如何选择实验抗体

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如何选择实验抗体

2021-08-01

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武汉博欧特生物

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1. 一抗选择（1）确定抗体的名字，注意中英文名字、别名、亚型等信息。（2）确定您的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，或者是FACS。每种抗体说明书都会列出抗体经验证过适用的实验类型，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种实验验证。（3）确定实验样本的种属，Human，Mouse，Rat等。我们的抗体说明书都列出该抗体验证过的适用物种，可根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。（4）样本抗原蛋白的结构性质。了解样本抗原蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性，蛋白空间构象的改变，会影响抗体的免疫亲和反应。（5）单多克隆抗体的选择。一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。2. 二抗选择（1）种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。（2）标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。免疫组化，WB二抗主要选择HRP，Biotin标记的二抗，而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗，如FITC、Cy3、PE等。

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wei是43

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