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RayBiotech/Custom Human Calreticulin-2 IQELISA™ Kit/1 Plate Kit/IQH-CALR2-1
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RayBiotech/Custom Human Calreticulin-2 IQELISA™ Kit/1 Plate Kit/IQH-CALR2-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
IQH-CALR2-1
美元价:
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数    量:
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4000-520-616

Antigen Information

Accession Number:
  • Q96L12
Gene ID:
  • 125972
Gene Symbols:
  • CALR3
  • CRT2
Protein Name & Synonyms:
Calreticulin-3 (Calreticulin-2) (Calsperin)
Target Species:
  • Human

Assay Format

Sensitivity:
Typically 10x lower than traditional ELISA
Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Culture Supernatants
  • Plasma
  • Serum
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
qPCR
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit
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Introduction

The RayBio® Immuno Quantitative Enzyme Linked ImumunoSorbent Assay (IQELISA™) is an innovative new assay that combines the specificity and ease of use of an ELISA with the sensitivity of real-time PCR. This results in an assay that is simultaneously familiar and cutting edge and enables the use of lower sample volumes while also providing more sensitivity. The RayBio® Custom Human Calreticulin-2 IQELISA™ Kit is a modified ELISA assay with high sensitivity qPCR readout for the quantitative measurement of Human Calreticulin-2 in serum, plasma, and cell culture supernatants. This assay employs an antibody specific for Human Calreticulin-2 coated on a 96-well PCR plate. Standards and samples are pipetted into the wells and Calreticulin-2 present in a sample is bound to the wells by the immobilized antibody. The wells are washed and a detection affinity molecule is added to the plates. After washing away unbound detection affinity molecule, primers and a PCR master mix are added to the wells and data is collected using qPCR. Ct values obtained from the qPCR are then used to calculate the amount of antigen contained in each sample, where lower Ct values indicate a higher concentration of antigen.

Typical Data

Application Notes

Kit Components
  • Calreticulin-2 Microplate (Item A): 96 well PCR plate coated with anti-Human Calreticulin-2
  • Wash Buffer I Concentrate (20x) (Item B): 25 ml of 20x concentrated solution
  • Standards (Item C): 2 vials of recombinant Human Calreticulin-2
  • Assay Diluent A (Item D): 30 ml diluent buffer, 0.09% sodium azide as preservative. For Standard/Sample (serum/plasma) diluent
  • Assay Diluent B (Item E): 15 ml of 5x concentrated buffer. For Standard/Sample (cell culture medium/urine) diluent
  • Detection Affinity Reagent for Calreticulin-2 (Item F): 2 vials of a 4x concentrated solution of anti-Human Calreticulin-2 affinity reagent
  • IQELISA™ Detection Reagent (Item G): 1.4ml of a 10x concentrated stock
  • Primer Solution (Item I): 1.7 ml vial
  • PCR Master Mix (Item J): 1.2 ml vial
  • PCR Preparation buffer (Item K): 1ml vial of 10x concentrated buffer
  • Final Wash Buffer (Item L): 10ml vial of 10x concentrated buffer
Other Materials Required
  • Real-time PCR instrument, Bio-Rad recommended
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
  • Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
  • 100 ml and 1 liter graduated cylinders
  • Absorbent paper
  • Distilled or deionized water
  • Log-log graph paper or computer and software for data analysis
  • Tubes to prepare standard or sample dilutions
  • Heating block or water bath capable of 80°C
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents, samples and standards as instructed
  2. Add 25µl standard or sample to each well. Incubate for 2.5 hours at room temperature or overnight at 4°C
  3. Add 25 µl detection affinity reagent to each well. Incubate 1 hour at room temperature
  4. Add 25µL of IQELISA™ Detection Reagent to each well. Incubate 1 hour
  5. Add 15µL Primer solution 10µL of PCR master mix to each well
  6. Run real-time PCR

Storage/Stability

May be stored for up to 6 months at 2° to 8°C from the date of shipment. Standard (recombinant protein) should be stored at -20°C or -80°C (recommended at -80°C) after reconstitution. Opened PCR plate or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Note: the kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles.

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食品安全快速检测是近些年来一个热门放,想请教各位国内外生物公司有哪些在这方面开发上做的抗原抗体很好的?主要有氯霉素,孔雀石绿,硝基呋喃,喹诺酮,磺胺类,真真菌毒素类。
相关疾病:乙型肝炎慢性乙型肝炎男性,30岁。四年前乙肝六项示1.3.5阳性,肝功能重度损害,启用替比夫定抗乙肝病毒。三年前复查乙肝六项示1.5阳性。后持续抗病毒治疗至今,肝功能持续正常,乙肝病毒dna持续低于检测下限,乙肝六项仍为......
如何获得高质量的抗体123
moxiao47552017-09-29
来自世界各地的100多名研究人员共同发出了一项倡议,这有可能从根本上改变鉴定研究用抗体的方式。相关文章发表在2月5日的《自然》(Nature)杂志上。
  洛斯阿拉莫斯国家实验室(Los Alamos National Laboratory)研究员Andrew Bradbury说:“我们提出,就像基因一样,抗体也应由它们的序列来定义,并且它们应该是在细胞系中重组生成。”
  根据编码各种亚基的序列来参考每次检测所用的抗体,它们的浓度和标准化实验缓冲液,可以让全世界的研究人员能够在相同条件下使用具有相同亲和力的抗体。
  一种抗体或结合试剂的序列,是该试剂的最终“条形码”,其确保了每个人都能够使用相同的试剂来检测同一目标。导出这一条形码涉及到从体外文库中挑选出一些抗体,或是克隆及测序来自杂交瘤的抗体基因等工作。这将要求对抗体供应的模式作出重大的改变。
  抗体是可以帮助机体识别与中和细菌、以及对免疫系统发起的其他攻击的一类特殊蛋白质,科学家们一直利用它们来作为特异的结合试剂。抗体质量控制和精确识别是那些有着序列测定和重组表达需求的研究者们一直努力寻求解决的问题。Bradbury指出,不同于基因、寡核苷酸、质粒、重组蛋白等,抗体是生物学研究中唯一没有在序列水平上进行定义的广泛应用试剂。
  研究人员注意到,所有抗体的质量因制造商不同而存在巨大的差异,大多数抗体很少进行验证,批次间差异极为常见。
  并且,批量产品附带的证明文件质量同样差异巨大;甚至提供的证明文件往往并不对应提供的批次。
  “为了杜绝由于缺乏验证和鉴定所造成的对材料、研究人员时间以及金钱的巨大浪费,必须要根据它们的序列来定义抗体,并且要在标准条件下进行重新生产,”作者们指出。这里的“重新”生产是指采用一些不涉及动物免疫的方法来从头生成抗体或其他结合试剂,而非基于免疫接种生成的克隆抗体。
  例如,多克隆抗体的生产是通过将一种蛋白质注射到动物体内,然后提取出响应这一免疫蛋白动物血液中生成并携带着的抗体。各种各样的抗体并非高精度,只有0.5-5%的产物是想得到的抗体,可对初始目标产生反应。其余的都是原本存在于动物血流中的抗体,表明了动物以往的免疫应激。漫无目的地收获如此多错误的抗体,使得生成了一些特异性较差的抗体,由此造成了研究领域的浪费。
  “我们建议,借助一种体外方法来生成抗体,这样根本不需要使用动物,重要的是还将直接生成具有已知序列的分子,”Bradbury说。
这个解释起来可能比较费劲了,说一大堆估计都会把我们两个都说晕,简单的说就是抗原这东西吧,你可以理解为其他东西来刺激身体,然后身体想办法保护自己就产生了抗体这么个东西来中和抗原达到自我保护的作用!希望这样你能够明白!
1、抗原:是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。抗原的基本特性有两种,一是诱导免疫应答的能力,也就是免疫原性,二是与免疫应答的产物发生反应,也就是抗原性。

2、抗体:是指机体的免疫糸统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。灵长类动物主要有四种免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、和IgE,而免疫血清检查主要检测IgG和IgM抗体。
三种抗原可诱生相应的“抗体”,分别是表面抗体(抗HBs)、核心抗体(抗HBc)和e抗体(抗HBe)。本是三对抗原抗体,为什么医院通常验血是查“两对半”呢?原因是在外周血液中无游离的核心抗原,如要测出体内有无核心抗原,则需用较复杂的技术,而一般实验室不做此项检测,三对中少了这一项,故称“两对半”。 表面抗原阳性,是人体已被乙肝病毒入侵的信息,一般是乙肝病毒现存感染的标志。体内有乙肝病毒当然可以产生表面抗原,但是,即使人体内没有完整的乙肝病毒,只要乙肝病毒核酸的片断整合到肝细胞内,就可以产生表面抗原。此种病人虽然血中表面抗原阳性,但体内没有完整的乙肝病毒,故无传染性。因此,单从表面抗原阳性本身不能判断病人有无传染性,需要结合其他检验来分析。 分析有无传染性比较常用的是检测e抗原、e抗体。e抗原是在乙肝病毒复制过程中产生的,因此e抗原阳性常表示人体内有乙肝病毒复制,提示有传染性。相应的是,e抗体阳性则表示乙肝病毒复制减少或停止,因而传染性亦较小。 核心抗体阳性表示有过乙肝病毒感染,其本身不能区别是现症感染或既往感染,核心抗体一旦出现则可在体内长期存在,持续数年至数十年。通俗所说的“大三阳”是指表面抗原、e抗原、核心抗体阳性;“小三阳”是表面抗原、e抗体、核心抗体阳性。对“大、小三阳”有一些看法是不正确的,应予纠正。 一是不能认为“小三阳”表示无传染性。有无传染性取决于病毒有无复制,血清e抗原阴性、e抗体阳性只是其中一项指标。血清中乙肝病毒核酸(HBVDNA)、核酸聚合酶(DNAP)和电镜下观察到乙肝病毒颗粒,以及免疫球蛋白M型核心抗体阳性等,均表示乙肝病毒复制,有传染性。 二是不要把“大、小三阳”与乙型肝炎病情等同起来。有人错误地认为“大三阳”就是肝炎严重,“小三阳”则肝炎较轻。目前认为人体感染病毒不一定患肝炎,乙肝病毒本身并不引起明显的肝细胞损伤。引起乙型肝炎主要取决于人体对乙肝病毒的免疫(抵抗)反应。免疫反应正常的人,能够消灭病毒而极少损害肝细胞;免疫反应过强(亢进)的人,虽然消灭病毒但对肝细胞破坏较大,可导致较重的肝炎;免疫反应低的人,消灭不了病毒,对肝细胞损害亦较轻,可发展为慢性肝炎;免疫反应更低(免疫耐受)的人,肝内可没有病变,但病毒长期存在于体内,成为无症状表面抗原携带者。也就是说,“大三阳”、“小三阳”者,可以是慢性肝炎、重症肝炎病人或无症状携带者。 乙肝表面抗原携带者的传染性可随着时间的推移而逐步下降,有研究表明在7年内约有半数e抗原阳性者会自然阴转,而表面抗原自然阴转率每年1%~2%。表面抗原携带者肝脏可完全正常,一部分亦可有病变,不要把无症状携带者按肝炎病人治疗,但由于有些人可能因身体抵抗力下降,免疫反应低而发生肝炎,故应定期进行体格检查及抽血化验。 “两对半”中还有一项是表面抗体,表面抗体阳性常说明曾经感染过乙肝病毒,但病毒已被清除,对乙肝病毒有了免疫力,不会再感染乙肝病毒。这种人常常还有核心抗体阳性,但不必因有核心抗体阳性而忧虑。注射乙肝疫苗后,90%接种者表面抗体阳性,说明已有免疫力。
一道题说一个医学教授不幸感染了SARS,他冒险把已痊愈的非典的病人的血清注射进自己体内,结果好了,这血清抗原还是抗体
男女都可以查吗?看了诊断学检验部分,没有提到女性可以查。可是为什么检验单有男女两套标准呢?
蛋白质的分子量很大,一般在一万以上。分子量越大,表面的抗原决定簇就越多,化学结构也较稳定;不易被机体破坏或排除,在体内停留时间也较长,有充分的机会与产生抗体的细胞接触,刺激机体产生免疫反应。相反,小分子物质很容易被排泄掉,与产生抗体的细胞的接触机会也少。血液蛋白的分子量超过60,000,是优良的抗原,卵白蛋白的分子量大于40,000,亦是良好的抗原。
不太懂啊,做免疫组化要用一抗二抗原理是什么呢
请免疫老师帮忙解答一下。
不胜感激

各位大神们:

本人在做ELISA(双抗体夹心)实验时,同一实验重复,4次,同样的条件,同样的试剂,只是每次实验的天数不一样,隔一天做一次。包被抗体(0.25ug/ml)、检测抗体(1ug/ml)和抗原(最高浓度为10ng/ml)的浓度都没有变,但检测结果却从1.4降到了0.8,又降到0.4,最后降到0.17(抗原最高浓度对应的OD值)。实在分析不出是什么原因,难道是抗原抗体保存的问题吗?

抗原抗体分装后一直保存在-20,用的时候才拿出来,用完放4度,没有反复冻融。但捕获抗体的最初浓度是86ug/ml,会不会是保存浓度太低?

请各位大神指教呀~

抗原有以下四类:
(1)异种抗原(xenoantigen)──来自另一物种的抗原。如微生物及其代谢产物、异种血清等。
(2)同种异型抗原(alloantigen)──来自同种系而基因类型不同的个体的抗原。如人类血型抗原 、主要组织相容性抗原等。
(3)自身抗原(autoantigen)──能引起自身免疫应答的自身组织成分。
(4)肿瘤抗原──细胞在癌变过程中出现的具有抗原性的一些大分子物质。
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