Volume: Purified: 100 µL; Purified Trial: 20 µL; TC Supernatant: 5 mL
Concentration: Purified: 1 mg/mL; TC Supernatant: Lot Specific
Clonality: Monoclonal
Form: Purified and TC Supernatant Available (select your preferred form, size and quantity before clicking "Add to Cart")
Host Species: Mouse
Immunogen: Fusion protein amino acids 428-499(cytoplasmic C-terminus) of rat Kv1.2 (accession number P63142), Epitope mapped to within amino acids 463-480Human: 100% identityMouse: 100% identity
Target Description: Kv1.2 K+ channel (Potassium voltage-gated channel subfamily A member 2), which is encoded by KCNA2 gene, is part of the Potassium voltage-gated channel family. Kv1.2 K+ channel switches between its open and closed conformation in response to the voltage difference across the membrane, which selectively allows the traffic of K+. Kv1.2 K+ channel determines potassium ion permeability of excitable membranes according to their electrochemical gradient. Therefore, this protein has for function to regulate neurotransmitter release, neuronal excitability, smooth muscle contraction, heart muscle contraction or insulin secretion. Kv1.2 is recognized as a tansmembrane/ multi-pass membrane protein. Anti-Kv1.2 K+ channel K14/16 is often used in IHC on human normal cerebral cortex.
Gene ID: KCNA2
Antibody Registry ID (RRID): AB_2296313
Physical State: Liquid
Validation and Application Notes
Molecular Weight: 80 kDa
NOTE
Aves Labs products are intended for use as research laboratory reagents. They are not intended for use as diagnostic or therapeutic reagents in humans.
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AvesLabs是一家成立于上世纪九十年代，专注于高亲和性鸡源抗体的研发和准备，生物医药和生命科学行业全球*的鸡多克隆抗体(IgY)及定制抗体/多肽/免疫试剂的专业公司。AvesLabs在鸡源神经系统标志蛋白/抗体研究领域拥有独特优势，不仅品种多样，质量优良，而且适用于人/大小鼠等多个物种的神经系统研究，包括神经元/胶质细胞/雪旺细胞的各亚细胞结构免疫双标/免疫共沉淀研究。公司独有的技术及优质抗体产品有助于全球科研人员更为便捷的解决学术研究及应用研发课题。除了丰富的产品线外，AvesLabs还为客户提供优质的抗体定制服务，您只需要提供需要研究的重组蛋白或合成多肽，我们即可为您生产优质的鸡源多克隆抗体。
神经元标志蛋白抗体该系列产品主要用于神经元细胞的各亚细胞结构研究，可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标，反应性包括人、小鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下，部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗APP3/APP345/APP4/APP5/ABN/TUJ/CAT/DCX/ER1/ER2/ER3/ER5/GAD/GAP43/MAP/NET/NUN/NSE/NFH/NFL/NFM/PER/PRN/PAP/STG/TAU/TYH的抗体。除单独的抗体提供，我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒，以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
胶质细胞及雪旺细胞标志蛋白抗体该系列产品主要用于胶质细胞及雪旺细胞的各亚细胞结构的研究，可与可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标，反应性包括人、大鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下，部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗COR/GFAP/MAC/MBP/NES/PZO/PLP/VIM抗体。同样，除单独的抗体提供，我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒，以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
二抗该系列产品特点在于鸡IgY分子与哺乳动物IgG分子截然不同，因此由之制备的二抗不与来源于兔、小鼠或其他哺乳动物的一抗产生交叉反应，特别适用于组织学的免疫双标检测。该系列源于羊的二抗可交联荧光基团/HRP/生物素/琼脂糖，可广泛用于WB，免疫组化/免疫细胞化学及免疫共沉淀研究。
mmunoprecipitationReagents(IP)该系列产品中 HA-PrecipHen® 由鸡anti-HAepitopetag抗体共价结合到琼脂糖粒而成，适用于利用HAepitope-tagged蛋白的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。而IgY-PrecipHen®由羊抗鸡的IgY抗体共价结合到琼脂糖粒上而成，适用于鸡源抗体与目标蛋白之间的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。
对高度保守的哺乳动物基因产物有更高的描述由于鸡与哺乳动物的距离至少有1亿年之久，它们倾向于将哺乳动物的任何基因产物视为外来物，并产生强烈的免疫反应。简单双疣状鸡IgYs可以与小鼠和兔抗体一起使用，没有交叉反应的危险。针对鸡igy的二级抗体不会与哺乳动物igg发生交叉反应。友好型我们从鸡蛋中纯化抗体，而不是血清。与此相反，在兔实验中，通过抑制动物，进行耳出血或心脏穿刺来获得血清。这只是一种更人道的产生抗体的方法。成本效益和更持久的我们的鸡用抗体是>90%IgY，在4度完美呈现5年以上保质期。相比之下，多数公司提供的rabbitserum(兔乳)在4˚C (完美呈现)(以周至月为单位)的货架期非常有限，而且一旦冷冻，一些生物活性会丧失。将兔抗体纯化至相应纯度的成本。蛋白质a纯化)是非常昂贵的。几乎无限量我们从每只母鸡那里收集了大约18个“免疫鸡蛋”，但是只使用了6个“免疫鸡蛋”来准备你的IgY准备。然后我们把剩下的12个“免疫鸡蛋”储存在冰箱里，以备将来你需要更多的抗体。此外，我们可以继续为母鸡提供住宿(另收费)，以备您需要我们进行额外的注射。鸡IgY的茎部没有“Fc结构域”这提供了几个优势比兔igg:它减少了在诊断应用中出现假阳性的可能性，因为是哺乳动物的Fc域结合“类风湿因子”或其他自然产生的抗Fc抗体。不激活哺乳动物补体系统，允许鸡IgYs在体内应用。不与哺乳动物Fc受体结合，避免与表达此类受体的细胞(如巨噬细胞和树突状细胞)发生非特异性结合。
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盐析 ——用于各种蛋白质酶离纯化；
蛋白质溶液加入量性盐破坏蛋白质胶体稳定性使其析种称盐析用性盐硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等各种蛋白质盐析所需盐浓度及pH同故用于混蛋白质组离例用半饱硫酸铵沉淀血清球蛋白饱硫酸铵使血清白蛋白、球蛋白都沉淀盐析沉淀蛋白质经透析除盐仍保证蛋白质性调节蛋白质溶液pH至等电点再用盐析则蛋白质沉淀效更盐析两类第类叫Ks段盐析定PH温度通改变离强度实现用于早期粗提液；第二种叫b段盐析定离强度通改变PH温度实现用于期进步离纯化结晶影响盐析素包括：蛋白质浓度、离强度类型、PH值、温度等针温度条需要强调：低离强度或纯水蛋白质溶解度定范围内随温度增加增加高浓度蛋白质、酶肽类物质溶解度随温度升降般情况蛋白质盐析温度特殊要求室温进行某些温度比较敏酶要求0-4℃进行
使用硫酸铵沉淀蛋白需要注意：硫酸铵含少量重金属离蛋白质巯基敏作用使用前必须用H2S处理：硫酸铵配浓溶液通入H2S饱放置夜用滤纸除重金属离浓缩结晶100℃烘干使用另外高浓度硫酸铵溶液般呈酸性（PH=5.0左右）使用前需要用氨水或硫酸调节至所需PH
机溶剂沉淀 ——用于物、糖及核酸产品离纯化；
机溶剂沉淀机理降低水介电数导致具表面水层物脱水相互聚集析该优点于：1）辨能力比盐析高即蛋白质或其溶剂比较窄机溶剂浓度沉淀；2）沉淀用脱盐滤较容易；3）化制备应用比盐析广泛温机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性例酒精消毒灭菌操作要求低温进行机溶剂选择首先能水混溶使用较机溶剂乙醇、甲醇、丙酮二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈2-甲基-2,4戊二醇等
等电点沉淀 ——单独应用较少与其结合使用；
两性电解质净电荷零溶解度低同两性电解质具同等电点基础进行离工业产胰岛素粗提液先调PH8.0除碱性蛋白质再调PH3.0除酸性蛋白质利用等电点除杂蛋白必须解制备物酸碱稳定性盲目使用十危险少蛋白质与金属离结合等电点发偏移故溶液含金属离必须注意调整PH值等电点与盐析、机溶剂沉淀或其沉淀联合使用提高其沉淀能力
重金属盐沉淀 ——用于抢救误服重金属盐毒病；
许机物质包括蛋白内碱性溶液带负电荷能与金属离形沉淀根据机物与间作用机制羧酸、胺及杂环等含氮化合物类铜锌镉；亲羧酸疏含氮化合物类钙镁铅；亲硫氢基化合物类汞银铅蛋白质-金属离复合物重要性质溶解度溶液介电数非敏调整水溶液介电数（加入机溶剂）即沉淀种蛋白沉淀条件pH稍于等电点宜重金属沉淀蛋白质变性若低温条件并控制重金属离浓度用于离制备变性蛋白质临床利用蛋白质能与重金属盐结合种性质抢救误服重金属盐毒病给病口服量蛋白质用催吐剂结合重金属盐呕吐解毒
1. 血细胞与血清分离：
取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).
2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心
梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮,将乳糜粒吸出,留其余液体备用.
3. 血清蛋白分离：除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白质.
5000rpm 10°C离心1h,密度梯度离心
梯度.液配置：管容量1/3为血清,2/3为1.31g/ml,NaCl+NaBr,搅拌后终密度为1.21g/ml .管上部1/6容积为血清脂蛋白,下部5/6为其它蛋白.
4.取2ml下部5/6血清于小试管中,加0.9％氯化钠溶液2.0ml,边搅拌混匀边缓慢滴加饱和硫酸铵溶液乙4.0ml,加入PBS洗脱液2ml,混匀后于室温中放置10min,此步骤可重复1～2次
3000rpm 离心5min.沉淀物即是ǐ-球蛋白.
二.凝胶层析提纯血清ǐ-球蛋白(1)装柱：海绵垫装入玻璃柱底端,作为柱底支持物,装入定量的蒸馏水(约为柱体积的1/5),以避免胶粒直接冲击柱底支持物;用玻璃棒小心排除柱底支持物.将密实洗净的层析柱保持垂直位置,关闭出口,柱内留下约2.0ml洗脱液.边搅拌凝胶,边向柱内缓慢,连续,均匀地加入凝胶,(打开柱底端的螺旋夹)不要中断,使胶粒均匀沉降,以免胶面一次性将疑胶从塑料接口加入层析柱内,打开柱底部出口,调节流速0.3ml/min.凝腔随柱内溶液慢慢流下而均匀沉降到层析柱底部倾斜和发生断层;检查装好的凝胶柱用眼观察有无凝胶分层.沟流和气泡现象.最后使凝胶床达20厘米高,床面上保持有洗脱液,操作过程中注意不能让凝胶床表面露出液面并防止层析床内出现“纹路”.用缓冲液平衡凝胶柱,流速控制在3-5s/滴.(2)上样与洗脱：小心控制凝胶柱下端活塞,使柱上的缓冲液面刚好下降至凝胶床表面,关紧下端出口,用长滴管吸取盐析法制备的球蛋白混合样品,将装有上样液的滴管头插入床面以上1-2cm处,小心缓慢地贴壁加到凝胶床表面.柱上样量控制在柱体积的2%-5%.打开下端出口,将流速控制在0.25ml/min使样品进入凝胶床内.关闭出口,小心加入少量0.0175mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.3)洗柱内壁.打开下端出口,待缓冲液进入凝胶床后再加少量缓冲液.如此重复三次,以洗净内壁上的样品溶液.然后可加入适量缓冲液开始洗脱.加样开始应立即收集洗脱液.洗脱时接通蠕动泵,流速为0.5ml/min,用部分收集器收集,每管1ml.(3)洗脱液中NH4+与蛋白质的检查：取比色板两个(其中一个为黑色背底),按洗脱液的顺序每管取一滴,分别滴入比色板中,前者加双缩脲2滴,出现蓝色混浊即示有蛋白质析出,由此可估计蛋白质在洗脱各管中的分布及浓度；于另一比色板中,加人奈氏试剂l滴,以观察NH4+出现的情况. 合并球蛋白含量高的各管,混匀.除留少量作电泳鉴定外,其余用DEAE纤维素阴离子交换柱进一步纯化.三．纯化――DEAE纤维素阴离子交换层析用DEAE纤维素装柱约8-10cm高度,并用0.0175mol／L磷酸盐缓冲液(pH6.3)平衡,然后将脱盐后的球蛋白溶液缓慢加于DEAE纤维素阴离子交换柱上,用同一缓冲液洗脱、分管收集.用20％磺基水杨酸溶液检查蛋白质分布情况.(装柱、上样、洗脱,收集及蛋白质检查等操作步骤同凝胶层析).四．浓缩经DEAE纤维素阴离于交换柱纯化的γ－球蛋白液往往浓度较低.为便于鉴定,常需浓缩.收集较浓的纯化的γ－球蛋白溶液2m1,按每ml加0.2～ 0.25gSephadex G一25干胶,摇动2～3min, 3000r／min 离心5min.上清液即为浓缩的γ-球蛋白溶液.五. 乙酸纤维素薄膜电泳鉴定ǐ-球蛋白(一)仪器与薄膜的准备1.醋酸纤维素薄膜的润洗与选择用竹夹子取一片薄膜,小心地平放在盛有缓冲液的平皿中,若漂浮于液面的薄膜在15—30s内迅速润湿,整条薄膜色泽深浅一致,则此膜均匀可用于电泳；若薄膜润湿缓慢,色泽深浅不一或有条纹及斑点等,则表示薄膜厚薄不均匀应弃去,以免影响电泳结果.将选好的薄膜用竹子轻压,使其完全浸泡于缓冲液中约30min后,方可用于电泳.
2.电泳槽的准备根据电泳槽膜支架的宽度,剪裁尺寸合适的滤纸条.在两个电极槽中,各倒入等体积的电极缓冲液,在电泳槽的两个膜支架上,各放两层滤纸条,使滤纸一端的长边与支架前沿对齐,另一端浸入电极缓冲液内.当滤纸条全部润湿后,用玻璃棒轻轻挤压在膜支架上的滤纸以驱赶气泡,使滤纸的一端能紧贴在膜支架上.滤纸条是两个电极槽联系醋酸纤维素薄膜的桥梁,因而称为滤纸桥.
3.电极槽的平衡用平衡装置(或自制平衡管)连接两个电泳槽,使两个电极槽内的缓冲液彼此处于同一水平状态,一般需平衡15——20min.注意,取出平衡装置时应将活塞关紧.
(二)点样
1.制备点样模板取一张干净滤纸(10×10cm),在距纸边1.5cm处用铅笔划一平行线,此线为点样标志区.
2.点样用竹夹子取出浸透的薄膜,夹在两层滤纸间以吸去多余的缓冲液.无光泽面向上平放在点样模板上,使其底边与模板底边对齐.点样区距阴极端1.5cm处.点样时,先用玻璃棒或血色素吸管取2—3��L血清,均匀涂在加样器上,再将点样器轻轻印在点样区内,使血清完全渗透至薄膜内,形成一定宽度、粗细均匀的直线.此步是实验的关键,点样前应在滤纸上反复练习,掌握点样技术后再正式点样.
(三).电泳用竹夹子将点样端的薄膜平贴在阴极电泳槽支架的滤纸桥上(点样面朝下),另一端平贴在阳极端支架上,要求薄膜紧贴滤纸桥并绷直,中间不能下垂.如一电泳槽中同时安放几张薄膜,则薄膜之间应相隔几毫米.盖上电泳槽盖,使薄膜平衡10min.用导线将电泳槽的正、负极与电泳仪的正、负极分别连接,注意不要接错.在室温下电泳,打开电源开关,用电泳仪上细调节旋扭调到每厘米膜宽电流强度为0.3mA(8片薄膜则为4.8mA).通电10—15min后,将电流调节到每厘米膜宽电流强度为0.5mA(8片共8 mA),电泳时间约50—80min.电泳后调节旋扭使电流为零,关闭电泳仪切断电源.
(四).染色与漂洗
1.血清蛋白染色与漂洗脱色用解剖镊子取出电泳后的薄膜,放在含0.5%氨基黑10B染色液的培养皿中,浸染5min,取出后再用漂洗液浸洗脱色,每隔10min 换漂洗液一次,连续数次,直至背景蓝色脱尽.取出薄膜放在滤纸上,用吹风机的冷风将薄膜吹干.
(五)透明将脱色吹干后的薄膜浸入透明甲液中2min,立即放入透明乙液中浸泡1min,取出后立即紧贴于干净玻璃板上,两者间不能有气泡,约2—3min薄膜完全透明.若透明太慢可用滴管取透明乙液少许在薄膜表面淋洗一次,垂直放置待其自然干燥,或用吹风机冷风吹干且无酸味.再将玻璃板放在流动的自来水下冲洗,当薄膜完全润湿后用单面刀片撬开薄膜的一角,用手轻轻将透明的薄膜取下,用滤纸吸干所有的水分,最后将薄膜置液体石蜡中浸泡3min,再用滤纸吸干液体石蜡,压平.此薄膜透明,区带着色清晰,可用于光吸收计扫描.长期保存不褪色.
(六)结果判断与定量血清蛋白电泳经蛋白染色后,可显示出区带,未经透明处理的电泳图谱可直接用于定量测定.可采用洗脱法或光吸收扫描法,测定各蛋白组分相对百分含
1. 粗纯：将制备抗体的血清或是腹水，细胞上清，直接用盐析法进行处理，这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉，获得蛋白的成分，但是由于是粗纯，里面会混有大量的其他蛋白，这样获得的抗体，纯度较低，用于实验中背景比较高。
2.通用型纯化：用抗体结合蛋白Protein A，Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同，所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体，则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后，溶液中基本只保留了抗体的成分，其他蛋白都去掉了，抗体纯度可以比较高。相对来说，这种方法是大规模抗体制备中，用得最多的纯化方法，很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化：但是有些抗体，需要纯度特别高，特异性特别好，就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱，再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了，特异性最好。当然，由于牵涉到抗原固定等操作，成本相应是最高的。
55KDa与24KDa目的条带处的目的条带为什么成“小草”一样，旁边没有mark的话就没有条带，有mark就出现“小草”样的条带，请各位大神答疑解难？感激不尽
1. 粗纯：将制备抗体的血清或是腹水，细胞上清，直接用盐析法进行处理，这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉，获得蛋白的成分，但是由于是粗纯，里面会混有大量的其他蛋白，这样获得的抗体，纯度较低，用于实验中背景比较高。
2.通用型纯化：用抗体结合蛋白Protein A，Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同，所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体，则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后，溶液中基本只保留了抗体的成分，其他蛋白都去掉了，抗体纯度可以比较高。相对来说，这种方法是大规模抗体制备中，用得最多的纯化方法，很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化：但是有些抗体，需要纯度特别高，特异性特别好，就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱，再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了，特异性最好。当然，由于牵涉到抗原固定等操作，成本相应是最高的。
