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+,IQH-CALR2-1, IQH-CALR2-2, IQH-CALR2-5, Q96L12, CALR3, CRT2, Calreticulin-3 (Calreticulin-2) (Calsperin), IQHCALR2蚂蚁淘商城
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RayBiotech/Custom Human Calreticulin-2 IQELISA™ Kit/1 Plate Kit/IQH-CALR2-1
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RayBiotech/Custom Human Calreticulin-2 IQELISA™ Kit/1 Plate Kit/IQH-CALR2-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
IQH-CALR2-1
美元价:
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数    量:
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4000-520-616

Antigen Information

Accession Number:
  • Q96L12
Gene ID:
  • 125972
Gene Symbols:
  • CALR3
  • CRT2
Protein Name & Synonyms:
Calreticulin-3 (Calreticulin-2) (Calsperin)
Target Species:
  • Human

Assay Format

Sensitivity:
Typically 10x lower than traditional ELISA
Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Culture Supernatants
  • Plasma
  • Serum
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
qPCR
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit
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Introduction

The RayBio® Immuno Quantitative Enzyme Linked ImumunoSorbent Assay (IQELISA™) is an innovative new assay that combines the specificity and ease of use of an ELISA with the sensitivity of real-time PCR. This results in an assay that is simultaneously familiar and cutting edge and enables the use of lower sample volumes while also providing more sensitivity. The RayBio® Custom Human Calreticulin-2 IQELISA™ Kit is a modified ELISA assay with high sensitivity qPCR readout for the quantitative measurement of Human Calreticulin-2 in serum, plasma, and cell culture supernatants. This assay employs an antibody specific for Human Calreticulin-2 coated on a 96-well PCR plate. Standards and samples are pipetted into the wells and Calreticulin-2 present in a sample is bound to the wells by the immobilized antibody. The wells are washed and a detection affinity molecule is added to the plates. After washing away unbound detection affinity molecule, primers and a PCR master mix are added to the wells and data is collected using qPCR. Ct values obtained from the qPCR are then used to calculate the amount of antigen contained in each sample, where lower Ct values indicate a higher concentration of antigen.

Typical Data

Application Notes

Kit Components
  • Calreticulin-2 Microplate (Item A): 96 well PCR plate coated with anti-Human Calreticulin-2
  • Wash Buffer I Concentrate (20x) (Item B): 25 ml of 20x concentrated solution
  • Standards (Item C): 2 vials of recombinant Human Calreticulin-2
  • Assay Diluent A (Item D): 30 ml diluent buffer, 0.09% sodium azide as preservative. For Standard/Sample (serum/plasma) diluent
  • Assay Diluent B (Item E): 15 ml of 5x concentrated buffer. For Standard/Sample (cell culture medium/urine) diluent
  • Detection Affinity Reagent for Calreticulin-2 (Item F): 2 vials of a 4x concentrated solution of anti-Human Calreticulin-2 affinity reagent
  • IQELISA™ Detection Reagent (Item G): 1.4ml of a 10x concentrated stock
  • Primer Solution (Item I): 1.7 ml vial
  • PCR Master Mix (Item J): 1.2 ml vial
  • PCR Preparation buffer (Item K): 1ml vial of 10x concentrated buffer
  • Final Wash Buffer (Item L): 10ml vial of 10x concentrated buffer
Other Materials Required
  • Real-time PCR instrument, Bio-Rad recommended
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
  • Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
  • 100 ml and 1 liter graduated cylinders
  • Absorbent paper
  • Distilled or deionized water
  • Log-log graph paper or computer and software for data analysis
  • Tubes to prepare standard or sample dilutions
  • Heating block or water bath capable of 80°C
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents, samples and standards as instructed
  2. Add 25µl standard or sample to each well. Incubate for 2.5 hours at room temperature or overnight at 4°C
  3. Add 25 µl detection affinity reagent to each well. Incubate 1 hour at room temperature
  4. Add 25µL of IQELISA™ Detection Reagent to each well. Incubate 1 hour
  5. Add 15µL Primer solution 10µL of PCR master mix to each well
  6. Run real-time PCR

Storage/Stability

May be stored for up to 6 months at 2° to 8°C from the date of shipment. Standard (recombinant protein) should be stored at -20°C or -80°C (recommended at -80°C) after reconstitution. Opened PCR plate or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Note: the kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles.

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抗体: 机体在抗原物质刺激下,由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原抗体抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。因为最初有人用电泳证明血清中抗体活性在γ球蛋白部分,故曾把抗体统称为两种(γ)球蛋白。后来证明,抗体并不都在γ区;而且位于γ区的球蛋白,也不一定都具有抗体活性。1... 查看更多>
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三种抗原可诱生相应的“抗体”,分别是表面抗体(抗HBs)、核心抗体(抗HBc)和e抗体(抗HBe)。本是三对抗原抗体,为什么医院通常验血是查“两对半”呢?原因是在外周血液中无游离的核心抗原,如要测出体内有无核心抗原,则需用较复杂的技术,而一般实验室不做此项检测,三对中少了这一项,故称“两对半”。 表面抗原阳性,是人体已被乙肝病毒入侵的信息,一般是乙肝病毒现存感染的标志。体内有乙肝病毒当然可以产生表面抗原,但是,即使人体内没有完整的乙肝病毒,只要乙肝病毒核酸的片断整合到肝细胞内,就可以产生表面抗原。此种病人虽然血中表面抗原阳性,但体内没有完整的乙肝病毒,故无传染性。因此,单从表面抗原阳性本身不能判断病人有无传染性,需要结合其他检验来分析。 分析有无传染性比较常用的是检测e抗原、e抗体。e抗原是在乙肝病毒复制过程中产生的,因此e抗原阳性常表示人体内有乙肝病毒复制,提示有传染性。相应的是,e抗体阳性则表示乙肝病毒复制减少或停止,因而传染性亦较小。 核心抗体阳性表示有过乙肝病毒感染,其本身不能区别是现症感染或既往感染,核心抗体一旦出现则可在体内长期存在,持续数年至数十年。通俗所说的“大三阳”是指表面抗原、e抗原、核心抗体阳性;“小三阳”是表面抗原、e抗体、核心抗体阳性。对“大、小三阳”有一些看法是不正确的,应予纠正。 一是不能认为“小三阳”表示无传染性。有无传染性取决于病毒有无复制,血清e抗原阴性、e抗体阳性只是其中一项指标。血清中乙肝病毒核酸(HBVDNA)、核酸聚合酶(DNAP)和电镜下观察到乙肝病毒颗粒,以及免疫球蛋白M型核心抗体阳性等,均表示乙肝病毒复制,有传染性。 二是不要把“大、小三阳”与乙型肝炎病情等同起来。有人错误地认为“大三阳”就是肝炎严重,“小三阳”则肝炎较轻。目前认为人体感染病毒不一定患肝炎,乙肝病毒本身并不引起明显的肝细胞损伤。引起乙型肝炎主要取决于人体对乙肝病毒的免疫(抵抗)反应。免疫反应正常的人,能够消灭病毒而极少损害肝细胞;免疫反应过强(亢进)的人,虽然消灭病毒但对肝细胞破坏较大,可导致较重的肝炎;免疫反应低的人,消灭不了病毒,对肝细胞损害亦较轻,可发展为慢性肝炎;免疫反应更低(免疫耐受)的人,肝内可没有病变,但病毒长期存在于体内,成为无症状表面抗原携带者。也就是说,“大三阳”、“小三阳”者,可以是慢性肝炎、重症肝炎病人或无症状携带者。 乙肝表面抗原携带者的传染性可随着时间的推移而逐步下降,有研究表明在7年内约有半数e抗原阳性者会自然阴转,而表面抗原自然阴转率每年1%~2%。表面抗原携带者肝脏可完全正常,一部分亦可有病变,不要把无症状携带者按肝炎病人治疗,但由于有些人可能因身体抵抗力下降,免疫反应低而发生肝炎,故应定期进行体格检查及抽血化验。 “两对半”中还有一项是表面抗体,表面抗体阳性常说明曾经感染过乙肝病毒,但病毒已被清除,对乙肝病毒有了免疫力,不会再感染乙肝病毒。这种人常常还有核心抗体阳性,但不必因有核心抗体阳性而忧虑。注射乙肝疫苗后,90%接种者表面抗体阳性,说明已有免疫力。
乙肝表面抗原定量意义123
dxy_67bc8b2021-07-20
相关疾病:乙型肝炎慢性乙型肝炎今天轮转到感染科,一个出院的病人问我,这次的乙肝五项报告方式和之前不同,以前是都给出定量值,这次给出了一个范围(>299),姑且不谈此形成原因,但是让我思考了一下,乙肝表面抗原抗原定量有什么用呢,病人......
1、抗原:是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。抗原的基本特性有两种,一是诱导免疫应答的能力,也就是免疫原性,二是与免疫应答的产物发生反应,也就是抗原性。

2、抗体:是指机体的免疫糸统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。灵长类动物主要有四种免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、和IgE,而免疫血清检查主要检测IgG和IgM抗体。

外购的一个肿瘤标志物抗原蛋白,用来配制企业标准品(化学发光免疫分析),冻干上机后测值比冻干前测值要底3、4倍的原因?急求原因,谢谢各位大神

关于标签抗体最详细资料123
【笔记本】00412017-09-28
融合标签,如Flag、GST等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。其中Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白。
Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等,相应的Flag标签抗体也被广泛应用。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。Flag标签可以通过加入肠激酶处理去除,肠激酶专一识别该肽序列C末端的5个氨基酸残基。
Flag抗体可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。 融合标签根据其相对分子质量大小可以分为两大类:大的蛋白质分子和小的多肽片段。融合标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。利用 His标签可以建立一个基于融合蛋白的高效检测和纯化系统。
His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。 随着越来越多的新基因的发现,基因融合蛋白表达体系以其在新发现蛋白研究中的显著优势已得到广泛应用。其中GST标签体系具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。GST融合蛋白可被位点特异性蛋白酶裂解,从而除去GST蛋白。融合蛋白又是一个非常好的强免疫原,因此,很容易制备抗新蛋白的抗体。正是由于以上的优点,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用。
近年来在原核表达体系中,谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍。用GST融合表达系统表达外源基因时,对融合表达产物的检测和纯化非常重要,这里面就包括了GST标签抗体的应用。 常用的标签包括GFP、HA、Flag、His、GST等。其中绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein),简称GFP,这种蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。
GFP或其突变体EGFP等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。一般来说,GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。
GFP标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等,相应的GFP标签抗体也被广泛应用。 随着蛋白质组学的迅猛发展,重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等,可用于辅助目标蛋白的纯化,这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。在1985年开发出鼠抗c-myc标签抗体并被作为免疫化学试剂用于细胞生物学和蛋白质工程领域中。Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。
Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到二乙烯砜活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。Myc标签可放在C端或N端,但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。 融合标签,如HA、His等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。其中HA标签系统利用一个HA (influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。
HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白。向左转|向右转
首先为什么抗体抗原有联系??
抗体怎么形成的?
抗体是不是白细胞的一种?
T-cell和B-cell又是什么什么抗体?
答的好加分
抗体的多样性,由成千上万、多种多样的免疫球蛋白分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上,所呈现的各种不同的形式。
抗体(Antibody),又称免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称 Ig),是一种由B细胞分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。
抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链);2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种,重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中,不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于"Y"的两臂末端。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈,这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域称高变区。高变区位于分子表面,最多由17个氨基酸残基构成,少则只有2 —— 3个。高变区氨基酸序列决定了该抗体结合抗原抗原的特异性。一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的,位于两臂末端称抗原结合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部称结晶片段(crystalline fragment,FC),糖结合在FC 上。
抗原存在于人体内的位置并不固定。如果从皮肤入侵,可存在于皮下组织,可入侵细胞,可存于组织液,并经淋巴液入血液。抗原还可以消化系统和呼吸系统进入人体内。
另一类抗原是手术移植的器官,如异体移植的肾、肝或其他结构。因为这个器官并不是受植者本人的结构,会被人体免疫系统认为是入侵人体的抗原,并对其进行攻击,这就是所谓的排斥反应。
相关疾病:乙型肝炎乙肝前s1抗原阳性HBV-DNA一定阳性吗?如果前s1抗原阳性,HBV-DNA阴性是代表病毒变异吗?前s1抗原到底靠谱吗?
辅佐细胞可通过多种方法捕获抗原,例如吞噬作用(对同种细胞或细菌等大型颗粒)和胞饮作用(对病毒等微小颗粒或大分子)等。这种吞噬和吞饮作用无抗原特异性,可能的识别机制在于吞噬细胞与被吞噬颗粒之间的表面亲水性差异。另外还有受体介导的内摄作用,这是弱吞噬力的辅佐细胞捕获抗原的主要方式,例如B细胞可借助抗原受体(表面免疫球蛋白)与相应的抗原特异性结合,并将抗原内化处理。这些捕获方式与中性粒细胞的吞噬作用。抗原处理(antigenprocessing)是指辅佐细胞将天然抗原转变成可被TH细胞识别形式的过程;这一过程包括抗原变性、降解和修饰等。例如细菌在吞噬体内被溶菌酶消化降解,将有效的抗原肽段加以整理修饰,并将其与MHCⅡ类分子相连接,然后转运到细胞膜上。
可与MHCⅡ类分子结合的都是蛋白性抗原;多糖和脂类不易于MHCⅡ类分子连接,难以被TH细胞识别,因而多不是良好的免疫原;但有时可以诱导抗体性免疫应答。 抗原递呈(antigenpresentation)是辅佐细胞向辅助性T细胞展示抗原和MHCⅡ类分子的复合物,并使之与TCR结合的过程。这个过程是几乎所有淋巴细胞活化的必需步骤。抗原递呈之前,经处理后的抗原肽段已经连接在MHC分子顶端的槽中,这个复合物便是TCR的配体。TCR与配体结合的精确模式尚未清楚,一个合理的说法是TCR中α和β链的V段接触MHC分子的α螺旋(形成MHC分子顶端槽的肽段),使高可变的连接部(V-J及V-D-J)与抗原肽段相结合。这样保证了TCR识别抗原的特异性。
超抗原的递呈有独特的模式,它不需要胞内处理,可以直接与MHCⅡ类分子结合。超抗原不结合在MHCⅡ类分子的顶端槽中,而是结合在槽的外侧;与TCR结合时,不结合其α链,只结合β链的V节段。超抗原对TCR和MHCⅡ类分子的结合都非常牢固,象一支双向钩子将T细胞和辅佐细胞紧紧地连在一起,很容易使T细胞活化。另外,任何超抗原都只与含特殊β链V节段的TCR结合,这样的TCR约占外周T细胞总数的1%~10%,这一数字远远大于任何普通抗原所能识别的细胞数;所以某些产毒细胞感染时,容易发生急性期素休克综合征,就是超抗原刺激的结果。向左转|向右转
这个取决于是该厂家的那种抗体,以及抗体稀释后是做什么用的。

比如该厂家的WB抗体,如果是1mg/ml的抗体,一般做WB的时候要求抗体工作液的浓度是1ug/ml,也就是说1mg/ml的抗体是可以按照1:1000的比例进行稀释。当然,根据抗体亲和力不同,这个浓度也是可以变化的。所以abcam的WB抗体稀释浓度一般是1ug/ml
相关疾病:乙型肝炎记得教科书上说过,核心抗原血液中查不到,为什么最近看的别的医院的结果都是乙肝6项了,他们是用什么方法测的?是有什么新技术了吗?检出率高不高?总感觉是个噱头!
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