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제품특징
□ 농도 200 U/㎕
□ 형상
20 mM | Tris-HCl (pH7.8) | |
100 mM | NaCl | |
1 mM | EDTA | |
1 mM | DTT | |
50% | Glycerol(v/v) |
□ 보존 -20℃
□ 5× PrimeScript Buffer (cDNA 합성용)
250 mM | Tris-HCl (pH8.3) | |
375 mM | KCl | |
15 mM | MgCl2 |
□ 제품설명
본 제품은 M-MLV(Moloney Murine Leukemia Virus) 유래의 Reverse Transcriptase를 기반으로 하여 다카라가 독자적으로 개발한 신규 역전사 효소이다. 본 제품은 신장성이 매우 뛰어나 긴 cDNA를 합성할 수 있다. 또, GC rich 등과 같이 cDNA 합성이 어려운 RNA에 대해서도 RNA가 분해될 우려가 있는 고온에서의 반응은 필요로 하지 않으며, 표준 역전사 반응 온도(42℃)에서 효율적으로 cDNA를 합성할 수 있다. 본 효소는 긴 cDNA의 조제나 full length cDNA의 비율이 높은 library 제작에 최적이다.
□ PrimeScrip RTase 이용 42℃ 반응온도로, 백그라운드가 낮은 고품질의 cDNA 합성 가능
RNA Ladder (1~12kb)를 주형으로, PrimeScript 및 타사 RTase를 이용하여 역전사 반응.
□ 활성의 정의
Poly(rA)- oligo(dT)12-18 를 주형/프라이머로 하여 37℃, 10분간 1 nmol의 [3H]dTTP를 합성기질로 사용하는 것을 효소 활성
1U으로 한다.
□ 활성측정용 반응액 조성
50 mM | Tris-HCl (pH8.3) | |
75 mM | KCl | |
8 mM | MgCl2 | |
10 mM | DTT | |
20 ug/ml | (rA)n - (dT)12-18 | |
0.5 mM | [3H]dTTP | |
0.1% | NP-40 |
□ 1st-strand cDNA 합성시험
표준 실험법(프로토콜)에 따라 랫트 뇌 유래의 Total RNA 100 ng을 주형으로 하여 Oligo dT 프라이머 50 pmol 및 본 효소 200 units을 이용하여 42℃에서 60분간 1st-strand cDNA 합성 반응을 한다. 이 cDNA 반응액을 주형으로 PCR 하여 아가로즈 겔에 전기 영동한 결과 12 kb의 size 위치에서 명확한 밴드를 확인하였다.
□ 순도
1. 200 U의 본 효소와 1㎍의 λDNA-Hind III 분해물을 37℃, 1시간 반응시켜도 DNA 전기 영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.2. 200 U의 본 효소와 1㎍의 supercoiled pBR322 DNA를 37℃, 1시간 반응시켜도 DNA 전기 영동 패턴에 변화가 일어나지
않는다.3. 200 U의 본 효소와 1㎍의 23S 및 16S rRNA 혼합물을 37℃, 1시간 반응시켜도 RNA 전기 영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.
□ 용도
- 1st-strand cDNA 합성- cDNA probe 조제- RT- PCR
□ 정확도가 매우 높은 역전사효소
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1.抗原性是指抗原与其所诱导产生的抗体或致敏淋巴细胞特异性结合的能力。抗原性的强弱与抗原分子的大小、化学成分、抗原决定簇的结构、抗原与被免疫动物亲缘关系的远近等有密切关系。通常认为抗原的分子量愈大、化学组成愈复杂、立体结构愈完整以及与被免疫动物的亲缘关系愈远,则抗原性愈强。
2.免疫原性是指能够刺激机体形成特异抗体或致敏淋巴细胞的能力。即指抗原能刺激特定的免疫细胞,使免疫细胞活化、增殖、分化,最终产生免疫效应物质抗体和致敏淋巴细胞的特性。也指抗原刺激机体后,机体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。
可与MHCⅡ类分子结合的都是蛋白性抗原;多糖和脂类不易于MHCⅡ类分子连接,难以被TH细胞识别,因而多不是良好的免疫原;但有时可以诱导抗体性免疫应答。 抗原递呈(antigenpresentation)是辅佐细胞向辅助性T细胞展示抗原和MHCⅡ类分子的复合物,并使之与TCR结合的过程。这个过程是几乎所有淋巴细胞活化的必需步骤。抗原递呈之前,经处理后的抗原肽段已经连接在MHC分子顶端的槽中,这个复合物便是TCR的配体。TCR与配体结合的精确模式尚未清楚,一个合理的说法是TCR中α和β链的V段接触MHC分子的α螺旋(形成MHC分子顶端槽的肽段),使高可变的连接部(V-J及V-D-J)与抗原肽段相结合。这样保证了TCR识别抗原的特异性。
超抗原的递呈有独特的模式,它不需要胞内处理,可以直接与MHCⅡ类分子结合。超抗原不结合在MHCⅡ类分子的顶端槽中,而是结合在槽的外侧;与TCR结合时,不结合其α链,只结合β链的V节段。超抗原对TCR和MHCⅡ类分子的结合都非常牢固,象一支双向钩子将T细胞和辅佐细胞紧紧地连在一起,很容易使T细胞活化。另外,任何超抗原都只与含特殊β链V节段的TCR结合,这样的TCR约占外周T细胞总数的1%~10%,这一数字远远大于任何普通抗原所能识别的细胞数;所以某些产毒细胞感染时,容易发生急性期素休克综合征,就是超抗原刺激的结果。向左转|向右转
我们自身的细胞,蛋白也是抗原,但是自体在正常情况下没有针对自身的抗体。抗体产生的过程很复杂,我简单说一下:抗体由B细胞产生。本质是蛋白质。B细胞在成熟的过程中,编码抗体抗原识别区的那段基因会发生随机组合,这样就有可能会产生无数种抗体。但是如果一个B细胞产生了针对自身的抗体,那这个细胞就会和抚养它的细胞发生过于紧密的接触,被杀死。如果一个B细胞产生的抗体还不能识别任何抗原,那它就得不到足够的生长刺激,所以也不能存活。最后成熟的免疫细胞只占很小一部分。只有那些可以识别外源抗体的B细胞才能得到刺激,大量增殖。然后体内的抗体就增高了。
所以你的最后一句话不对。并不是人人都可以对任何抗原产生抗体的。比如青霉素过敏,过敏的人就是因为体内有针对青霉素的抗体IgE。而其他人就没有抗体。

