Product Specifications:
Item# 2009: Recombinant HIV-2 (Rod) gp36 Envelope Protein (E.coli)
Concentration: See vial
Mass/vial: 0.1mg
Volume/vial: 0.1ml
Diluent: 10 mM Tris, pH 8.0, SDS (<0.01%)
Purity: >98%
Stabilizer: None
Preservative: None
Storage: -75°C
Physical State: Frozen Liquid
Stability: At least 24 months at -75°C.
Application: Human Diagnostics, Immunization,T-Cell Activation.
Description: Truncated Recombinant HIV-2 envelope protein gp36 produced as a fusion protein in the E.coli Expression System
Molecular Weight: 28kD
Purification: This protein is purified by affinity chromatography and by preparative electrophoresis to >98% purity as determined by SDS-PAGE, reduced.
Specificity: This protein binds to murine anti-gp36 HIV-2 monoclonal antibodies and HIV-2 converted human serum polyclonal antibodies in ELISA and Western ELISA.
Biological Activity: ND
Application and Instructions for use
Recommended concentrations for use are approximate values. A dose dependent response assay should be performed to determine the optimal concentration for use in specific applications. ELISA and Western ELISA require 10-100ng protein depending on the nature and affinity of the detection reagent. Human serum polyclonal antibodies yield titers of 1:1000 or greater at 100ng of immobilized protein under standard ELISA conditions.
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1. 粗纯:将制备抗体的血清或是腹水,细胞上清,直接用盐析法进行处理,这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉,获得蛋白的成分,但是由于是粗纯,里面会混有大量的其他蛋白,这样获得的抗体,纯度较低,用于实验中背景比较高。
2.通用型纯化:用抗体结合蛋白Protein A,Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同,所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体,则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后,溶液中基本只保留了抗体的成分,其他蛋白都去掉了,抗体纯度可以比较高。相对来说,这种方法是大规模抗体制备中,用得最多的纯化方法,很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化:但是有些抗体,需要纯度特别高,特异性特别好,就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱,再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了,特异性最好。当然,由于牵涉到抗原固定等操作,成本相应是最高的。
有机溶剂沉淀,极性有机溶剂降低介点常数使蛋白质凝集沉淀。eg.甲醇、乙醇、丙酮。
磺基水杨酸也可以沉淀蛋白质,但要加酸调节ph,使之低于血清蛋白的pi,使蛋白质带正电荷,与水杨酸酸根结合生成不溶盐而沉淀。
血清蛋白质均带负电荷,但各种蛋白质带负电荷的程度有所差异,以白蛋白为最多。而血清白蛋白等电点为4.7-4.9。所以把ph调到4.7以下就可以了。
1. 粗纯:将制备抗体的血清或是腹水,细胞上清,直接用盐析法进行处理,这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉,获得蛋白的成分,但是由于是粗纯,里面会混有大量的其他蛋白,这样获得的抗体,纯度较低,用于实验中背景比较高。
2.通用型纯化:用抗体结合蛋白Protein A,Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同,所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体,则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后,溶液中基本只保留了抗体的成分,其他蛋白都去掉了,抗体纯度可以比较高。相对来说,这种方法是大规模抗体制备中,用得最多的纯化方法,很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化:但是有些抗体,需要纯度特别高,特异性特别好,就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱,再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了,特异性最好。当然,由于牵涉到抗原固定等操作,成本相应是最高的。

