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Lifespan/Neutral Red Cell Cytotoxicity Assay Kit (Colorimetric) - LS-K490/1000 asy/LS-K490-1000
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Lifespan/Neutral Red Cell Cytotoxicity Assay Kit (Colorimetric) - LS-K490/1000 asy/LS-K490-1000
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Specifications

Name
Neutral Red Cell Cytotoxicity Assay Kit (Colorimetric)
Type
Cytotoxicity Assay
Usage
This assay provides a convenient and non-radioactive alternative to carry out cytotoxicity assays. This assay relies on the ability of neutral cells to stain lysosomes of viable cells.
Target
Cell Viability
SampleType
Adherent Cells, Non-adherent Cells
Detection
Colorimetric (540 nm Absorbance)
Species Reactivity
Mammal
Components
  • 100X Neutral Red Staining Solution
  • 10X Washing Solution
  • 2X Solubilization Solution
  • 20 mM Doxorubicin
  • (See Datasheet for specific volumes supplied)
  • Applications
    Spectrophotometry (visible)
    Equipment
    Microplate spectrophotometer (visible)
    Conditions
    Shipped -20°C Dry Ice, Components stored at varying temperatures. See recommended storage details in product insert, 12 months shelf life.
    Documents
    Data Sheet
    SDS
    Restrictions
    For research use only.Available for shipment within the USA only
    Guarantee
    This Assay Kit carries the LSBio 100% Guarantee
    Product Features
    • Fast, sensitive, and convenient
    • Simple procedure
    • Takes less than 2 hours

    LifespanBiosciences公司是分子病理学行业的领头军,销售抗体免疫组化服务以及蛋白质定位数据库。1995年创立的LifeSpanBiosciences已开发了针对药物标靶主要种类的专有抗体,用以研究这些蛋白质在人正常和患病组织中的表达。LifeSpanBiosciences在高通量成像和癌症鉴别软件产品中也处于领先地位,正在开发用于在在临诊前期毒理学和癌症诊断方面进行病理学解读的仪器和软件。


    关于LifeSpanBioSciences,Inc.(LSBIo)LifeSpanBioSciences为全球研究人员提供高质量的抗体,蛋白质,生化试剂ELISA和化验试剂盒,免疫组化数据和服务。由Drs。于1995年创立。约瑟夫·布朗和格兰纳·伯默(LSG)成立于LSBio,是一家分子病理学公司,致力于IHC在人体疾病组织中的蛋白质定位。通过执行数千项IHC研究以及生成和测试成千上万种抗体获得的经验,LSBio已成为抗体行业的世界领导者,并以卓越的声誉而著称。  LSBio拥有针对20,000个靶标的550,000单克隆和多克隆抗体目录。抗体可用于大多数物种和所有主要研究应用,例如免疫印迹,IHC,免疫荧光和荧光激活的细胞分选。通过广泛的正在进行的内部测试,这些抗体中的14,000多种也被鉴定为特殊的IHC试剂,并获得了IHC-plus™品牌。  LSBio还提供30,000种高质量的免疫测定,包括夹心ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒,竞争性EIA(酶免疫测定)试剂盒以及基于细胞和DNA结合的试剂盒。   LSBio还提供45,000种天然蛋白提取物以及经过工程改造的重组蛋白,其形式为细胞裂解液或高度纯化的试剂。  最近,LSBio发布了他们不断增长的化验试剂盒和生化试剂系列,旨在补充研究社区的其他产品线。  十多年来,研究人员一直依靠LSBio的专业知识来满足其分子病理学外包需求。LSBio的服务包括:抗体生产和鉴定,定制的IHC研究(由庞大的档案人类组织库支持)以及组织交叉反应性筛选。  LSBio坚持其产品和服务的质量,并提供无与伦比的客户服务和支持。在未来的几年中,LSBio计划继续扩大其高质量蛋白质组学产品的目录,为客户提供出色的试剂,服务和支持,以加速他们的研究。


    免疫组织化学服务与LifeSpan合作设计定制的免疫组织化学,以解决您的特定生物学问题。将整个定位过程外包,而不必担心寻找和表征靶标特异性抗体,寻找和鉴定难以发现的组织,并具有解释与复杂的人类病理学有关的免疫染色的能力。TCR筛选服务在免疫组织化学中针对大量正常的冷冻人类组织类型测试您的治疗性抗体,以确定潜在的意外结合。我们的非GLPTCR服务是根据FDA的建议设计的,该建议在其“用于人类的单克隆抗体产品的生产和测试要考虑的要点”中概述。免疫组织化学验证抗体的领导者新冠肺炎LSBio提供了许多与冠状病毒有关的产品,包括抗体,蛋白质,检测试剂盒和可表达的ORF克隆。SARS-CoV-2/COVID-19冠状病毒检测冠状病毒和COVID-19抑制剂冠状病毒蛋白质组学细胞因子释放综合征一般冠状病毒信息抗体我们收集了针对大多数靶蛋白的565,268单克隆和多克隆抗体。它们涵盖了所有主要的研究物种,应用,并且有多种共轭形式。我们的IHC-plus™抗体非常适合用于FFPE人体组织免疫组织化学。所有抗体Path- Plus ™癌症病理抗体Path- Plus ™神经抗体原发性抗体Path- Plus ™癌症抗体二抗IHC- Plus ™抗体同型对照ELISA和测定试剂盒我们的传统三明治,竞争性EIA和直接ELISA试剂盒提供了一种定量测量数千个目标靶标的方法,而我们的基于细胞和DNA结合的ELISA试剂盒是进行体外研究和转录因子分析的理想选择。化学发光CLIA试剂盒可对低拷贝靶标进行高灵敏度检测,我们的开发试剂盒使研究人员能够经济高效地进行大量测定。我们不断增加的化验试剂盒集合为研究人员提供了监测多种生物过程的方法,例如细胞凋亡细胞增殖,新陈代谢等。所有套件检测试剂盒传统ELISA试剂盒基于细胞的ELISA试剂盒磷酸特异性ELISA试剂盒DNA结合ELISA试剂盒ELISA开发试剂盒化学发光CLIA试剂盒蛋白质类蛋白质可用于各种各样的应用中,例如用于功能测定的开发,小分子筛选,原位受体活化或仅用作WesternBlot的对照。我们提供提取的天然蛋白和重组蛋白,其形式为细胞裂解物,或者从细菌或哺乳动物表达系统中纯化。许多蛋白质具有生物活性并经过认证的低内毒素。所有蛋白质重组蛋白天然蛋白质过表达裂解物生物活性蛋白无动物蛋白合成肽细胞和组织产品LSBio提供广泛的细胞和组织产品,包括FFPE组织切片,面板和阵列,第一链CDNA,基因组DNA,总RNA,细胞和组织裂解物,以及各种相关的测定试剂盒。所有细胞和组织产品组织切片和阵列细胞和组织裂解液RNA和DNA提取物分子生物学LSBio提供了超过13,000个cDNA的广泛选择,每个cDNA均可在克隆载体或十四种不同的即用型表达载体之一中获得。cDNA/ORF克隆是研究蛋白质功能和基因表达的基础。经过验证的表达就绪ORF克隆为研究人员提供了直接启动蛋白质分析和表达研究的选择,而无需花费宝贵的时间进行RNA分离,cDNA合成,框内克隆和测序。所有分子生物学产品cDNA克隆表达就绪的ORF克隆免疫组化试剂LSBio提供设计和执行定制免疫组织化学实验所需的所有组件,从抗原回收到盖玻片。用于AP或HRP底物开发的高质量,值得信赖的品牌封闭剂,检测柱和Avidin-Biotin系统。使用我们的鼠标鼠标和多路检测系统,轻松完成具有挑战性的项目。所有IHC试剂抗原提取封闭剂检测聚合物ABC检测试剂盒基材特别/柜台污渍安装介质免疫组织化学数据和服务在过去的20年中,我们进行了1000项自定义IHC研究。我们的病理学家团队在设计有效的IHC研究和解释与正常和疾病过程相关的结果方面经验丰富。这些服务得到了我们庞大的组织库的支持,该组织库几乎包含每种组织类型和疾病。定制免疫组织化学研究组织交叉反应筛选免疫组织化学报告IHC-plus™抗体关于我们的组织银行生化产品特色产品类别包括激动剂,拮抗剂,抑制剂和调节剂,可满足您的生物医学研究需求。高质量的产品可用于癌症研究,心血管疾病,细胞生物学,脂质研究,免疫学,新陈代谢,神经科学,氧化损伤和毒理学。所有生化试剂

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    采用免疫化学发光原理,定量检测血清、肝素血浆或经抗坏血酸处理全血中的叶酸含量,对贫血的临床诊断和治疗起辅助作用。... 查看更多>
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    对危险化学药品要在包装标签上印上警示性标志.在盛放浓硫酸的试剂瓶的标签上应印有的警示标记是(  )A.B.C.D.
    各位同仁,请教Roche地高辛标记试剂盒的关于转基因植物基因组DNASouthernBlot的步骤。非常感谢!!!
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    iamasweetgirl2021-08-07
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    liuhua2018-03-29
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    南京NTproBNP/cTnI试剂盒的咋样?123
    蒋春燕是我2021-08-06
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    在进行多因子检测时,因不能找到多种合适的标记一抗,而不得不选用标记二抗,因此很难避免可能发生的交叉反应及繁琐的洗涤步骤。
    生物偶联即将两种分子结合在一起而形成一个杂合的偶联物(hybridconjugate),这些偶联结合物(如标记抗体)在世界各大医院和科研机构被广泛使用。一抗标记试剂系列产品极大程度的简化了结合标记流程,是目前世界上操作最简便的抗体标记试剂盒
    [img=300,117]/kindeditor_4.0.1/attached/image/20121010/20121010112456_9078.jpg[/img]
    订货信息:货号中文品名英文品名规格AZK0012AHRP辣根过氧化物酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkHRPconjugationkit3x10μgHRPAZK0012BHRP辣根过氧化物酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkHRPconjugationkit1x100μgHRPAZK0012CHRP辣根过氧化物酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkHRPconjugationkit3x100μgHRPAZK0012DHRP辣根过氧化物酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkHRPconjugationkit1mgHRPAZK0012EHRP辣根过氧化物酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkHRPconjugationkit5x1mgHRPAZK0012FHRP辣根过氧化物酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkHRPconjugationkit5mgHRP**生物提供抗体标记试剂盒系列,提供多种荧光蛋白、酶及荧光素标记等产品,试验操作人员可直接应用于标记一抗,从而避免了因使用二抗带来的交叉反应及非特异性结合等问题。该系列试剂盒具有以下显著特点:
    特点
    优势
    ·操作简单:一步法标记
    ·快速:手工操作时间仅30秒·目前世界上操作最简便的抗体标记试剂盒·无需脱盐、透析等步骤·抗体回收率达100%·可提供数十种标记物·可用于WB,IHC,ELISA,免疫荧光、流式细胞术以及荧光共振能量转移检测等·经济实惠,规格多样·可标记ug-mg级抗体量试剂盒组成:
    1)1或3(以规格而定)玻管Lightening-Link?Mix混合物。
    2)1管LL-X(X为标记物,如PE或HRP等)修饰试剂。
    3)1管LL-X萃灭试剂。
    操作步骤:
    1)在每10ul抗体样品中加入1ul的LL-Modifier修饰试剂,轻轻混匀。
    2)打开Ligtening-Link混合物管盖,吸取步骤1已混好的抗体样品至管内冻干混合物中,用吸液器轻轻吸打1-2次,使粉末完全溶解。
    3)盖上玻璃瓶盖,室温(20-25°C)避光孵育3小时,或过夜。*
    4)孵育3小时后,按每10ul抗体的量加入1ulLL-淬灭试剂,静置30分钟后即可使用。
    *不同的标记物,操作步骤略有不同。(操作步骤供参考,以英文原版说明书为准。)
    标记结合物的保存:
    对于任何新结合物,推荐保持于4°C条件下。如需长期保存,可添加保护剂。
    缓冲液及添加剂兼容性:
    A.与无胺基缓冲液兼容,包括MES,MOPS,HEPES(浓度10-50mM,pH范围6.5-8.5),LL-Modifier修饰剂提供结合反应的最佳条件。
    B.常见的盐(如氯化钠)、螯合剂(EDTA)、糖对偶联反应无影响。
    C.叠氮钠(0.02%-0.1%)对结合反应有轻微影响,叠氮钠不可用于HRP标记,其为后者的抑制剂。
    D.甘油(upto50%)对结合效率无影响。
    E.若无胺基的缓冲液浓度相对较高,pH值在6.6-8.5范围外,则需要加入更多的LL-midifier修饰剂(/10ul抗体),以此来调整pH值。最佳的pH范围为7.3-7.6左右。
    F.避免使用含亲核剂的缓冲液,避免还原剂如DTT和2-巯基乙醇,乙醇胺等。
    G.浓度达到或稍低于20mM的Tris对结合效率有轻微的影响。
    Westernblottingdatacomparingconjugatedandunconjugatedantibodies
    conjugated
    unconjugated
    Primaryantibody
    GoatAnti-NQO1
    GoatAnti-NQO1
    Target
    quinonereductase1
    quinonereductase1
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    humankidney
    humankidney
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    Secondaryantibodyused
    no(directconjugation)
    yes
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    10
    [img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20121010/20121010112846_3863.jpg[/img][img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20121010/20121010112857_4798.jpg[/img]
    Westernblotanalysis

    conjugated
    unconjugated
    Primaryantibody
    GoatAnti-GFAP
    GoatAnti-GFAP
    Target
    GFAP
    GFAP
    Samplelysate
    mousebrain
    mousebrain
    Primaryantibodyworkingconcentration
    0.185?g/ml
    0.5?g/ml
    Secondaryantibodyused
    no(directconjugation)
    yes
    Exposuretime(min)
    3
    3
    [img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20121010/20121010112923_7291.jpg[/img]
    Westernblotanalysis
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ing-Linkatto5903reactions(eachupto20ug)AZK0034BAtto590荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5903reactions(eachupto200ug)AZK0034CAtto590荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5901reaction(upto2mg)AZK0035AAtto594荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5943reactions(eachupto20ug)AZK0035BAtto594荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5943reactions(eachupto200ug)AZK0035CAtto594荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5941reaction(upto2mg)AZK0036AAtto633荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6333reactions(eachupto20ug)AZK0036BAtto633荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6333reactions(eachupto200ug)AZK0036CAtto633荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6331reaction(upto2mg)AZK0037AAtto637荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6373reactions(eachupto200ug)AZK0037BAtto637荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6371reaction(upto2)mgAZK0038AAtto655荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6553reactions(eachupto20ug)AZK0038BAtto655荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6553reactions(eachupto200ug)AZK0038CAtto655荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6551reaction(upto2mg)AZK0039AAtto680荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6803reactions(eachupto20ug)AZK0039BAtto680荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6803reactions(eachupto200ug)AZK0039CAtto680荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6801reaction(upto2mg)AZK0040AAtto700荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto7003reactions(eachupto20ug)AZK0040BAtto700荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto7003reactions(eachupto200ug)AZK0040CAtto700荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto7001reaction(upto2mg)AZK0041AFluoProbesDyes547H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes547H3reactions(eachupto20ug)AZK0041BFluoProbesDyes547H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes547H3reactions(eachupto200ug)AZK0041CFluoProbesDyes547H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes547H1reaction(upto2mg)AZK0042AFluoProbesDyes594荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes5943reactions(eachupto20ug)AZK0042BFluoProbesDyes594荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes5943reactions(eachupto200ug)AZK0042CFluoProbesDyes594荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes5941reaction(upto2mg)AZK0043AFluoProbesDyes647H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes647H3reactions(eachupto20ug)AZK0043BFluoProbesDyes647H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes647H3reactions(eachupto200ug)AZK0043CFluoProbesDyes647H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes647H1reaction(upto2mg)AZK0044AFluoProbesDyes682荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes6823reactions(eachupto20ug)AZK0044BFluoProbesDyes682荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes6823reactions(eachupto200ug)AZK0044CFluoProbesDyes682荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes6821reaction(upto2mg)AZK0045AFluoProbesDyes752荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes7523reactions(eachupto20ug)AZK0045BFluoProbesDyes752荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes7523reactions(eachupto200ug)AZK0045CFluoProbesDyes752荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes7521reaction(upto2mg)AZK0046APE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy53x10ugAZK0046BPE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy51x100ugAZK0046CPE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy53x100ugAZK0046DPE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy51x1mgAZK0047APE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.53x10ugAZK0047BPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.51x100ugAZK0047CPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.53x100ugAZK0047DPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.51x1mgAZK0048APE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy73x10ugAZK0048BPE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy71x100ugAZK0048CPE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy73x100ugAZK0048DPE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy71x1mgAZK0049APE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.53x10ugAZK0049BPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.51x100ugAZK0050APE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed3x10ugAZK0050BPE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed1x100ugAZK0050CPE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed3x100ugAZK0050DPE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed1x1mgAZK0051APE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5943x10ugAZK0051BPE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5941x100ugAZK0051CPE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5943x100ugAZK0051DPE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5941x1mgAZK0052APerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.53x100ugAZK0052BPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.51x1mgAZK0052CPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.53x10ugAZK0052DPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.51x100ugAZK0052EPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.53x100ugAZK0052FPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.51x1mgAZK0053ALightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy73x10ugAZK0053BLightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy71x100ugAZK0053CLightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy73x100ugAZK0053DLightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy71x1mgAZK0054A生物素化结合试剂盒typeALightning-LinkBiotinconjugationkittypeA3reactions(upto20μgAb)AZK0054B生物素化结合试剂盒typeALightning-LinkBiotinconjugationkittypeA3reactions(upto200μgAb)AZK0054C生物素化结合试剂盒typeALightning-LinkBiotinconjugationkittypeA1reaction(upto2mgAb)AZK0055A生物素化结合试剂盒typeBLightning-LinkBiotinconjugationkittypeB3reactions(upto20μgAb)AZK0055B生物素化结合试剂盒typeBLightning-LinkBiotinconjugationkittypeB3reactions(upto200μgAb)AZK0055C生物素化结合试剂盒typeBLightning-LinkBiotinconjugationkittypeB1reaction(upto2mgAb)AZK0056A链亲和素标记试剂盒Lightning-LinkStreptavidinconjugationkit3x10ugStreptavidinAZK0056B链亲和素标记试剂盒Lightning-LinkStreptavidinconjugationkit3x100ugStreptavidinAZK0056C链亲和素标记试剂盒Lightning-LinkStreptavidinconjugationkit1x1mgStreptavidinAZK0057A亲和素标记试剂盒Lightning-LinkAvid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    最近我准备做肿瘤裂解物荧光标记,但是在查到的资料多数都是直接买荧光素自己标记?
    想请问下那个公司有专门的蛋白质荧光标记试剂盒出售。最好的是CY5的,我准备做三标。性价比越高越好
    那些做过的前辈们指导一下。
    小弟现在要对样品DNA进行标记,想用生物素标记核苷酸后PCR来标记,但是不知道那个公司有这样的试剂盒,那些公司的试剂盒比较好!多谢!
    不同,二抗要与一抗结合,一抗与样品结合,结构当然不同。
    Bertin Pharma 特约代理123
    维它命27482018-03-01
    这种专业的问题最好打司法鉴定所的电话问问
    DIG-DNA标记与检测

    一、探针DNA标记方法

    步骤 :
    1.10ng~3ugDNA每管,双蒸水定量至总体积15ul
    2.沸水水浴10分钟后迅速冰浴
    3.加入 5号试剂 2ul , 6号试剂 2ul ,7号试剂 1ul
    4.37度1小时~20小时
    5.中止反应 加2ul 0.2M EDTA (pH 8.0) 和/或 65度 水浴 10分钟

    二、标记效率检测
    (一) 试剂配置
    Solution Composition Preparation
    Washing buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; pH 7.5 (20° C); 0.3% (v/v) Tween 20
    Maleic acid buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; adjustwith NaOH (solid) to pH 7.5 (20° C)
    Detection buffer 0.1 M Tris-HCl, 0.1 M NaCl, pH 9.5 (20° C)

    TE-buffer 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0

    Blocking stock solution Dissolve Blocking reagent (bottle 10) 10% (w/v) in Maleic
    (10 × conc.) acid buffer underconstantly stirring on a heating block(65°C) or heat in a microwave oven,autoclave. The solution remains opaque

    Blocking solution Prepare a 1 × working solution by dilutingthe 10 × Blocking solution 1:10in Maleic acid buffer.

    Antibody solution Centrifuge Anti-Digoxigenin-AP(vial 8) for 5 min at 10 000 rpm in theoriginal vial prior to each use, and pipet the necessary amount carefully from thesurface. Dilute Anti-
    Digoxigenin-AP 1: 5 000 (150 mU/ml) in Blocking solution.

    Colorsubstrate Add 40 _l of NBT/BCIP (vial 9) to 2 ml of Detection buffer.
    solution Note: Store protected from light!

    (二)对照的标记DNA(4号试剂)系列稀释

    (三)步骤
    1、取以上制备的管2~9各1ul,以及自己标记的探针1ul,点到一小片尼龙膜
    2、通过紫外线或者120度半小时使核酸交连到膜上
    3、膜置塑料盒中加Maleic acid buffer 20ml ,15~25度轻摇孵育2分钟
    4、10ml Blocking solution 孵育30分钟
    5、10ml Antibody solution 孵育30分钟
    6、10ml Washing buffer 洗2次,每次15分钟
    7、10ml Detection buffer中平衡2~5分钟
    8、膜在2ml新鲜配制的 Colorsubstrate solution 中避光孵育。显色期间避免摇动
    9、中止反应 用TE-buffer或者双蒸水洗5分钟

    蛋白酶K预处理
    三、样品检测与杂交
    (一) 步骤
    1、 稀释供试品及阳性对照DNA,点膜
    2、 通过紫外线或者120度半小时使核酸交连到膜上
    3、 将标记好的探针稀释到约25ng/ml, 煮沸5分钟后迅速冰浴
    4、膜放入预热好的预杂交液(3.5ml/100cm2)中,充分混匀,避免起泡
    5、倒掉预杂交液,加入杂交液及已变性的探针。杂交温度下至少孵育6小时

    四、洗膜
    1、2 × SSC, 0.1% SDS , 15-25° C,洗膜2次,每次5分钟。
    2、0.5× SSC, 0.1% SDS ,预热至65~68° C,洗膜2次,每次5分钟

    五、结果检测
    (一) 试剂配制
    Solution Composition Preparation
    Washing buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; pH 7.5 (20° C); 0.3% (v/v) Tween 20
    Maleic acid buffer 0.1 M Maleic acid, 0.15 M NaCl; adjustwith NaOH (solid) to pH 7.5 (20° C)
    Detection buffer 0.1 M Tris-HCl, 0.1 M NaCl, pH 9.5 (20° C)

    TE-buffer 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0
    Blocking stock solution Dissolve Blocking reagent (bottle 10) 10% (w/v) in Maleic
    (10 × conc.) acid buffer underconstantly stirring on a heating block(65°C) or heat in a microwave oven,autoclave. The solution remains opaque

    Blocking solution Prepare a 1 × working solution by dilutingthe 10 × Blocking solution1:10in Maleic acid buffer.

    Antibody solution Centrifuge Anti-Digoxigenin-AP(vial 8) for 5 min at 10 000 rpm in theoriginal vial prior to each use, and pipet the necessary amount carefully from thesurface. Dilute Anti-
    Digoxigenin-AP 1: 5 000 (150 mU/ml) in Blocking solution.

    Colorsubstrate Add 40 _l of NBT/BCIP (vial 9) to 2 ml of Detection buffer.
    solution Note: Store protected from light!

    (二) 步骤
    1、Washing buffer洗膜1~5分钟
    2、100ml Blocking solution 孵育30分钟
    3、20ml Antibody solution 孵育30分钟
    4、100ml Washing buffer 洗2次,每次15分钟
    5、20ml Detection buffer中平衡2~5分钟
    6、膜在10ml新鲜配制的 Colorsubstrate solution 中避光孵育。显色期间摇动
    7、中止反应 用TE-buffer或者双蒸水50ml洗5分钟展开
    请高手赐教:
    我想用量子点标记抗体,但是我们实验室没有人做过,所以没总体概念,看了说明书,但是感觉不太直观,
    这个试剂盒好不好用呢?标记效率怎样?有没有用过改试剂盒的人希望能帮助我。