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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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2018-04-07
PhysitempIT系列可植入探针PhysitempIT系列可植入探针。将针植入半固态与组织中（已供）。浸没式也同样在各种解决方案中适用于测量小动物 查看更多
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2021-08-20
深圳市科润达生物工程有限公司在发布的SPOT-LIGHT 10号染色体着丝粒探针供应信息，浏览与SPOT-LIGHT 10号染色体着丝粒探针相关的产品或在搜索更多与SPOT-LIGHT 10号染色体着丝粒探针相关的内容。 查看更多
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2021-07-26
新型探针材料可快速检测贫血症 查看更多
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2021-09-13
北京孚博生物科技有限公司在发布的IGL Breakapart 探针供应信息，浏览与IGL Breakapart 探针相关的产品或在搜索更多与IGL Breakapart 探针相关的内容。 查看更多
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2021-09-06
分子美食英语：Molecular gastronomy )又称为分子料理，人造美食，所谓分子美食是指把葡萄糖，维生素c,柠檬酸钠，麦芽糖醇等可以食用的化学物质进行组合，改变食材的分子结构，重新组合，创造出与众不同的可以食用的食物，比如，把固体的食材变成液体甚至气体食用，抑或使一种食材的味道和外表酷... 查看更多
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2021-08-29
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的 活细胞荧光示踪探针VFSE 450 -VFSE 450供应信息，浏览与 活细胞荧光示踪探针VFSE 450 -VFSE 450相关的产品或在搜索更多与 活细胞荧光示踪探针VFSE 450 -VFSE 450相关的内容。 查看更多
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2018-03-18
ZytoLightPTEN/CEN10双色FISH探针是由重庆华创医疗设备有限公司代理或销售的Zytovision品牌的试剂，产品来源于德国。重庆华创医疗设备有限公司是中国最权威的ZytoLightPTEN/CEN10双色FISH探针试剂销售服务商之一，在北京等地方销售ZytoLightPTEN/CEN10双色FISH探针试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业ZytoLightPTEN/CEN10双色FISH探针仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的ZytoLightPTEN 查看更多
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ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针是由重庆华创医疗设备有限公司代理或销售的Zytovision品牌的试剂，产品来源于德国。重庆华创医疗设备有限公司是中国最权威的ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针试剂销售服务商之一，在北京等地方销售ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业ZytoLightCOL1A1/PDGFB双色双融合FISH探针仪器产品及图片，以便挑选到性价 查看更多
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2021-08-03
合成实时定量PCR探针 赠送15%京东卡 实时定量... 查看更多
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2021-08-12
在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其 荧光性质（激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。... 查看更多
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2021-09-04
北京孚博生物科技有限公司在发布的FGFR1 Breakapart/Amplification 探针供应信息，浏览与FGFR1 Breakapart/Amplification 探针相关的产品或在搜索更多与FGFR1 Breakapart/Amplification 探针相关的内容。 查看更多
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PCR试剂盒的选用和质检.ppt_123
moxianran2021-07-23
各位大侠，本人纯属门外汉，领导安排了任务要设计新的PCR引物或者探针的检验方法，由于本人专业不是很对口，所以希望各位可以给点意见或者具体的方法,感激不尽！！！
普通pcr与real time pcr引物有区别吗123
胖旨嘿532018-01-23
如果你做的事荧光定量PCR，其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的，只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。染料法不需要其他东西，探针法还需要taqman探针，这个探针的设计是比较有讲究的，并且上面有荧光集团和猝灭基团。具体设计，一般使用相关软件进行。
【求助】急求人的GAPDH的上下游引物和探针序列_问答详情_引物与...123
ccnucq2021-08-18
高中生物pcr技术扩增的是两引物之间的核苷酸序列是什么意思已知...123
不是胡萝卜须2018-01-23
PCR技术中扩增的是两引物之间的核苷酸序列，意思是采用该技术，可以大量扩增引物之间的序列，一般情况下，我们需要大量的某一基因的片段时，我们在基因的两端分别设计引物（一段一条），然后在体外，采用PCR的方法，用引物进行体外DNA复制，从而大量合成引物之间的基因。
PCR即聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。
其原理为：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。
耐热DNA聚合酶--Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
PCR即聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。
其原理为：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是，DNA聚合酶在高温时会失活，因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作烦琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。
耐热DNA聚合酶--Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
荧光定量PCR(SYBR Green)详细操作步骤123
犹豫的汉堡2021-07-20
可以事先混合，混合液作为实时荧光用的最好还是现配现用，毕竟这是一个反应比较灵敏的实验。
PCR技术中 探针是什么?做什么用什么原理?123
呆包子2018-01-23
大学知识即可，不要网上摘的
请教nanodorp 2000测定taqman探针浓度 核酸基因技术讨论版...123
宁心酱丶104472021-08-03
一般Taqman定量PCR实验过程为：目的基因查找比对→探针与引物设计→探针与引物合成→配置反应体系→反应参数→重复实验，优化条件→获得曲线数据，比对标准曲线→再重复验证。第一步：在第一步目的基因查找比对过程中可以利用NCBIgenbank序列以及DNAstar等软件完成目的DNA或者RNA的查找与比对——这在分析测序报告的时候相信很多人操作过，这一步需要注意的就是要保证所分析的序列在一个contig（重叠群，即染色体的一些区域中毗邻DNA片段重叠的情况）内。第二步：如果其它条件一致，那么这个第二步——引物探针的设计就可以说是定量PCR成败的关键了，通过各方面经验的总结有以下几个基本的原则：总体原则*先选择好探针，然后设计引物使其尽可能的靠近探针。*所选序列应该高度特异，尽量选择具有最小二级结构的扩增片段——这是因为二级结构会影响反应效率，而且还会阻碍酶的扩增。建议先进行二级结构检测，如果不能避免二级结构，那么就要相应提高退火温度。*扩增长度应不超过400bp，理想的最好能在100-150bp内，扩增片段越短，有效的扩增反应就越容易获得。较短的扩增片段也容易保证分析的一致性。*保持GC含量在20％和80％之间，GC富含区容易产生非特异反应，从而会导致扩增效率的降低，以及出现在荧光染料分析中非特异信号。*为了保证效率和重复性，应避免重复的核苷酸序列，尤其是G（不能有4个连续的G）*将引物和探针互相进行配对检测，以避免二聚体和发卡结构的形成。引物设计原则*序列选取应在基因的保守区段*避免引物自身或与引物之间形成4个或4个以上连续配对，避免引物自身形成环状发卡结构*典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长，保证序列独特性，并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。但是长度大于24核苷的引物并不意味着更高的特异性。较长的序列可能会与错误配对序列杂交，降低了特异性，而且比短序列杂交慢，从而降低了产量。*Tm值在55－65℃（因为60℃核酸外切酶活性最高），GC含量在40%－60%*引物之间的TM相差避免超过2℃*引物的3’端避免使用碱基A，引物的3’端避免出现3个或3个以上连续相同的碱基*为避免的扩增，引物设计最好能跨两个外显子。*Taqman探针技术要求片段长度在50bp－150bp*引物末端（最后5个核苷酸）不能有超过2个的G和C。探针设计原则*探针位置尽可能地靠近上游引物*探针长度应在15-45bp（最好是20-30bp)，以保证结合特异性*检测探针的DNA折叠和二级结构*Tm值在65-70℃，通常比引物TM值高5-10℃（至少要5℃），GC含量在40%－70%*探针的5’端应避免使用G鸟嘌呤——因为5'G会有淬灭作用，而且即使是被切割下来还会存在淬灭作用。*整条探针中，碱基C的含量要明显高于G的含量——G含量高会降低反应效率，这时就应选择配对的另一条链作为探针。*为确保引物探针的特异性，最好将设计好的序列在blast中核实一次，如果发现有非特异性互补区，建议重新设计引物探针。TaqmanMGB探针设计*探针的5’端避免出现G，即使探针水解为单个碱基，与报告基团相相连的G碱基仍可淬灭基团的荧光信号。*Tm值应为65-67℃。*尽量缩短TaqmanMGB探针，但探针长度不少于13bp。*尽量避免出现重复的碱基，尤其是G碱基，应避免出现4个或4个以上的G重复出现。*原则上MGB探针只要有一个碱基突变，MGB探针就会检测到(MGB探针将不会与目的片段杂交，不产生荧光信号)。因此，在进行SNP检测时，为了检测到突变子，即TaqmanMGB不与目的片段杂交，不产生荧光信号，探针目的片段产生荧光信号检测将探针的突变位点尽量放在中间1/3的地方。注意：为了满足上述要求的4个条件，探针的突变位点可向3’端移动，但突变位点至少在离3’端2个碱基的前方(即必须确保探针的后两个碱基是绝对的保守)，以进行SNP检测。反过来，若要进行同类检测，找的是保守片段区，探针中不应有突变位点。若探针即便是只有13个bp，探针仍不完全保守。有几个突变，突变位点也应靠近探针的5’端，这样，即便是突变，探针也可与目的片段杂交，产生荧光信号。另一种方法是设计简并探针，也可达到即使是突变，仍可检测到突变。第三步：寻找一家信赖的公司合成引物和探针，一般引物合成大家比较熟悉，而且价格也比较便宜（特别是这两年便宜了许多），而探针则相对来说贵了许多，一般Taqman探针合成在1000到5000元不等（不同的合成要求价钱不同）——而这只是标记价钱，序列合成基本上和引物合成价钱相似。第四、五、六步：一般的定量PCR反应体系与普通PCR其实也差不了多少，只是要加入Taqman探针，另外不同就是分步法的不同。其中需要注意的是：*扩增酶最好选用热启动酶*引物和探针的浓度需要进行优化，有人建议从50nM开始，在50nM—900nM之间优化，一般为200nM（注意探针需要避光保存。*同样Mg和酶量也需要进行优化，酶的推荐反应浓度是1.25-1.5U（50ul）*DNA模板的添加量通常在100ng以下，因不同种类的DNA模板中含有的靶基因的拷贝数不同，必要时可进行梯度稀释，确定最佳的DNA模板添加量。如果欲进行2StepRT-PCR反应的第二步PCR扩增反应，第一步的RT反应液作为DNA模板时的添加量不要超过PCR反应液总体积的10%。另外循环参数虽然在引物和探针设计完之后也就确定了，但是有时也需要进行优化。第七步：在进行数据分析的时候，通常用不同浓度的标准样品的Ct值来产生标准曲线，然后计算相对方程式。方程式的斜度可以用来检查PCR的效率，对于100%PCR效率来说，一个理想的斜率是3.32。最佳的标准曲线是建立在PCR的扩增效率为90%-100%(100%意味着在每个循环之后，模板的总数将增加为前一次的2倍)的基础上。所有标准曲线的线性回归分析需要存在一个高相关系数(R2≥0.99)，这样才能认为实验的过程和数据是可信的。使用这个方程式我们可以计算出未知样本的初始模板量。大多数定量PCR仪都有这样一个软件，它可以从标准曲线中自动地计算出未知样本的初始模板量。这其中有两种基本的方法：绝对定量和相对定量，研究人员需要根据自己的实验目的来选择。绝对定量是指将未知样品与标准曲线相比较进行分析，一般标准品就是一个已知绝对浓度的DNA样品，要注意得是绝对定量分析的准确性是相对标准品的准确性而言的。相对定量是指两个或更多的基因互相进行比较，其结果是一个比率，没有确切的数字被检测道。另外由于不同的样品在反应过程中存在着一定的差异，因此除了要制作标准曲线来进行定量外，还需要设计表达水平相对较为稳定的内参基因来对结果进行标准化。β-actin和三磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase，GAPDH)是两种较常用的管家基因，另外还有cyclophilin，18srRNA，phosphoglyserokinase，beta-microglobulin，beta-glucronidase，hypoxanthineribosyltransferase，transferringreceptor等。要注意这些基因可以被反应条件所影响，在设计定量表达研究时，保证初始对照基因的质量是必要的一步，而且严谨的研究人员会通过对一系列内参基因定量结果取几何平均数来对定量数据进行标准化。还有一个问题就是如何判断所得到数据的好坏，关于扩增曲线，经验总结认为：“1.总体看曲线拐点清楚，指数期明显，扩增曲线整体平行性极好，基线平无上扬现象，低浓度样本扩增曲线指数期明显。2.曲线指数期斜率，反应了扩增效率，越大说明扩增效率越高。扩增效率越高，试剂灵敏度表现会越好。3.基线，图上的基线也就是阴性样本的扩增曲线，平直或略微下降是好试剂的表现，阴阳性清楚，不易误判。如果有上扬趋势，有可能造成阴性标本误判。4.曲线与曲线间平行性非常好，说明各反应管扩增效率相近，外标准定量建立在每管扩增效率一样的假定基础上，所以扩增效率越相近，定量的重复性和准确性就越好。而扩增效率相近与否，反应在扩增曲线图上就是曲线的平行性。5.低浓度曲线指数期明显，一方面不易出现假阴阳性误判，另一方面说明灵敏度高。
【求助】伯乐的Image Lab凝胶成像系统的问题 核酸基因技术...123
Kathy1pt2021-08-07
可能这得看你的运气了～我每次反转录三四个都没有问题的～ 因为大部分的引物序列都是一样的～所以没事～不会错配～但是并不排除发生错配的可能～ 我们就有人反转录不出来～U6都出不来～那就分开弄～我没也就是普通的反转录的酶～m-MLV矮Ace矮都。
设计引物和探针生活高清完整正版视频在线观看优酷123
itisnotajoke2008-04-29
小弟最近在用realtimePCR扩增HPV16病毒（双链环状DNA病毒）的一个片段。引物和探针的设计都是参考文献的。东西设计完后做了几天实验一直不出实验结果，心中焦虑万分，怀疑是引物或是探针设计的问题。求教各位达人，能否帮小弟验证一下设计的引物和探针的合理性。
上游引物：5′-GAATGTGTGTACTGCAAGCA-3′
下游引物：5′-GTTGTATTGCTGTTCTAATGTTGT-3′
Taqman探针：5′-FAM-CAGCATATGGATTCCCATCTC-TAMRA-3′
扩增的产物长度是：195bp(nt188-382)
HPV16全长序列：贴在附件中
磕头跪谢！！！
HPV16.txt(9.91k)
上游引物：5′-GAATGTGTGTACTGCAAGCA-3′
下游引物：5′-GTTGTATTGCTGTTCTAATGTTGT-3′
Taqman探针：5′-FAM-CAGCATATGGATTCCCATCTC-TAMRA-3′
扩增的产物长度是：195bp(nt188-382)
HPV16全长序列：贴在附件中
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HPV16.txt(9.91k)
【求助】荧光定量PCR如何设计引物 核酸基因技术论坛123
lovedurian2021-08-10
【求助】引物与探针的设计?急求! 核酸基因技术 专业医生社区...123
小香辣虾2021-07-29
小妹最近开始做PCR，需要有引物和探针，但是自己不怎么会设计。所以，向各位师兄师姐请教一下，有没有免费设计引物和探针的公司。有的话请告知一下，万分感谢！
RNA转染试剂的对比 实验动物_中国实验动物信息网123
上帝在云端微笑2021-08-17
引物肯定需要特异性的啊要不然你扩增出乱七八糟的条带对结果影响很大的
看引物能不能特异性扩增，你可以检查一下扩增后的熔解曲线，一般单一的峰是特异性引物，如果有双峰那就是扩出来了杂带
看引物能不能特异性扩增，你可以检查一下扩增后的熔解曲线，一般单一的峰是特异性引物，如果有双峰那就是扩出来了杂带
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