Description
Protein S Polyclonal Antibody – HRP Conjugated – Sheep
Affinity’s Protein S Polyclonal Antibody – HRP Conjugated – Sheep is the base level of our horseradish peroxidase conjugated Protein S antibodies. The purity of IgG is typically 90% and is provided in a solution of HEPES buffered saline containing 50% glycerol (v/v). The titre is essentially the same as the starting antiserum and each vial typically contains the amount of IgG recovered from one milliliter of antiserum however this IgG has been conjugated with Horseradish Peroxidase as an enzyme reporter. This Protein S Polyclonal Antibody – HRP Conjugated – Sheep is generally intended for use as labeled primary antibodies in applications such as immunoassay and immunoblotting.
Product Code: SAPS-HRP
Retail Product Size: 0.2mg vial
Host Animal: Sheep Anti-Human Protein S Polyclonal Antibody – HRP Conjugated – Sheep
Species Cross Reactivity: View Chart
Product Datasheet: Protein S PS Polyclonal Antibody, hrp conjugated anti-human sheep IgG
Description of Protein S
Protein S is a vitamin K-dependent glycoprotein produced in the liver, endothelium and megakaryocytes. The concentration of PS in plasma is ~25 μg/ml (~325 nM) where it acts as a cofactor in the anticoagulant activity of activated Protein C. A deficiency of Protein S (quantitative or qualitative) is a risk factor for vascular thrombosis. Protein S is expressed as a single chain molecule with a molecular weight of 77 kDa. The structure of PS is similar to many other vitamin-K dependent coagulation proteins, consisting of an N-terminal calcium binding domain of 10 γ-carboxyglutamic acid (gla) residues, followed by a thrombin-sensitive loop region and 4 EGF-like domains. The C-terminal domain does not contain the usual catalytic triad of a proenzyme, but seems instead to be involved in the binding of PS to C4b-binding protein (C4bp). Protein S binds to activated Protein C (APC) in the presence of calcium and negatively charged phospholipid surface to allow APC to proteolytically inactivate coagulation cofactors Va and VIIIa. Enzymatic regulation of PS cofactor activity is through cleavage of PS in the thrombin-sensitive loop region by thrombin or other enzymes, resulting in the loss of calcium binding properties and APC cofactor activity. Another regulatory mechanism is to reduce the availability of PS by the binding of PS to C4bp. In plasma, approximately 60% of Protein S circulates in non-covalent complex with C4bp, making it unavailable for APC cofactor activity. The binding of PS to C4bp may be important in localizing C4bp to damaged cell membranes where it may control activation of complement by the classical pathway1-3.
References and Review
- Broze GJ, Miletich JP; Biochemistry and Physiology of Protein C, Protein S and Thrombomodulin; in Hemostasis and Thrombosis, 3rd Edition, eds. RW Colman, J Hirsh, VJ Marder and EW Salzman, pp 259-276, J.B. Lippincott Co., Philadelphia PA, USA, 1994.
- Comp PC, Doray D, Patton D, Esmon CT; An Abnormal Plasma Distribution of Protein S Occurs in Functional Protein S Deficiency. Blood 67, pp 504-508, 1986.
- Schwalbe RA, Dahlback B, Nelsestuen GL; Independent Association of Serum Amyloid P Component, Protein S and Complement C4b with C4b-binding Protein and Subsequent Association of the Complex with Membranes; JBC 265, pp 21749-21757, 1990.
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比如该厂家的WB抗体,如果是1mg/ml的抗体,一般做WB的时候要求抗体工作液的浓度是1ug/ml,也就是说1mg/ml的抗体是可以按照1:1000的比例进行稀释。当然,根据抗体亲和力不同,这个浓度也是可以变化的。所以abcam的WB抗体稀释浓度一般是1ug/ml
Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等,相应的Flag标签抗体也被广泛应用。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。Flag标签可以通过加入肠激酶处理去除,肠激酶专一识别该肽序列C末端的5个氨基酸残基。
Flag抗体可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。 融合标签根据其相对分子质量大小可以分为两大类:大的蛋白质分子和小的多肽片段。融合标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。利用 His标签可以建立一个基于融合蛋白的高效检测和纯化系统。
His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。 随着越来越多的新基因的发现,基因融合蛋白表达体系以其在新发现蛋白研究中的显著优势已得到广泛应用。其中GST标签体系具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。GST融合蛋白可被位点特异性蛋白酶裂解,从而除去GST蛋白。融合蛋白又是一个非常好的强免疫原,因此,很容易制备抗新蛋白的抗体。正是由于以上的优点,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用。
近年来在原核表达体系中,谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍。用GST融合表达系统表达外源基因时,对融合表达产物的检测和纯化非常重要,这里面就包括了GST标签抗体的应用。 常用的标签包括GFP、HA、Flag、His、GST等。其中绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein),简称GFP,这种蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。
GFP或其突变体EGFP等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。一般来说,GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。
GFP标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等,相应的GFP标签抗体也被广泛应用。 随着蛋白质组学的迅猛发展,重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等,可用于辅助目标蛋白的纯化,这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。在1985年开发出鼠抗c-myc标签抗体并被作为免疫化学试剂用于细胞生物学和蛋白质工程领域中。Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。
Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到二乙烯砜活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。Myc标签可放在C端或N端,但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。 融合标签,如HA、His等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。其中HA标签系统利用一个HA (influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。
HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白。向左转|向右转
二是使病菌产生抗药性:当不该使用抗生素的时候使用抗生素,可以使一些病菌逐渐产生对抗生素的抵抗力,即抗药性,一旦确定必须使用抗生素时,就不得不加大剂量才能有效,甚至加大剂量也无效。
三是毒性反应:如链霉菌对前庭与耳蜗神经的损害,可出现眩晕、平衡失调、耳鸣、听力减退、耳聋等;氯霉菌对骨髓的毒性,抑制骨髓造血机能,可致白细胞及血小板减少,严重可引起再生障碍性贫血;四环素、红霉素酯化剂、二性梅素B、灰黄酶素等都能损害肝脏,造成肝功能不全或原有肝损加重;庆大酶素、卡那酶素、新酶素、巴龙酶素、先锋酶素等对肾脏可有较大损害。
四是过敏反应:如常用的青酶素其发生率约为百分之一到百分之八,轻者有关节痛、淋巴结肿大、发热等,较重者发生血管神经性水肿、脑水肿或喉头水肿,最严重的为过敏性休克,如不及时抢救将会死亡。
抗生素的上述危害,除过敏反应外,其余均具有渐进性、累积性,病人自己很难察觉,因此易发生危险。因此,患者应在医生指导下使用抗生素,以免受到更大的伤害。
抗体(Antibody),又称免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称 Ig),是一种由B细胞分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。
抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链);2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种,重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中,不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于"Y"的两臂末端。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈,这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域称高变区。高变区位于分子表面,最多由17个氨基酸残基构成,少则只有2 —— 3个。高变区氨基酸序列决定了该抗体结合抗原抗原的特异性。一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的,位于两臂末端称抗原结合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部称结晶片段(crystalline fragment,FC),糖结合在FC 上。
抗体是人免疫功能自身产生的。当人体感染某种病毒的时候,人体免疫功能自动针对该病毒产生抵制其生存的病毒抗体或抑制病毒的生长 复制 并最终将该病毒杀死。
与同种型相对应的是同种异型和独特型。
【T。SDM】
免疫荧光(IF)
IHC-P=Immunohistochemistry (Paraffin)
IHC-F=Immunohistochemistry (Frozen)
p代表石蜡切片
f代表冰冻切片
二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。
二抗可以耦联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。
抗体特异性 产品。