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发布人 shmily李发布时间 2021-08-18

发布人 qweqwe21322 发布时间 2021-08-17

用镍柱镍柱分离纯化固定金属离子亲和柱主要用于金属螯化离子。位于许多蛋白中的组氨酸残基将会和许多金属离子，例如锌。铜，镍，铁等形成复合物。因此，该柱料能选择性螯合一些具有组氨酸残基的蛋白质。但是半胱氨酸和咯氨酸残基也能和固定化金属螯和。但是亲和力比组氨酸要弱。所以，结合的强度是和缓冲液的PH和金属离子决定的。金属螯和柱料主要是由亚氨基的乙酰乙酸成分耦联琼脂糖柱料，借助醚长生7个原子的空间。全部容量：24-30um的含有zn的干胶柱料结构：6%的高铰链的琼脂糖柱料大小：45-165um平均微粒：90...

蛋白质的分离纯化方法

发布人哲宇丶0196 发布时间 2021-08-16

一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮,将乳糜粒吸出,留其余液体备用. 3. 血清蛋白分离：除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白质.

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发布人匈婐发布时间 2021-08-15

就是血清里面的蛋白A高出了正常的比例。也就是说原本那个东西100才对的而你那个已经是110了。

白鳥健次歌曲大全_白鳥健次最新歌曲_九酷音乐

发布人少司命AU07PP36 发布时间 2021-08-14

抗体纯化分了几种类型，根据用途决定选择哪种方法进行纯化：1. 粗纯：将制备抗体的血清或是腹水，细胞上清，直接用盐析法进行处理，这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉，获得蛋白的成分，但是由于是粗纯，里面会混有大量的其他蛋白，这样获得的抗体，纯度较低，用于实验中背景比较高。2.通用型纯化：用抗体结合蛋白Protein A，Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同，所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体，则多半使用pr...

抗体亲和纯化洗脱液的应用

发布人 hbgaoyifu 发布时间 2021-08-13

各位老师好，最近在做多克隆抗体亲和纯化，但洗脱液中不仅含有目的抗体，还含有兔血清白蛋白，不知道是什么原因。用的GE的CNBr-activatedSepharose™4FastFlow填料。实验步骤如下：1.将抗原偶联至beads上2PBS平衡10个柱体积3上样（0.45um过滤的兔血清）4淋洗10个柱体积，淋洗buffer：pH8.0Tris5洗脱7.5个柱体积，洗脱缓冲液：pH3.0PBS请各位老师不吝赐教，谢谢

【求助】请大家帮我分析一下蛋白发生沉淀的原因

发布人 bt20001_ren 发布时间 2021-08-12

家兔免疫我用的是Histag的重组蛋白纯化时准备用GSTtag的重组蛋白，蛋白是一样的以前实验室也有人做过前面的表达、纯化和透析的时候都好好的当我把透析好的蛋白跟处理过的CNBr活化的Sepharose4B混合4度旋转过夜后，第二天下午就发现有沉淀。拿沉淀跑了胶，就是我得重组蛋白另外，透析和过夜是我用的溶液都是纯化时用的PH8.3的结合缓冲液不知道是什么原因。为什么好好的蛋白一跟Sepharose旋转过夜就会有沉淀呢

一文教你如何保存纯化后的蛋白质?

发布人 Scomilo7 发布时间 2021-08-11

保存方法如下：　　1.以沉淀形式保存在高浓度的硫酸铵中。　　2.添加50%甘油冷冻，尤其适用于酶类。　　3.如果样品要用于生物学检测，避免使用防腐剂。在体内实验中不能添加防腐剂，而应当将样品分装成小份冷冻。　　4.可使用无菌滤器以延长保存时间。　　5.添加稳定剂，如甘油（5-20%）、血清白蛋白（10mg/ml）、配基（浓度取决于活性蛋白的浓度）以帮助维持生物活性。　　6.避免反复冻融或冻干重溶解过程，这样很可能会降低生物活性。　　7.一些冷沉淀蛋白会在4度沉淀出来，包括一些小鼠IgG3亚族的抗...

【求助】蛋白分子量与预期不符经验共享分析测试百科

发布人 aaeryuelan 发布时间 2021-08-10

用大肠杆菌表达纯化的蛋白，和人血清中这种蛋白的分子量不同，western显示血清中这种蛋白的分子量高于纯化的蛋白，请问各位这是为什么呢？如何解释呢？

血清免疫球蛋白G的分离纯化及鉴定

发布人断鸭鸭发布时间 2021-08-09

血清免疫蛋白的纯化为什么要检测柱子流出的液体是否有铵根

【求助】纯化蛋白

发布人 catzp 发布时间 2021-08-08

各位大虾，我想问春花出来的蛋白如果用来打兔子制作一抗，那么变性纯化的蛋白用不用复性？我的蛋白是用Ni柱纯化，其中含有尿素和咪唑，这些用不用除去在进行注射呢？谢谢各位

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