿孔产品。体内转染试剂可实现组织靶向给药。Altogen的转染试剂盒包括用于体外(癌细胞系)和体内(用于动物研究的组织靶向试剂)转染的转染增强剂试剂和转染复合物冷凝器。Altogen实验室提供符合GLP的实验室合同研究服务。我们的生物CRO服务包括异种移植物的疗效、IND应用的pharm/tox研究和安全性测试、分析开发(ELISA、IC-50、qPCR)、90多个异种移植物动物模型、RNAi和基因沉默服务。Altogen的细胞培养科学家通过在28天内培育出稳定的细胞系,将选择的细胞系转化为稳定表达感兴趣的基因。

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Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。原理与Sou 查看更多>
Recipies for Cell FusionPhosphate-buffered saline (PBS) (0.01 M Na2HPO4 , 0.15 M NaCl, pH 7.4) sodium phosphate dibasic (Na2HPO4)0.87 g sodium phosphate monoba 查看更多>
免疫组织化学(Immunohistochemistry)又称免疫细胞化学。它是组织化学的分支,它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测技术。... 查看更多>
2014 年全球癌症报告显示,近年来我国胃癌新增病例和死亡人数均居世界首位,全球接近 50% 的新发胃癌病例来自中国。 然而,我国对于胃癌的诊断、治疗以及患者预后预测方面的规范还亟需完善。 对于病理医师而言,除了给患者提供规范化和信息详尽的病理报告之外,还需要对胃癌组织进行相关标志物的免疫组化检测,从而对胃癌患者的个体化治疗和预后预测提供依据。胃 查看更多>
REAGENTS ECL Western blotting kit (Amersham Life Science; cat# RPN2108): contains second antibodies for both mouse and rabbit, substrate and milk blocker (the 查看更多>
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 oC温箱中, 查看更多>
一些基本概念和基本知识:1 荧光免疫测定技术的概念:将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后 查看更多>
1、问:免疫荧光:用免疫荧光方法做同样的内容,组织切片和培养细胞,两者操作过程中有哪些不同?参考见解:只是固定方法不同,细 查看更多>
For Protein Concentration Determination of Cell CultureDecant medium from 10cm dish of adherent cells and rinse plate rapidly with phosphate-buffered saline (P 查看更多>
1、染色过强 原因 解决办法抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长 降低抗体滴度(一般指浓缩性抗体)抗体 孵育时间:室温1小时或4℃过夜 孵育温度过高,孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 查看更多>
Antibody LabelingThin sections of biological material, mounted on specimen grids, can be easily labeled by floating them, section-side down, on small drops of 查看更多>
Lysis buffer.The choice of lysis buffer depends on what the cells were labeled with and whether you want to obtain an active kinase. The lowest background is o 查看更多>
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请问有内有大神使用ABC法或SABC法进行蜡块免疫组化染色的,有ABC法的国产二抗试剂盒没,使用过的留个试剂公司名称和货号好吗?
两个作用。一是保湿。在BSA封闭之后,加一抗,一般是37°C一小时,或者室温2小时,或者4°C过夜。无论怎样,时间都比较长,抗体容易干掉,干掉之后染色或者荧光就标不出了。所以,加入一抗之后,放入一个可以密封的盒子里,再放一些湿的滤纸或者海绵,可以有效的防止片子干掉。二抗同理。二是避光。有些二抗上面的发光剂需要避光,否则荧光容易淬灭。湿盒一般是用不透明的材料做的,盖上盖子之后可以保证一个暗室环境。湿盒可以自己做的。一般的小的铝饭盒都可以,放点海绵滤纸棉花什么的进去,用的时候加点水就行=)

本人新手,最近做免疫组化,需要双染确定细胞。预实验做了两个抗体的单染,效果都不错。但是准备做双染的时候发现实验室里的双染试剂盒两个都是抗鼠的。而我之前两个一抗都是兔抗体。现在只能重新订购了。请问前辈们有相关推荐吗?

ALP试剂盒和ALP染色试剂盒是一样的吗?ALP染色和茜素红染色用什么拍照?
HER2阴性这是一个啊免疫指标,这种指标如果强阳性的话可以应用一种靶向药物。可以提高化疗的有效率,对肿瘤治疗效果比较好,现在如果乳腺癌免疫组化三个加号。都是推荐应用该要的。也阴性的患者,不见因为。因为收益率非常低
如题,做了免疫组化,分析趋势的时候发现,总共染色强度0~,3分,着色百分率0~4分,最后相乘0~12...
免疫组化检查多少钱?__123
游客军团ra2017-10-02
免疫组化根据所做的指标的个数收费,比如做10个就收10个免疫组化,每个收费40-160元左右(每个省的定价不一样)。
浓度进行测试,使每一抗体个体化,找到适合自己实验室的理想工作浓度,既使是即用型的抗体也应如此,不能只简单的按说明书进行染色。(2)抗体孵育时间过长或温度较高:解决办法是,严格执行操作规程,最好随身佩带报时表或报时钟,及时提醒,避免因遗忘而造成时间延长。现在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的时间不是传统的1小时,而是30分钟,因此,要根据染色结果进行调整。(3)DAB变质和显色时间太长:DAB最好现用现配,如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长,因为在没有酶的情况下,过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控,达到理想的染色程度时立即终止反应。不过当染色片太多时或用染色机时,这样做似乎不现实,但至少应对一些新的或少用的抗体显色时进行监控,避免显色时间过长。(4)组织变干:修复液溢出后未及时补充液体、染色切片太多、动作太慢、忘记滴液、滴液流失等都是造成组织变干的原因。解决的办法是操作要认真仔细,采用DAKO笔或PAP Pen在组织周围画圈,可以有效的避免液体流失,也能提高操作速度。(5)切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长(大于24小时):原因上不清楚,但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复,第二天加抗体进行免疫组化染色,如果将装有切片和修复液的容器放在4?C冰箱过夜,对结果无明显影响,如果放在室温,特别是炎热的夏天,会出现背景着色,因此,不可存放时间太长。(6)一抗变质、质量差的多克隆抗体:注意抗体的有效期,过期的抗体要麽不显色要麽背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。

最近开始做TUNEL染色,第一次按罗氏protocol做的,阴性对照是没有显色的。没做阳性对照。第二次、第三次做出来背景都很深,肾小管每个细胞核上都染上了棕黄色,DAB染色很快,几秒就变一片黄。具体步骤是:1烤片脱蜡至水2.蛋白酶K20ug/ML37℃10分钟3.tunel液冰上配置后加组织上,37度1h。4.pod液37℃30min5.DAB显色。在蚂蚁淘中检索后,优化了实验条件,在蛋白酶K前加了3%H2O2封闭10min,缩短了tunel液至40min。这是第三次的结果大家帮我看看

这是对照组

这是模型组

单靠免疫组化的方法是不能定量,定性的。

Bone Mesenchymal Stem Cells 作为一个细胞群体,还没有发现有特定细胞表面marker. 对于那些可以代表自我更新和分化的marker, 也不清楚到底要发现哪一个的表达才能确定该细胞就是BMSC。

目前常用的方法,就是采用培养,colony-forming unit-fibroblasts (CFU-F)这个方法。一般BMSC可以24-48小时贴壁。

流式细胞计数,比如STRO-1,但是一般认为STRO-1阳性的细胞更趋向于造血干细胞,和BMSC简单区别还不是很清楚。

这里有个培养分化的产品
http://www.rndsystems.com/pdf/SC020.pdf
免疫组化超详细步骤 123
能忍自安2017-10-02
我要做泛素在昆虫体内在病毒感染前后表达的区别,准备使用免疫组化的方法,可是我是个新手,查资料来说也是比较乱,说的很多方法,有没有人推荐一个简单实用的方法!说的具体一点,通俗一点!谢谢!
简单来说,就是用不同的试剂来染色标记组织,根据反应和显色情况,判断组织细胞的表面抗原、细胞内物质的成分,以明确病理改变、病理类型,协助诊断和治疗。这个东西会用到很多的试剂盒,所以相对来说会比较贵。