
Overview:
UBA1 or ubiquitin-like modifier activating enzyme 1 is an E1 enzyme that initiates the activation and conjugation of ubiquitin-like proteins and catalyzes the first step in ubiquitin conjugation to mark cellular proteins for degradation (1). UBE1 is able to transfer ubiquitin to a wide range of E2 substrates. UBA1 protein may participate in DNA topoisomerase-2 activity (2). UBA1 complements an X-linked mouse temperature-sensitive defect in DNA synthesis, and thus may function in DNA repair.
References:
1. Jin, J.et.al: Dual E1 activation systems for ubiquitin differentially regulate E2 enzyme charging. Nature 447: 1135-1138, 2007.2. Zacksenhaus, E.et.al: Identification of human gene complementing ts A1S9 mouse L-cell defect in DNA replication following DNA-mediated gene transfer. Somat. Cell Molec. Genet. 14: 371-379, 1988.
ebiomall.com






>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
不知道能不能直接买到大鼠抗豚鼠血管IgG的ELISA试剂盒。
如果买不到这种试剂盒,用空白板的话(就是反应孔中没有抗原或者抗体包被),把自制的豚鼠血管抗原加到反应孔中进行孵育,能不能使抗原附着在孔壁上?这样的话就可以按照elisa的操作步骤进行大鼠血清检测了。
目前的设想是自制抗原,粉碎豚鼠的血管,制成悬液,通过反复多次的冻融,离心后收集上清液作为抗原(即豚鼠血管抗原)。
然后将抗原加入到elisa的反应孔中(这种是特制的空白板,就是反应孔中没有抗原或抗体包被)进行孵育,使豚鼠血管抗原附着在孔壁上,就是让反应孔充当固相载体,形成固相抗原。倒掉多余的抗原。
再加入待检测的大鼠血清,这样血清中的特异性抗豚鼠血管IgG就可以跟固相的抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。
加入酶标的兔抗鼠或者羊抗鼠IgG,形成酶标的抗原抗体复合物。
然后就是一些显色步骤。
现在关键的问题就是抗原加入空白板,能不能形成固相抗原,如果不能跟孔壁附着的话,在后面洗涤的过程中就被洗掉了,那就没办法完成检测了。
请各位大侠给指条明路啊!!!小弟在此多谢了!!!
多谢!

