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曲梓枫
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脂蛋白分离纯化一、分离脂蛋白血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。二、脱脂由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。1.Warnick等法将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(-20℃)的丙酮:无水乙醇(1:1,V/V)混合液中,脱脂液的量为样品的20倍,不断搅拌,然后在-20℃冰箱放置过夜,4℃离心沉淀,将沉淀重复脱脂一次,用氮气吹干或真空干燥,脱脂物0℃贮存待用。2.Scanu等法将脂蛋白加入到预冷的(-15℃)无水乙醇:无水乙醚(3:2)混合液中,不断搅拌,以12h过夜,在-10℃或4℃离心(2000r/min),去上清留沉淀,再重复脱脂一次。用N2或真空干燥,0℃贮存待用。
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