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我最近用乳化交联法制备壳聚糖盐酸盐微球,药物是水不溶性(醋酸共晶体),将药物乙醇溶液加入到3%壳聚糖盐酸盐溶液中,混合均匀,加入到含2%span80的液体石蜡,油水比6:1,乳化半小时,加入1.5ml戊二醛,交联30min,离心,用石油醚,丙酮各洗两次,干燥,得微球。
但是我研磨微球,用乙醇溶解药物,超声3h,在紫外下根本检测不到药物,包封率就没法算,我测了药物在石油醚和丙酮中都有一定的溶解度,洗的时候溶剂层也有药物的颜色,是不是微球中的药物都被洗了出来?还是只是把游离的药物洗了出来?药物根本就没被包进去?但是药物在有机溶剂中都有一定的溶解度,我该怎么做?有大神愿意告知一二吗????
版主shitou0307留言:
因为你还没学会怎么提问
最近想做小鼠微循环的检测,参照了DissectingtheEffectsofIschemiaandReperfusionontheCoronaryMicrocirculationinaRatModelofAcuteMyocardialInfarction这篇文献,想做荧光微球。但是不知道这个荧光微球具体该怎么用,要怎么处理,文献写的不详细,问了厂家也是不太清楚,希望有大神可以指点,提供详细些的实验步骤。多谢。
同原剂作用由氯金酸(HAuCL4)制备金颗粒直径0.8-500nm胶体金制备胶体金保存间较4℃保存6月或室温保存1-2月
胶体金做标记探针同用途选用胶体金直径范围同用于免疫快速检测胶体金颗粒直径范围般3-40nm间
胶体金粒表面层AuC12—粒表面带负电荷金颗粒表面包层物(蛋白)稳定保护金颗粒维持胶体稳定防止外电解质影响使粒相互凝聚
胶体金粒蛋白吸附作用取决于溶液pH值蛋白氨基酸净电荷取决于溶液pH值pH=pI蛋白溶液呈性pH=pI蛋白溶解度水化程度更容易吸附疏水金粒表面实际胶体金探针制备般胶体金调整pH=pI+0.5更利于结合更稳定
胶体金探针所用蛋白通三种机制于吸附于金颗粒表面:、金粒所带负电荷与蛋白部碱性氨基酸(赖氨酸精氨酸pH均于10)所带阳性电荷初相互吸引;二、蛋白通某些疏水性氨基酸残基(包括色氨酸)与金粒表面间疏水吸附作用;三、蛋白半胱氨酸或甲硫氨酸硫基与金粒间电共用共价键结合
用于制备胶体金探针蛋白需要进行前处理才能与金颗粒更结合未经处理蛋白质般说均含较高浓度盐高浓度盐往往干扰蛋白与胶体金吸附结合或导致胶体金粒凝聚所首先要除蛋白质溶液盐冻干蛋白或高浓度蛋白溶液蛋白凝聚聚同与胶体金粒结合影响探针灵敏度散蛋白单体蛋白前处理重要项处理标记使其蛋白具适量蛋白量(30kD)形蛋白复合体往往稳定量蛋白与其蛋白(BSA牛血清蛋白等)结合能制备稳定性更佳探针量影响探针灵敏度已知蛋白结构与性前提除性影响结构部提高标记灵敏度
二、免疫胶体金产品原理及应用
胶体金探针用单克隆抗体标记应用免疫层析制快速诊断产品具较高特异性且相稳定性高检测般5-10min读结相比其(ELISA需1-2hPCR需要间更)缩短检测间检测(组织液、血清、尿液、粪便等)需做非简单处理或做前处理即进行检测结颜色变化读取需要特别仪器设备
免疫胶体金快速检测试纸利用层析原理、双抗体夹或免疫竞争或间接应用检测物质特异性能与其发特异反应抗原或抗体并金颗粒显色剂达快速检测目
使用快速检测产品卡加孔加入待测利用层析原理断向另端层析随着层析进行本待测固定于测试线(T线)并颜色变化显示并照线(即控制线C线)确保检测效性
建议 这没有意义
也可以自己查阅资料
微球说白了就是小颗粒,尺寸是微米级的,再小就是纳米球了,微球可以是纯球,也可以不是规则的球,椭圆的也可以.
聚苯乙烯微球就是利用搅拌乳化,电喷雾,共轴液流(气流),膜乳化等方法将聚苯乙烯制备成微米尺寸的颗粒.
荧光微球免疫层析;将标记好的荧光微球重悬,喷涂在结合垫上,加样时为什么就像黏在结合垫上,没有层析呢,望各位老师提出宝贵的建议

