easYmer HLA-A*03:01 MHC Tetramers Kit
easYmer HLA-A*03:01 MHC Tetramers Kit Developed and Manufactured by immunAware
Materials Included
The easYmer kit contains a peptide receptive preparation of HLA, a folding buffer, a positive control peptide for HLA-complex folding. The exact identities of these components are given below:
- easYmer: HLA-A*03:01 – peptide receptive and biotinylated HLA-A*03:01 molecules in Tris/Maleate pH7 with 30% Glycerol
- Folding Buffer: Tris/Maleate pH7
- Peptide: YF NS5 286-295 (KSEYMTSWFY), a known HLA-A*03:01 binder. Positive control for evaluation analysis of peptide-HLA folding
for Research Use Only
Available Sizes:
- 20 Tests (Sample-size)
- 50 Tests (Standard Size)
- 150 Tests
- 500 Tests
Key Benefits of easYmer® MHC Tetramers
- Ready-to-use
- One step loading
- Completely flexible and customizable*
- Biotinylated
- No special equipment needed
- Long shelf-life
*For Custom Tetramer Production, please Contact Us for more information
Assay Principle
This protocol is designed to evaluate the efficiency of peptide-HLA-I interaction and complex formation. The assay is based on detecting the ß2-microglobulin (ß2m? light chain subunit of recombinant HLA Class I (HLA-I) comlexes, where the heavy chain has been biotin tagged. These tagged complexes are subsequently captured by streptavidin coated beads, labeled with PE-conjugated anti-human ß2m, and analyzed by flow cytometry. Since peptide-HLA-I complex formation is entirely peptide dependent, bead-associated signals will only be detected if the peptide in question supports the folding of the HLA-I allotype of interest; peptides that efficiently support folding will give strong signals whereas peptides that support folding sub-optimally, or not at all, will give moderate to non-detectable signals.
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也就是说只要是兔子产生的抗体,羊抗兔(也叫抗抗体或者2抗)都可与之结合。
兔子产生的是一级抗体
羊的为二级抗体
在试验中,二抗经常被做了手脚,打上了标记,比如辣根过氧化物酶,经常被用在ELISA,WESTERN等经典的生物学试验中。
【过敏性咳嗽血清学IGE检查】
以过敏患者血清作为实验材料的本外试验方法称为血清学试验。其它体液如炎症部位分泌物、渗出物、灌洗液也可采用相同的实验方法进行检测。主要检测项目有总IgE和特异性IgE,即过敏原特异性IgE。
【什么是总IgE?】
IgE即免疫球蛋白E,是I型变态反应病如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、异位性皮炎、湿疹、急慢性荨麻疹发病机制中起主要作用的免疫分子,因而在过敏反应的免疫学实验诊断中是首选的检测项目。总IgE是过敏性疾病的特异性检查项目,IgE水平增高提示I型变态反应病的可能性大,但不能用于判断过敏原。
【IgE的特点】
IgE是血清浓度最低的免疫球蛋白 ,只有血清中IgG浓度的万分之一。IgE对热不稳定,是半衰期最短一的免疫球蛋白 ,只有2.8天,与细胞表面结合的IgE半衰期稍长,8~14天,IgE由变应原入侵部位(鼻咽、支气管、胃肠道)的黏膜固有层中的浆细胞合成。在各类免疫球蛋白中,IgE是合成率最低、分解率最高的。属于亲细胞抗体,过敏体质者的胎儿脐带血中IgE浓度可能升高,检测脐血中IgE浓度可用于评估胎儿过敏体质的可能性。
【IgE检测方法】
通常用ELISA方法检测总IgE。由于血清IgE浓度很低,一般酶免疫试验方法的敏感性不足以检出血清IgE,现在常规实验室检测血清IgE的试剂盒采用生物素——抗生物素蛋白 放大的ELISA。试剂盒中所含用于制定标准曲线的IgE标准品和检测结果的IgE浓度单位与其它免疫球蛋白 不同,不是用mg/L表示,而是用u/ml或ku/l表示。
【IgE的正常值(参考范围)】:
血清IgE水平在正常人群中呈偏态分布,即多数人为0或接近于0,IgE水平越高的人数越少。因此计算平均值时应计算几何平均值才能反映其真实情况,即用对数转换后其分布才能近似正态分布。
健康人群血清IgE水平与年龄关系较大,小儿和老年人的IgE水平低于成年人。新生儿血清中IgE水平很低,接近于零。随年龄增长,IgE水平也不断升高,5~7岁后接近正常人水平。按Pharmacia公司提供的参考范围,1个月以内<12KU/L,1岁<11KU/L,2~4岁<33KU/L,5岁以上至成人<85KU/L.
过敏性疾病患者的血清IgE水平可达2000~8000KU/L,当IgE水平高于2000KU/L时应考虑寄生虫感染.
有时血清总IgE水平检测结果为0或参考范围内低值,并不能排除过敏性疾病的可能,须结合临床表现和血清特异性IgE检测结果进行判断.
【什么是特异性IgE检测(sIgE)?】
通常所称的过敏原检测,并非真正检测血液样本中的过敏原分子,而是间接地检测其中针对某种过敏原的特异性IgE分子,特异性IgE检测实际上是检测过敏原特异性IgE,即检测样本中针对某种变应原的特异性IgE,从而间接地判断患者是否对某种过敏原过敏。
环境中常见的过敏原包括以下类别:
寄生虫和微生物:各种螨类(屋尘螨和粉尘螨等)、各种真菌(点青霉、烟曲霉、分枝孢霉、交连孢霉等)、蟑螂。
植物花粉:各种草花粉(豚草、葎草、蒿草)、各种树花粉(桑树、柏树、悬铃木、桦树、榆树、柳树、杨树等)。
动物皮毛:猫、狗、马、鸽子等动物的毛和皮屑。

