Storage and Rehydration: Store freeze-dried solid at 2-8°C. Rehydrate with the indicated volume of dH2O (see product specification sheet) and centrifuge if not clear. Prepare working dilution on day of use. Product is stable for about 6 weeks at 2-8°C as an undiluted liquid.Extended Storage after Rehydration: Aliquot and freeze at -70°C or below. Avoid repeated freezing and thawing. Alternatively, add an equal volume of glycerol (ACS grade or better) for a final concentration of 50%, and store at -20°C as a liquid. Expiration date: one year from date of rehydration. The expiration date may be extended if test results are acceptable for the intended use.
Purity:Based on immunoelectrophoresis at an antigen concentration of 20 mg/ml, the pattern of precipitation against goat anti-rat whole serum is the same as that against goat anti-rat IgG, Fc fragment specific.No precipitin line was detected against goat anti-rat IgA, a chain specific or goat anti-rat IgM, µ chain specific. Buffer: 0.01M Sodium Phosphate, 0.25M NaCl, pH 7.6 Stabilizer:15 mg/ml Bovine Serum Albumin (IgG-Free, Protease-Free) Preservative:0.05% Sodium Azide ConjugateAlexa Fluor® 647
Amax: 651Emax: 667nmAlexa Fluor® 647-conjugated antibodies absorb light maximally around 651 nm and fluoresce maximally around 667 nm. They are brighter than Cy5 and DyLight 650 in aqueous mounting media. Alexa Fluor® 647- and APC-conjugated secondary antibodies are the best choice for flow cytometry when secondary antibodies fluorescing at these wavelengths are desired. Alexa Fluor® 647 conjugates are the best choice of far red-emitting dyes for multiple-labeling detection with a confocal microscope.A significant advantage of using Alexa Fluor® 647 over lower wavelength-emitting dyes is the low autofluorescence of biological specimens in this region of the spectrum. However, because of its peak emission at 667 nm, Alexa Fluor® 647 cannot be seen well by eye, and it cannot be excited optimally with a mercury lamp. Therefore, Alexa Fluor® 647 is not recommended for use with conventional epifluorescent microscopes. It is most commonly visualized with a confocal microscope equipped with an appropriate laser for excitation and a far-red detector. Alexa Fluor® 647 conjugates are less expensive alternatives to allophycocyanin conjugates for flow cytometry.
Images & ReferencesThis product is for in vitro research use only. It is not a medical device and it is not intended for diagnostic or therapeutic purposes.
This product is provided under an agreement between Life Technologies Corporation and Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc, and the manufacture, use, sale or import of this product is sold pursuant to a license from Life Technologies Corporation for use of its fluorescent dye technology. The sale of this product is expressly conditioned on the buyer not using the product or its components (1) in manufacturing; (2) to provide a service, information, or data to an unaffiliated third party for payment; (3) for therapeutic, diagnostic or prophylactic purposes; (4) to resell, sell or otherwise transfer this product or its components to any third party, or for any other commercial purposes. For information on purchasing a license to this product for purposes other than research, contact Life Technologies Corporation, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, CA 92008 or outlicensing@lifetech.com.

Jackson总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特,距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学,蛋白质化学,微生物学,免疫学及产品开发实验研究。我们的目标是为世界各地的研究者能最大选择的提供最高质量的科学试剂以及最棒的技术支持和售后服务。蚂蚁淘向您提醒的是,Jackson产品仅用于研究,不用于诊断或治疗用途。作为美国著名的各种二抗生产公司之一,Jackson在全世界各国设有几十家代理。由于其产品效价高、种类全、价格低廉,因而成为全球各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的首选。其产品主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)、金标试剂等。
Jackson二抗产品选购简介
为便于客户选购Jackson公司的各种二抗,特将选购时的注意事项摘译如下:
JacksonImmunoResearch的抗体产品线完全,有全球最大的二抗产品库,能提供多种应用类型和需要的二抗产品,其二抗产品本身也具有极高的产品质量和稳定性。以上述产品为例,其HRP酶标山羊抗小鼠二抗,WB实验的应用稀释比率为1:10000-1:200000,也就是说,购买的2ml二抗,实际应用时相当于20L-400L的最终使用液。另外,一次购买大包装,避免了不同批次之前的差异,降低了实验条件本身的误差。作为多家著名品牌的代理商,蚂蚁淘根据国内科研的现实需求,为客户选择最具性价比的二抗及血清产品免疫学解决方案。如果您对Jackson的产品感兴趣,请致电027-84454412到蚂蚁淘科技有限公司问询您所感兴趣的产品类型。
JacksonImmunoResearchLaboratories,INC.专业致力于亲和纯化的二抗和免疫球蛋白的生产及偶联。产品主要销往世界各地的大学和科研院所。该公司位于宾夕法尼亚州费城以西约40英里,始建于1982年,经过40年左右的发展,Jackson的二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛)、性价比高、供货迅捷而受到更多科研学者和工业客户的青睐。
Jackson的产品主要有酶标二抗、荧光标记二抗、生物素标记二抗、胶体金标记二抗、封闭血清等等,其中JacksonHRP标记羊抗兔/羊抗鼠二抗,更是很多生产厂家的重要物料之一。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司作为Jackson在中国的代理商,备有大量二抗现货,并能提供专业的售前咨询和完善的售后服务。
JacksonImmunoResearchLaboratories,INC.专业致力于亲和纯化的二抗和免疫球蛋白的生产及偶联。产品主要销往世界各地的大学和科研院所。该公司位于宾夕法尼亚州费城以西约40英里,始建于1982年,经过40年左右的发展,Jackson二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛)、性价比高、供货迅捷而受到更多科研学者和工业客户的青睐。
Jackson的所有产品均具有极高的纯度和高超的品质,大部分二抗产品以冻干粉形式存在,易于保存和运输;作为二抗的实际生产商(非OEM商),产品的性价比也是非常高的,很多大厂家诸如T.F等也会从JacksonOEM产品。另外厂家完善的库存和供应体系以及高效稳定的纯化技术,保证了大部分二抗产品均能现货形式供应,不同批次的产品质量的稳定性也非常高。
Jackson的产品主要有酶标二抗、荧光标记二抗、生物素标记二抗、胶体金标记二抗、封闭血清等等,其中JacksonHRP标记羊抗兔/羊抗鼠二抗,更是很多生产厂家的重要物料之一。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司作为Jackson在中国代理商,备有大量二抗现货,并能提供专业的售前咨询和完善的售后服务。
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【教学内容一】分段盐析法,凝胶过滤法(盐析法概念及原理,分段盐析概念,分子筛效应,柱层析基本技术)
【实验原理】1.盐析法是一种利用蛋白质在高盐溶液中溶解度不同而分离的方法。通过将硫酸铵加入蛋白质溶液中,使蛋白质表面电荷被中和,水化膜被破坏,导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。2.通过分段改变盐类浓度达到分离目的的方法叫分段盐析法。3.凝胶过滤又称分子筛层析。混合物随流动相流经装有凝胶作为固定相的层析柱时,分子量大的物质因不能进入凝胶网孔而沿凝胶颗粒间的空隙先被洗脱(阻力小,流程短,流速大),分子量小的物质因能进入凝胶网孔而受阻滞,流速缓慢,流程长而后被洗脱,由于流速不同可以把大小不同的分子分开.
【仪器与试剂】1.离心机2.真空泵3.饱和硫酸铵溶液:称取767g固体硫酸铵,加入1000ml水中,加热使之溶解,室温冷却后4℃静置过夜,然后用氨水将pH调至中性。4.固体(NH4)2SO45.SephadexG—256.奈氏试剂7.双缩脲试剂8.pH7.4,0.05MPBS
【步骤】
一分段盐析
1.观看人血清抗胰蛋白酶(α1-AT)的分离及鉴定教学录像2.每组量取20ml血清,倒入一干净烧杯中,缓慢加入饱和硫酸铵20ml,边加边搅拌,放入4℃冰箱30分钟3.从冰箱中取出烧杯,将血清倒入离心管,3000rpm,离心20分钟4.将上清倒入一干净量筒中,记录体积后,倒入干净烧杯中,按17.6g/100ml量取固体硫酸铵,缓慢加入上清中,边加边搅拌。4℃冰箱放置30分钟5.将烧杯中液体倒入抽滤器中,负压抽滤6.刮下滤纸上的粗提蛋白,用4ml缓冲液溶解,准备加样
二凝胶过滤层析
1.凝胶柱准备:(1)连接层析柱(2)夹住出口,加入1/3体积的0.05MpH6.4PBS,灌胶,待凝胶自然沉降约1cm时,打开出口,控制流速,60滴/分(3)层析柱填装完成后,连接下口瓶,调节流速,使入口和出口流速相同。平衡至入口pH值与出口pH值相同(即pH试纸呈色相同),关闭出口,等待加样2.加样:用吸管吸去胶面以上的缓冲液,立即加入蛋白粗提液(沿管壁缓慢加入)3.打开出口,调流速15滴/分,待蛋白粗提液完全进入胶面,用少量缓冲液清洗管壁。连接下口瓶4.检测:用双缩脲试剂检测洗脱液。待试剂变红,开始收集,直到试剂不变色停止收集。测量并记录收集液的体积,留取1ml样品(标记为G—25样品),放入一冷冻管中冰箱冻存;剩余的液体收集入一大试管中,作好标记,下次实验用5.洗去铵盐:全速洗脱,用奈氏试剂检测洗脱液,直到橙色消失为止,回收凝胶
【注意事项】1.盐析所用器皿一定要干燥2.盐析时,应将饱和硫酸铵或固体硫酸铵加入到血清中,且边加边搅拌3.层析柱上方要留有少量液体,避免使凝胶暴露于空气中4.凝胶过滤上样时,使样品沿管壁缓缓流下,勿冲破胶面
(信息提供:探生网生物医药)
有机溶剂沉淀,极性有机溶剂降低介点常数使蛋白质凝集沉淀。eg.甲醇、乙醇、丙酮。
磺基水杨酸也可以沉淀蛋白质,但要加酸调节ph,使之低于血清蛋白的pi,使蛋白质带正电荷,与水杨酸酸根结合生成不溶盐而沉淀。
血清蛋白质均带负电荷,但各种蛋白质带负电荷的程度有所差异,以白蛋白为最多。而血清白蛋白等电点为4.7-4.9。所以把ph调到4.7以下就可以了。
血清为去除纤维蛋白原后的无形成分,颜色微黄,透亮。
血清的基本成分是水,水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分,也溶有人体代谢产物。血清中有抗体,这是被称作免疫球蛋白的蛋白质。

