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| Catalog Number | FX010 |
|---|---|
| Availability | Available Globally |
| Price | Contact for bulk priceContact for bulk priceContact for bulk price |
| Format | IgG fraction affinity purified |
| Host | Sheep |
| Target Protein | IgA |
| Species Reactivity | Human |
| Quantity | Bulk |
| Concentration | Variable |
| Recommended Storage | 2-8°c |
| Material Type | Antibody |
| Buffer | Tris buffered saline |
| Preservatives | 0.099% sodium azide, 0.1% E-amino-n-caproic acid, 0.01% benzamidine and 1mM ethylenediaminetetracetic acid |
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-08-16
免疫组化中的血清封闭原理封闭血清没有也不应该和样品发生反应，应该是说，血清把没有包被 (coating)到的地方通通填满，以防止一抗乱吸附，所以封闭可以用二抗同物种血清，也可用 BSA 或 Gelatin，就是不能使用一抗同物种血清，因为里面含有同物种抗体，肯定会被二抗辨识。先加一抗后再封闭的话，一抗就会结合到固相表面上，这种结合力是非特异性的疏水作用力，这种作用力是比较强的，经过处理的固相表面如硝酸纤维膜，酶标板对蛋白的吸附力更强，你 查看更多
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上海朗顿生物科技有限公司在发布的组蛋白，冻干粉供应信息，浏览与组蛋白，冻干粉相关的产品或在搜索更多与组蛋白，冻干粉相关的内容。 查看更多
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2021-09-02
北京博尔西科技有限公司在发布的链霉亲和素琼脂糖凝胶FF（Streptavidin Sepharose FF）亲和层析柱介质填料（1ml预装柱）供应信息，浏览与链霉亲和素琼脂糖凝胶FF（Streptavidin Sepharose FF）亲和层析柱介质填料（1ml预装柱）相关的产品或在搜索更多与链霉亲和素琼脂糖凝胶FF（Streptavidin Sepharose FF）亲和层析柱介质填料（1ml预装柱）相关的内容。 查看更多
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2021-07-23
北京亿鸣复兴生物科技有限公司在发布的酶联免疫吸附试验供应信息，浏览与酶联免疫吸附试验相关的产品或在搜索更多与酶联免疫吸附试验相关的内容。 查看更多
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2021-09-08
上海信裕生物科技有限公司在发布的Peroxidase-conjugated Streptavidin辣根过氧化物酶标记链霉亲和素供应信息，浏览与Peroxidase-conjugated Streptavidin辣根过氧化物酶标记链霉亲和素相关的产品或在搜索更多与Peroxidase-conjugated Streptavidin辣根过氧化物酶标记链霉亲和素相关的内容。 查看更多
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2021-08-17
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的 绵羊免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Sheep IgG powder ≥ 97% purity, 100gm供应信息，浏览与 绵羊免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Sheep IgG powder ≥ 97% purity, 100gm相关的产品或在搜索更多与 绵羊免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Sheep IgG powder ≥ 97% purity, 100gm相关的内容。 查看更多
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2018-08-08
SPA 试剂的种类很多，主要有 SPA 菌体，包括荧光菌体和各种抗体标记的菌体；SPA 纯品标记的荧光素、同位素和酶标记试剂；用于亲和层析的 SPA-Sepharose CL-4B、6 MB 和 SPA-agarose，以及用于免疫电镜观察的 SPA-铁蛋白、胶体金和 SPA 标记的血蓝蛋白等。 查看更多
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2021-08-09
SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B（冻干粉）AMP-Sepharose4B(Lyophilized)(20182005-2)是由苏州达麦迪生物医学科技有限公司代理或销售的Separopore品牌的试剂，产品来源于美国。苏州达麦迪生物医学科技有限公司是中国最权威的SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B（冻干粉）AMP-Sepharose4B(Lyophilized)(20182005-2)试剂销售服务商之一，在其它等地方销售SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B（冻干粉） 查看更多
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2021-09-01
Equitech-Bio公司IgG冻干粉，Equitech-Bio公司IgG冻干粉 查看更多
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2021-07-20
武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司在发布的小鼠赖氨酰氧化酶(LOX)化学发光免疫分析试剂盒供应信息，浏览与小鼠赖氨酰氧化酶(LOX)化学发光免疫分析试剂盒相关的产品或在搜索更多与小鼠赖氨酰氧化酶(LOX)化学发光免疫分析试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-08-06
荧光素PE-Cy3标记链霉亲和素SAStreptavidin/PE-Cy357532北京博奥森生物技术有限公司荧光素PE-Cy3标记链霉亲和素SA 查看更多
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2021-08-31
北京博尔西科技有限公司在发布的SA-FITC（荧光标记链霉亲和素）供应信息，浏览与SA-FITC（荧光标记链霉亲和素）相关的产品或在搜索更多与SA-FITC（荧光标记链霉亲和素）相关的内容。 查看更多
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BSA封闭液h和羊封闭血清哪个效果好 实验室综合讨论区干细胞之家...123
唦真2018-01-14
要看你山羊抗体的交叉反应效果。BSA的效果。
一般用BSA。
一般用BSA。
链霉亲和素 碱性磷酸酶 用什么稀释123
败落0dBt2018-02-05
春天的微风已经吹来，寒冷的冬天已经渐渐离我们远去。冷暖季节的交替总是会给我们的身体健康带来影响。如何才能调整好自己的身体来迎接春天呢？生活家小编特别为您准备了最丰富的保健养生知识，帮您过一个健康快乐的春天。 晨起后，先喝一杯白开...5241
一个亲和素分子可以结合几个生物素分子临床医学检验临床免疫...123
小鬼无赖2021-08-02
亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每个分子由4个亚基组成，可以和4个生物素分子亲密结合。
封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)123
2021-07-27
你也可以搜索【牧羊人】或者【牧羊人论坛】多和其他养羊朋友一起交流养羊体会和疑难解答哦。
目前是最好的养羊技术交流平台。
那里有一个版块叫做【有问必答】的，一般只要描述清楚的问题，都能够得到论坛羊友的解答。
如果是关于 羊病问题，最好是把羊的大小、品种、平时喂什么料、体温排泄变化等详细说明。如果能够搭配清晰的图片说明更好了。
对于高级用户 还能提供实地学习机会哦
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哪些公司会用到链霉亲和素,他们的用途是干啥,谢谢各位 – 960化工...123
强蓝色经典2021-07-30
这些特异的化学物质一般都是生物制剂公司或者是实验室做光化学实验用，它的作用你可以参考下面的一些属性。
链霉亲和素(streptavidin下称SA)是与亲和素(svidin下称AV)有相似生物学特性的一种蛋白质。
链霉亲和素(SA)是streptomyces avidinii菌的分泌物，其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似，等电点6.0，非特异性结合远比亲和素低。
一 、来源：SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物，主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯，1L培养液中含蛋白1 0~60mg 。
二、分子量 ：链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈，链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于 10 mol/L 数量级，这一性质常用于分子生物学用途[1]。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基，分子量为16450。
三、比消光系数：消光系数与蛋白中Tyr含量有关， 由于SA 中Tyr的含量比AV 多，所以SA的比消光系数也较AV 为高，两者分别为E 1mg/ml=3．40和E1mg/ml=1.57。在282nm 上这两种蛋白结合生物素后并不改变其消光系数，而在233nm上，它们结合生物素后郡便其消光系数值增高，现在一般都是利用蛋白的这种吸光特点来测定它们的活性。
链霉亲和素(streptavidin下称SA)是与亲和素(svidin下称AV)有相似生物学特性的一种蛋白质。
链霉亲和素(SA)是streptomyces avidinii菌的分泌物，其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似，等电点6.0，非特异性结合远比亲和素低。
一 、来源：SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物，主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯，1L培养液中含蛋白1 0~60mg 。
二、分子量 ：链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈，链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于 10 mol/L 数量级，这一性质常用于分子生物学用途[1]。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基，分子量为16450。
三、比消光系数：消光系数与蛋白中Tyr含量有关， 由于SA 中Tyr的含量比AV 多，所以SA的比消光系数也较AV 为高，两者分别为E 1mg/ml=3．40和E1mg/ml=1.57。在282nm 上这两种蛋白结合生物素后并不改变其消光系数，而在233nm上，它们结合生物素后郡便其消光系数值增高，现在一般都是利用蛋白的这种吸光特点来测定它们的活性。
一种无抗鸡饲料天眼查123
兮兮妞DSPX2018-02-06
过生物素标记的流式抗体及链霉亲和素标记的荧光素
抽血检测，一般用三代酶联合免疫法 酶联免疫法，简称ELISA。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。 步骤：ELISA用血清来检测，首先血液要经过至少半个小时的凝集，然后取血清（这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因，其实是误会）。将酶复合物用稀释液稀释后，加血清及阴性、阳性对照，还有就是质控品（这是严格的要求，它的范围必须在质控范围内）。经过一个小时的孵育，然后洗板，加底物，半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分，然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲，如果第一次检测为阳性的话，无论是哪个实验室，必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测，第二次的方法必须与第一次的不同，如还是阳性，将送确认实验室确认。有的医院很不负责，将初筛阳性的报告发出后就不管了，这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。祝大家。PS，第一次检测为阳性的话，一定要去确认实验室再做一次，勇敢的去面对，也许结果就不一样了。 基本原理是：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。
抽血检测，一般用三代酶联合免疫法 酶联免疫法，简称ELISA。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。 步骤：ELISA用血清来检测，首先血液要经过至少半个小时的凝集，然后取血清（这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因，其实是误会）。将酶复合物用稀释液稀释后，加血清及阴性、阳性对照，还有就是质控品（这是严格的要求，它的范围必须在质控范围内）。经过一个小时的孵育，然后洗板，加底物，半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分，然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲，如果第一次检测为阳性的话，无论是哪个实验室，必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测，第二次的方法必须与第一次的不同，如还是阳性，将送确认实验室确认。有的医院很不负责，将初筛阳性的报告发出后就不管了，这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。祝大家。PS，第一次检测为阳性的话，一定要去确认实验室再做一次，勇敢的去面对，也许结果就不一样了。 基本原理是：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。
请问抗滋养层细胞膜抗体是什么?_寻医问药网_xywy.com123
hhcogo2018-01-14
抗滋养层细胞膜抗体检测意义，在于合体滋养层浆膜上有可被母体识别的抗原系统，它们的存在影响着孕妇与胎儿之间的免疫平衡，研究表明在不明原因流产的妇女血清中，抗滋养层细胞膜抗体比正常孕妇明显增高，种抗体的增高与流产之间有着密切联系。其机制可能与封闭抗体的减少有关。 合体滋养层细胞的表面不表达HLA，但存在一种独特的抗原，称滋养层抗原(TA)。由于该抗原的抗血清能与淋巴细胞发生交叉反应，故命名为滋养层淋巴细胞交叉反应抗原(trophoblast-lymphocyte cross reaction antiˉgen，TLX)。TLX(实为抗TA的血清蛋白)在功能上能诱导母体产生封闭抗体。该抗体可与TA结合，使其不能刺激母体形成免疫反应过程。
【求助】关于ELISPOT 实验室建设与采购讨论版123
llqq2021-08-05
我马上就要就要做了，但是对此技术还是不很了解。
请各位不吝赐教。或介绍一些此方面比较好的paper和review
谢谢！
请各位不吝赐教。或介绍一些此方面比较好的paper和review
谢谢！
ELISPOT步骤123
天之饺子2003-11-21
1预期用途
Eli-spot分析是设计用于在单细胞悬液中计数分泌细胞因子的细胞数量的方法。这个方法的优点在于只需在体外进行很少的处理从而使细胞因子产生的分析尽可能接近于体内状况。这个技术用于测定在给予一定刺激的情况下细胞因子产生细胞的数目，以及在某种处理或病理条件下的细胞因子产生细胞的数量。
2主要原理
细胞刺激后，原位产生的细胞因子被一种特异的单抗捕获，在细胞溶解后，捕获的细胞因子与第二种生物素化的检测性抗体结合，后者进一步通过与连接碱性磷酸酶的链亲和素结合被识别。PVDF包被孔的板之后与BCIP/NBT底物作用，紫色的斑点提示单个细胞产生的细胞因子。
35×96孔试剂盒的内容物
▲捕获抗体（0.52ml），置于4℃。
▲生物素化检测抗体（冻干，重悬于0.55ml水中）。
▲抗生物素蛋白链霉素-碱性磷酸酶结合物，置于4℃。
▲牛血清白蛋白（1g），置于4℃。
▲撇去的干牛奶（1g），放于室温。
▲备用底物溶液（50ml），置于4℃。
▲96孔PVDF包被板。
▲96孔PVDF-包被板
▲细胞培养基
▲CO2孵箱
▲70%乙醇
▲Tween20
▲碱性磷酸盐缓冲液
5直接或间接Eli-spot
细胞可以在抗体包被孔中直接刺激（直接）或者首先在24孔板或细颈瓶中刺激，收获，然后种于包被孔中（间接）。
方法根据：1）被分析的细胞类型；2）预期的细胞密度。如果细胞因子产生细胞的数量很少，建议用直接法实验，但是如果细胞因子产生细胞的数量很多，最好用间接的方法。无论采用直接或间接的方法，所有刺激以后的步骤是相同的。
主要步骤：
1）96孔PVDF板首先以70%乙醇处理，然后以捕获抗体包被。
2）将细胞放入抗体包被过的含有抗原/丝裂原的微孔中，在间接法中细胞被预刺激。
3）细胞用倒置平板法去除，与生物素标记的抗体共育。
4）与结合于碱性磷酸盐的链霉亲和素反应。
5）BCIP/NTB斑点形成。
◆刺激步骤：
小鼠脾细胞在PMA和lonomycin刺激下产生IFN-γ。人的IFN-γ由PBMC在PMA和lonomycin的刺激下产生。
建议步骤：
小鼠1）分离脾细胞，ficoll。间期收获细胞。用PBS洗三次，去除ficoll。2）用培养基稀释细胞（RPMI1640含2mML_glutamine,10%灭活的胎牛血清）含1ng/mlPMA和500ng/mlionomycin(Sigma),加2×10（4）—5×10（4）细胞到抗体包被的PVDF包被板，在孵箱中培养10—15小时。对于其它刺激物孵育时间可能不同，根据细胞因子产生细胞的密度，优化条件。
人用培养基稀释细胞（RPMI1640含2mML_glutamine,10%灭活的胎牛血清）含1ng/mlPMA和500ng/mlionomycin(Sigma),加2×10（4）—5×10（4）细胞到抗体包被的PVDF包被板，在孵箱中培养10—15小时。对于其它刺激物孵育时间可能不同，根据细胞因子产生细胞的密度，优化条件。
●试剂准备
●检测抗体用0.55ml蒸馏水溶解冻干抗体，轻轻混匀溶液并等到所有冻干抗体溶解。
●抗生物素蛋白链霉素-碱性磷酸酶用含1%BSA的PBS稀释（1/1000）
●碱性磷酸盐缓冲液（10×浓缩液）
1L溶液：80gNaCL；2gKH2PO4;14.4gNa2HPO42H2O;2gKCL，加蒸馏水至1升。检查PH在7.2-7.4之间，此溶液在用之前稀释为1×溶液。
●含2%脱脂干奶粉的PBS一块板溶0.2g干粉于10ml1×PBS。
●含1%BSA的PBS一块板溶0.2g干粉于20ml1×PBS。
●含0.1%Tween的PBS一块板溶100μlTween20于100ml1×PBS。
●70%乙醇一块板以3ml蒸馏水和7ml乙醇混匀。
★试剂保存
1）如果短时间内不用，溶解的检测抗体应分装和保存于—20℃，在这种条件下，试剂可稳定保存至少一年。
2）底物缓冲液保存于4℃。
3）链霉亲和素-碱性磷酸酶保存于4℃。
Eli-spot步骤
1PVDF包被板用100ul70%乙醇室温下处理10分钟。
2倒空孔并以100ulPBS洗3次。
3将100ul捕获抗体加到10mlPBS中，混合并分至每孔中100ul，盖上板盖，放至4℃过夜。
4倒空每孔，用100ulPBS洗一次。
5每孔加100ul含2%脱脂干牛奶的PBS，盖板，室温2小时。
6在洗涤槽上轻弹板子倒空液体，并在吸水纸上吸干。
7用PBS洗一次。
8分配每孔100ul细胞悬液（含合适的细胞数和合适的刺激物浓度），细胞可以在体外预刺激（间接Eli-spot）。盖上板，放细胞于37℃CO2孵箱，合适的时间15-20小时。（在此期间不要摇动或平移平板。）
9在洗涤槽上轻弹板子倒空液体，并在吸水纸上吸干。
10每孔加100ul含0.1%Tween20的PBS，4℃放置10分钟。
11用含0.1%Tween20的PBS洗板三次。
12每一块板，稀释100ul检测抗体到10ml含1%BSA的PBS中，每孔加100ul，封闭扳子放于37℃1小时30分钟。
13倒空扳子并用含0.1%Tween20的PBS洗三次。
14每一块板，稀释10ul链霉亲和素-碱性磷酸酶复合物到10ml含1%BSA的PBS中，每孔加100ul，封闭扳子放于37℃1小时。
15倒空，用含0.1%Tween20的PBS洗三遍，反复用吸水纸吸以去尽所有残存的液体。
16每孔加100ul备用BCIP/NBT溶液。
17让反应在室温进行5-20分钟。肉眼可见小斑点形成。
18用蒸馏水洗三次。
19干燥每孔。计数斑点。注意斑点在4℃过夜后可能会变得明显，放置扳子于室温，避免直接光照。
Eli-spot分析是设计用于在单细胞悬液中计数分泌细胞因子的细胞数量的方法。这个方法的优点在于只需在体外进行很少的处理从而使细胞因子产生的分析尽可能接近于体内状况。这个技术用于测定在给予一定刺激的情况下细胞因子产生细胞的数目，以及在某种处理或病理条件下的细胞因子产生细胞的数量。
2主要原理
细胞刺激后，原位产生的细胞因子被一种特异的单抗捕获，在细胞溶解后，捕获的细胞因子与第二种生物素化的检测性抗体结合，后者进一步通过与连接碱性磷酸酶的链亲和素结合被识别。PVDF包被孔的板之后与BCIP/NBT底物作用，紫色的斑点提示单个细胞产生的细胞因子。
35×96孔试剂盒的内容物
▲捕获抗体（0.52ml），置于4℃。
▲生物素化检测抗体（冻干，重悬于0.55ml水中）。
▲抗生物素蛋白链霉素-碱性磷酸酶结合物，置于4℃。
▲牛血清白蛋白（1g），置于4℃。
▲撇去的干牛奶（1g），放于室温。
▲备用底物溶液（50ml），置于4℃。
▲96孔PVDF包被板。
▲96孔PVDF-包被板
▲细胞培养基
▲CO2孵箱
▲70%乙醇
▲Tween20
▲碱性磷酸盐缓冲液
5直接或间接Eli-spot
细胞可以在抗体包被孔中直接刺激（直接）或者首先在24孔板或细颈瓶中刺激，收获，然后种于包被孔中（间接）。
方法根据：1）被分析的细胞类型；2）预期的细胞密度。如果细胞因子产生细胞的数量很少，建议用直接法实验，但是如果细胞因子产生细胞的数量很多，最好用间接的方法。无论采用直接或间接的方法，所有刺激以后的步骤是相同的。
主要步骤：
1）96孔PVDF板首先以70%乙醇处理，然后以捕获抗体包被。
2）将细胞放入抗体包被过的含有抗原/丝裂原的微孔中，在间接法中细胞被预刺激。
3）细胞用倒置平板法去除，与生物素标记的抗体共育。
4）与结合于碱性磷酸盐的链霉亲和素反应。
5）BCIP/NTB斑点形成。
◆刺激步骤：
小鼠脾细胞在PMA和lonomycin刺激下产生IFN-γ。人的IFN-γ由PBMC在PMA和lonomycin的刺激下产生。
建议步骤：
小鼠1）分离脾细胞，ficoll。间期收获细胞。用PBS洗三次，去除ficoll。2）用培养基稀释细胞（RPMI1640含2mML_glutamine,10%灭活的胎牛血清）含1ng/mlPMA和500ng/mlionomycin(Sigma),加2×10（4）—5×10（4）细胞到抗体包被的PVDF包被板，在孵箱中培养10—15小时。对于其它刺激物孵育时间可能不同，根据细胞因子产生细胞的密度，优化条件。
人用培养基稀释细胞（RPMI1640含2mML_glutamine,10%灭活的胎牛血清）含1ng/mlPMA和500ng/mlionomycin(Sigma),加2×10（4）—5×10（4）细胞到抗体包被的PVDF包被板，在孵箱中培养10—15小时。对于其它刺激物孵育时间可能不同，根据细胞因子产生细胞的密度，优化条件。
●试剂准备
●检测抗体用0.55ml蒸馏水溶解冻干抗体，轻轻混匀溶液并等到所有冻干抗体溶解。
●抗生物素蛋白链霉素-碱性磷酸酶用含1%BSA的PBS稀释（1/1000）
●碱性磷酸盐缓冲液（10×浓缩液）
1L溶液：80gNaCL；2gKH2PO4;14.4gNa2HPO42H2O;2gKCL，加蒸馏水至1升。检查PH在7.2-7.4之间，此溶液在用之前稀释为1×溶液。
●含2%脱脂干奶粉的PBS一块板溶0.2g干粉于10ml1×PBS。
●含1%BSA的PBS一块板溶0.2g干粉于20ml1×PBS。
●含0.1%Tween的PBS一块板溶100μlTween20于100ml1×PBS。
●70%乙醇一块板以3ml蒸馏水和7ml乙醇混匀。
★试剂保存
1）如果短时间内不用，溶解的检测抗体应分装和保存于—20℃，在这种条件下，试剂可稳定保存至少一年。
2）底物缓冲液保存于4℃。
3）链霉亲和素-碱性磷酸酶保存于4℃。
Eli-spot步骤
1PVDF包被板用100ul70%乙醇室温下处理10分钟。
2倒空孔并以100ulPBS洗3次。
3将100ul捕获抗体加到10mlPBS中，混合并分至每孔中100ul，盖上板盖，放至4℃过夜。
4倒空每孔，用100ulPBS洗一次。
5每孔加100ul含2%脱脂干牛奶的PBS，盖板，室温2小时。
6在洗涤槽上轻弹板子倒空液体，并在吸水纸上吸干。
7用PBS洗一次。
8分配每孔100ul细胞悬液（含合适的细胞数和合适的刺激物浓度），细胞可以在体外预刺激（间接Eli-spot）。盖上板，放细胞于37℃CO2孵箱，合适的时间15-20小时。（在此期间不要摇动或平移平板。）
9在洗涤槽上轻弹板子倒空液体，并在吸水纸上吸干。
10每孔加100ul含0.1%Tween20的PBS，4℃放置10分钟。
11用含0.1%Tween20的PBS洗板三次。
12每一块板，稀释100ul检测抗体到10ml含1%BSA的PBS中，每孔加100ul，封闭扳子放于37℃1小时30分钟。
13倒空扳子并用含0.1%Tween20的PBS洗三次。
14每一块板，稀释10ul链霉亲和素-碱性磷酸酶复合物到10ml含1%BSA的PBS中，每孔加100ul，封闭扳子放于37℃1小时。
15倒空，用含0.1%Tween20的PBS洗三遍，反复用吸水纸吸以去尽所有残存的液体。
16每孔加100ul备用BCIP/NBT溶液。
17让反应在室温进行5-20分钟。肉眼可见小斑点形成。
18用蒸馏水洗三次。
19干燥每孔。计数斑点。注意斑点在4℃过夜后可能会变得明显，放置扳子于室温，避免直接光照。
利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因123
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你可以去http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/查找你需要的序列，你要的那个基因有许多，你自己挑挑看哪个是你要的。
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