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NEB/SNAP-Cell® 430/S9109S/50 nmol
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NEB/SNAP-Cell® 430/S9109S/50 nmol
品牌 / 
纽英伦
货号 / 
S9109S-50nmol
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Description:

SNAP-Cell®430isabluefluorescentsubstratethatcanbeusedtolabelSNAP-tag®fusionproteinsinsidelivingcells,oncellsurfaces,orinvitro.Thiscell-permeablesubstrate(BG-430)isbasedondiethylaminocoumarinandissuitableforappropriatebluelasersandfiltersets.Ithasanexcitationmaximumat421nmandemissionmaximaat444and484nm.Thispackageincludes50 nmolofSNAP-Cell430substrate,sufficienttomake10mlofa5µMSNAP-tagfusionproteinlabelingsolution.

TheSNAP-tagproteinlabelingsystemenablesthespecific,covalentattachmentofvirtuallyanymoleculetoaproteinofinterest.TheSNAP-tagisasmallproteinbasedonhumanO6-alkylguanine-DNAalkyltransferase(AGT).SNAP-tagsubstratesarederivativesofbenzylpurinesandbenzylchloropyrimidines.Inthelabelingreaction,thesubstitutedbenzylgroupofthesubstrateiscovalentlyattachedtotheSNAP-tag.

Therearetwostepstousingthissystem:sub-cloningandexpressionoftheproteinofinterestasaSNAP-tagfusion,andlabelingofthefusionwiththeSNAP-tagsubstrateofchoice.ExpressionofSNAP-tagfusionproteinsisdescribedinthedocumentationsuppliedwithSNAP-tagplasmids.ThelabelingofthefusionproteinswiththeSNAP-tagsubstrateisdescribedbelow.

Figure1:Figure 1: Live CHO-K1 expressing nuclear histone H2B-SNAP (H2B-SNAP) were labeled with SNAP-Cell™ 430 (aqua).

LiveCHO-K1expressingnuclearhistoneH2B-SNAP(H2B-SNAP)werelabeledwithSNAP-Cell™430(aqua).
Figure2: Excitation(dottedline)andemissionspectraofSNAP-Cell430coupledtoSNAP-taginbufferatpH7.5Figure 2: Excitation (dotted line) and emission spectra of SNAP-Cell 430 coupled to SNAP-tag in buffer at pH 7.5
S9109b_TN
Figure3:  StructureofSNAP-Cell430(MW513.5g/mol).

Notes:

Storage:SNAP-Cell430shouldbestoredat-20°C(longterm)orat4°Cinthedark(shortterm,lessthan4weeks).Protectthesubstratefromlightandmoisture.Withproperstorageat-20°Cthesubstrateshouldbestableforatleastthreeyearsdryor3monthsdissolvedinDMSO.
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近日,国家药品监督管理局经审查,批准了北京纳捷诊断试剂有限公司研制的创新产品“丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒(PCR-荧光探针法)”的注册。该产品基于自主创新的一管法的PCR专利技术,用于体外定量测定血清样本中的丙型肝炎病毒(HCV)核酸(RNA)。该产品适用于需要进行HCV感染检测的患者和接受抗病毒治疗的丙型肝炎患者。国家药品监督管理局鼓励支持医疗器械产业创新发展,进一步做好创新医疗器械审查。食品药品监管部门将加强产品上市后质量监管,保障公众用械安全,确保医疗器械产业的健康有序发展。 查看更多>
货号:225-02133、187-01703、041-29111 查看更多>
生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。近年大量研究证实,生物素—亲和素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大... 查看更多>
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此数据库内有各种已经应用过的探针、引物,省大家费神
http://medgen.ugent.be/rtprimerdb/
PCR引物和探针 123
夏至chxdx2018-01-23
探针应用在Southern杂交反应中,引物应用在扩增反应中
在分子生物学中,探针是根据碱基互补的原理,用来与特定的DNA片段做杂交以对特定的DNA片段进行检测,如Southern杂交
引物是用来扩增DNA序列的,因为核苷酸必须要连接在3-OH上才能够合成延伸,引物就是用来提供3-OH的。
只要是符合要求的DNA片段都可以用来做探针和引物,引物是用来扩增DNA序列,探针用来与特定的DNA片段做分子杂交的
PCR技术中扩增的是两引物之间的核苷酸序列,意思是采用该技术,可以大量扩增引物之间的序列,一般情况下,我们需要大量的某一基因的片段时,我们在基因的两端分别设计引物(一段一条),然后在体外,采用PCR的方法,用引物进行体外DNA复制,从而大量合成引物之间的基因。

PCR即聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。

其原理为:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。

耐热DNA聚合酶--Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能准确的计量模板量了
用blast验证引物和探针的时候,结果什么样可以说明这对引物和探针合格啊?谢谢各位高手帮忙解答!!不胜感激!
引物肯定需要特异性的啊要不然你扩增出乱七八糟的条带对结果影响很大的

看引物能不能特异性扩增,你可以检查一下扩增后的熔解曲线,一般单一的峰是特异性引物,如果有双峰那就是扩出来了杂带
在普通探针基础上MGB修饰的探针,它的杂交能力更强,更稳定。
我是一个新手,最近在做多重定量PCR,要设计引物和探针。看到很多地方将探针要尽量靠近上游引物,想请教一下大家探针可不可以在下游引物所在的链上?如果可以,探针位置还是靠近上游引物吗?请各位有经验的帮忙指教一下了,非常感谢!
如果你做的事荧光定量PCR,其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的,只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。染料法不需要其他东西,探针法还需要taqman探针,这个探针的设计是比较有讲究的,并且上面有荧光集团和猝灭基团。具体设计,一般使用相关软件进行。
是RNA探针.TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5’末端,而淬灭剂则在3’末端.PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.常用的荧光基团是FAM,TET,VIC,HEX. 而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台.
小妹最近开始做PCR,需要有引物和探针,但是自己不怎么会设计。所以,向各位师兄师姐请教一下,有没有免费设计引物和探针的公司。有的话请告知一下,万分感谢!
引物探针设计要求123
凉白开2021-08-04
AlleleID.
It is designed to address the challenge of pathogen detection, species identification and taxa discrimination using TaqMan and molecular beacon assays. With ClustalW multiple sequence alignment at its core, AlleleID can help design universal or taxa/species specific primers and probes. All major qPCR assays including molecular beacons, TaqMan, FRET or SYBR Green are supported. It uses BLAST search to assure specificity. To assure assay success, AlleleID uses template folding to avoid locating primers in the secondary structures of the template.

With AlleleID, you can avoid gDNA by designing primers/probes across exon/exon boundaries. The intron exon regions are identified by interpreting GenBank annotations or by specifying them manually.

To get started quickly with AlleleID, please download and listen to the multi-media tutorial:
http://www.PremierBiosoft.com/DATAFILES/AL100Tour.exe.

Then please download the demo version of the program from:
http://www.premierbiosoft.com/DATAFILES/AlleleIDTour.exe
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