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【讨论】实验室建设HSE:安全_实验室建设仪器社区论坛
来自 : mayitao
货号:BMFL
供应商:无锡百迈格生物科技有限公司
数量:1111
英文名:FlagMagneticBeads
保质期:2年
保存条件:4℃
规格:300nm/1um
BioMag-AntiFlag抗体包被磁珠
一、概述:
   抗Flag (DYKDDDK)免疫磁珠标签抗体免疫磁珠由高性能的特异性IgG1 单克隆抗体与磁珠共价偶联,后期经过封闭处理,可以直接用于捕获Flag标签蛋白,具有较高的Flag标签融合蛋白结合量以及非特异结合低的特点,可用于Flag标签蛋白免疫沉淀以及蛋白的分离纯化。
二、产品规格:
配体抗Flag标签抗体
磁珠表层材料超顺磁亲水高分子磁珠
包装5ml 100ml
粒径大小300nm/1μm
浓度2mg/ml
结合量>20μg/mg磁珠(对Flag标签蛋白的结合量)
浓度2mg/ml
建议pH使用范围1-10
沉降系数2mg/ml磁珠在60ul以下体积沉降时间应该不大于10s
批间差<5%
磁珠保存液含有保护剂的缓冲液,保质期两年。
保存4℃,禁止冷冻,使用前请充分混匀
三、使用方法:
 
 
1.磁珠的准备
1.1用移液枪轻柔吹打重悬Anti-Flag标签免疫磁珠,转移50-100 μL免疫磁珠到新的离心管中(实际取用量可根据样品中目的蛋白的含量适当增减)。
1.2加入1mlTBST缓冲液,用移液枪轻柔吹打重悬免疫磁珠,磁力架上静置实现磁液分离后,移除上清,重复上述步骤2次。
2.样品的结合
2.1加入500μL细胞裂解液,室温旋转混匀孵育2小时或者4°C条件下过夜。
2.2磁力架上静置实现磁液分离后,将上清液转移到新的离心管中备用(上清液可能还有过量的Flag标签目的蛋白)。
3.磁珠洗涤
3.1加入1mLTBST缓冲液洗涤磁珠,磁力架上静置实现磁液分离后,移除上清。
3.2重复洗涤大约3次,直到洗涤后的上清液中OD280小于0.05为止。
注意:如上清液的OD280大于0.05,适当增加洗涤次数
4.目的蛋白洗脱
4.1根据下游用途选择洗脱方法。对于直接检测目的蛋白的情况,在上述所得沉淀中加入50μL1×蛋白上样缓冲液,煮沸5min,在磁力架上静置实现磁液分离后,吸取上转移到新的离心管中。
4.1取上清进行SDS-PAGE检测。
 
温馨提示:不可用于临床治疗。
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