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Cygnus technologies/Anti-A549 HCP (A549-AF)/1 mg/A549-AF
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Affinity-purified goat anti-A549 HCP

Product Information

Product Type:
Antibody
Conjugate:
Unconjugated
Purification:
Affinity Purified
Storage:
Short Term: 2°C to 8°C
Target Expression System:
A549
Species Group:
Mammalian
Species:
Human
Host Species:
Goat

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NON-HAZARDOUS ANTIBODIES SDS

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血清蛋白质是各种蛋白的复杂混合物。可利用不同的方法将其分离。血浆中的白蛋白、a1、a2、β球蛋白,纤维蛋白原,凝血酶原和其它凝血因子等均由肝细胞合成。γ球蛋白主要来自浆细胞。当肝脏发生病变时,肝细胞合成蛋白质的功能减退,血浆中蛋白质即会发生质和量的变化。临床上用各种方法检... 查看更多>
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蛋白质的分离纯化方法很多,主要有:(一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析  中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加 查看更多>
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丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。2,免疫沉淀法:得有特异性抗体!3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度 查看更多>
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我要测小鼠血清中游离氨基酸的组分和含量,但是前提就是要去除干净血清中的蛋白质。想问问通过什么方法能够去除干净呢》要简便的方法。上机前最后的步骤好像是加入磺基水杨酸。
【求助】纯化蛋白123
catzp2021-08-08
各位大虾,我想问春花出来的蛋白如果用来打兔子制作一抗,那么变性纯化的蛋白用不用复性?我的蛋白是用Ni柱纯化,其中含有尿素和咪唑,这些用不用除去在进行注射呢?
谢谢各位
我认为应该采取静脉注射的方法将该蛋白加入实验鼠中.以防止蛋白进入消化道中被消化.其他条件相同情况下再一个对照组,观察小鼠的变化.
动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,具有不同基因的B淋巴细胞合成不同的抗体.当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞.被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞(浆细胞)和记忆B细胞,大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中.如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆.单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体. 简介 1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点.将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆.利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能.这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的. 这项新技术从根本上解决了在抗体制备中长期存在的特异性和可重复性问题,可用于探讨①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位.因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景. 2制备过程 1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程. 一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射. 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞. 2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液. 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇.在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞. 3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基.在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死亡. 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡. 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖. 4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化.通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养.采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增.经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存. 5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法. (1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理.1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞.杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体.约1-2周,可见小鼠腹部膨大.用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体. (2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养.在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体.但这种方法产生的抗体量有限.各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量.
血清总蛋白质的测定方法 123
WANGHAIXINNA2018-01-28
血清中蛋白质含量是多少,要看清是人血清中蛋白质含量?
非常急!
我有些问题向各位请教:
①在用超滤白蛋白,IgG中硫酸铵盐时,膜包该如何选择?选择几个?
②如用凝胶过滤来分级纯化血清中65%硫酸铵盐析出的白蛋白和纯化33%硫酸铵盐析出的IgG,其填充介质应选择什么?其洗脱缓冲液应用什么好?

下面有些关于这方面的数据,供参考:
①牛血清白蛋白:分子量:66210;分子形状:椭圆形;分子大小:
40Å*140Å;等电点:4.7;血浆中的含量:52.0g/L。
②IgG:分子量:15300;分子形状:球状;等电点:5.8—7.3;血浆中含量:2.0g/L。
③另外,我从书上看到说:凝胶过滤在分级方法中分辨率为中等,但对脱盐效果优良;流速较低,对分级每周期约≥8小时,对脱盐仅30分钟;适用于大规模纯化的最后步骤,在纯化过程的任何阶段均可进行脱盐处理,尤其适用于两种缓冲液交替时。
期待您的帮助,谢谢您。
血清白蛋白 123
泽速浪0058162021-08-05
血清白蛋白,即Serum albumin,常缩写为ALB。血清白蛋白合成于肝脏,是脊椎动物血浆中含量最丰富的蛋白质。向左转|向右转
问个小小白的问题:
样本是经过磁珠纯化过的血清蛋白,用MALDI-TOF-MS仪器得到质谱图。请教下:
1.每个峰都是一个纯的蛋白?
2.根据m/z能匹配蛋白的名称不?
用大肠杆菌表达纯化的蛋白,和人血清中这种蛋白的分子量不同,western显示血清中这种蛋白的分子量高于纯化的蛋白,请问各位这是为什么呢?如何解释呢?
家兔免疫我用的是Histag的重组蛋白
纯化时准备用GSTtag的重组蛋白,蛋白是一样的
以前实验室也有人做过

前面的表达、纯化和透析的时候都好好的
当我把透析好的蛋白跟处理过的CNBr活化的Sepharose4B混合4度旋转过夜后,第二天下午就发现有沉淀。拿沉淀跑了胶,就是我得重组蛋白
另外,透析和过夜是我用的溶液都是纯化时用的PH8.3的结合缓冲液

不知道是什么原因。为什么好好的蛋白一跟Sepharose旋转过夜就会有沉淀呢
我所分离的血清中含有较多的血红蛋白,我是通过辛酸-硫酸铵沉淀和high-Q离子层析,在通过辛酸-硫酸铵之后的沉淀还是红色的,不知道能不能过离子交换柱,会不会堵死,或者有什么方法把血红蛋白除去,请高手指教,谢谢大家了
血清脂蛋白有三种

(一)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)
【参考值】

0.94~2.0mmol/L
【临床意义】

降低具有临床意义。HDL-C与TG呈负相关系,见于冠心病、动脉粥样硬化、糖尿病、肝脏损害、肾病综合征。

(二)低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)
【参考值】

沉淀法:2.07~3.12mmol/L,3.15~3.61mmol/L为边缘升高,≥3.64mmol/L为升高。
【临床意义】

升高具有临床意义。LDL-C升高与冠心病发病呈正相关系。

(三)脂蛋白(a),LP(a)
【参考值】 <300mg/L
【临床意义】

脂蛋白(a)升高已作为冠心病及脑血管疾病发病的独立危险因素。
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