羊抗小鼠IgG-RBITC
CDR移植即把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内,所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体,也就是人源化抗体。
全合成法是以人抗体序列为骨架,以鼠抗体的CDR置换人抗体的CDR,将整个可变区序列的两条链分解成若干片段,并使相邻的片段具有彼此互补的粘性末端。合成所有DNA片段,每组片段分别退火,然后逐组连接成完整的可变区基因,插入质粒中,进一步即可用于构建和表达改形抗体。
DR序列合成几种突变引物,用定点突变的方法将人的可变区基因的CDR序列变为鼠抗体的CDR序列,然后表达出改型抗体。
研究表明,在构建改形抗体时,简单地进行CDR替换并不能保证抗体具有好的亲和力,因此在构建时还必需包括对影响抗原结合位点的空间结构的框架序列进行操作。
小分子抗体包括Fab、Fv或ScFv、单域抗体及zui小识别单位等几种。
小分子抗体有很多优点:
可以用细菌发酵生产,成本低;
分子小,穿透力强;
不含Fc,没有Fc带来的效应;
在体内循环的半衰期短,易清除,利于解毒排出;
易于与毒素或酶基因连接,便于直接获得免疫毒素或酶标抗体等。
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