Description TurboGFP-Trap Magnetic Agarose is an affinity reagent for immunoprecipitation (IP) of TurboGFP fusion proteins. It consists of an anti-TurboGFP VHH/ Nanobody that is coupled to magnetic agarose beads.
Specificity TurboGFP, CopGFP (P. plumata), maxGFP, maxFP-Green The TurboGFP-Trap does not bind to jellyfish GFP and derivatives, see: Fluorescent protein specificity table
Applications Immunoprecipitation/ Co-IP Mass spectrometry ELISA On-bead enzyme assays
德国chromotek公司成立于2008年，致力于细胞生物学和蛋白质组学的研发与研究，公司拥有强大的研发团队，有先进的生物制剂，主要主要使命是花费较少的时间和成本，使客户获得得高质量的实验数据。
ChromoTekGmbH开创了一类新的免疫学研究工具，该工具源自细胞生物学和蛋白质组学的单域骆驼抗体。ChromoTek成立于2008年，由UlrichRothbauer周边的一个研究团队从慕尼黑路德维希马克西米利安大学（LMU）分拆而来，现已迅速发展成为著名的创新试剂供应商和大型制药公司值得信赖的服务提供商。我们的管理团队结合了互补的技能和经验，形成了持续增长的基础。 ChromoTek的产品分类： 一、Nano-Trap系列；以产品结合物为标准，包含磁珠系列和琼脂糖珠子系列，还有96板系列；抗体结合物包括GFPTrap，RFPTrap，GSTTrap，Dnmt1-Trap；Mk2-Trap；P53-Trap；Mdm4/HdmX-Trap 二、Booster系列；含GFPboosterRFPbooster； 三、可用于HCA实验的Chromobodies(质粒或细胞系形式)； 四、 高品质抗体（标签蛋白抗体和普通抗体）； 德国ChromoTek公司成立于2008年，致力于细胞生物学和蛋白质组学的研发与研究。产品包括单克隆抗体、重组单域抗体、荧光抗体、GFP或RFP连接蛋白等。 ChromoTek有限公司先驱来自单个域骆驼抗体的免疫学研究工具，为细胞生物学和蛋白质组学研究开辟了新的一类。ChromoTek成立于2008年，作为一个分拆上市的路德维希 - 马克西米利安慕尼黑大学（LMU）的一个研究小组围绕乌尔里希Rothbauer，已迅速发展成为一个**的创新试剂供应商，以及作为一个值得信赖的服务提供商，为大型制药公司。我们的管理团队结合互补的技能和经验，形成持续增长的趋势。我们的使命是更好发展，并促进我们的客户在世界各地的研究开发和商业化。正在开发一系列的产品和服务，我们的目标是成为*被认可的在蛋白质组学和活细胞成像领域的***。
ChromoTek
蚂蚁淘生物科技有限公司是德国ChromoTek公司的中国合作伙伴和签约总代理商
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TUNEL的缺点是：1），操作要求高，组织样本需要固定（即使是培养细胞，也需要固定），不恰当的固定方法对实验结果影响很大，导致背景过高或者信号过弱，因此实验结果重复性不好;有的人花上半年做一个体内的TUNEL是一点都不奇怪的。2），大部分诱导凋亡的药物也引起DNA损伤，从而产生DNA断裂，易引入假阳性;3）凋亡晚期细胞基因组大量降解，导致TUNEL标记反而减少，因此此法反应的是早期凋亡比例，不能严格反应凋亡比例，属于半定量研究。
尽管有如此多缺点，但由于其是目前为数不多的能原位标记凋亡细胞的方法，因此用于组织体内凋亡研究仍然是首选。但体外细胞实验研究，很少用此法。
凋亡检测中，TUNEL并不是过时的方法，现在研究凋亡的文献仍然常见。而且相反，还比以前多一点，因为现在体内实验越来越多了，甚至线虫的凋亡研究，都用TUNEL。
凋亡研究中，的确有几种方法过时了，当然是因为有替代方案了，比如DNAladder，电镜。至于AnnexinV是不能用来和TUNEL一起评论的，前者用于细胞，而且主要是悬浮细胞，后者主要用于组织。虽然有人也做镜下的AnnexinV观察，TUNEL的细胞staining，但这都不是主流。
回到lz的原帖，的确如大家所言，做贴壁细胞，不推荐用TUNEL。如果是经典凋亡途径，只是确定比例，用最经典，最常用的subG1法即可，如果是不确定是否是凋亡，用AnnexinV，不过贴壁细胞用此法，要注意消化时间。
想请问下那个公司有专门的蛋白质荧光标记试剂盒出售。最好的是CY5的，我准备做三标。性价比越高越好
那些做过的前辈们指导一下。
探针
ddH2O36.25ul
buffer(瓶3)5ul
核苷酸混合液（含DIG-dUTP）(瓶2)2.5ul
dNTPStockSolution(瓶4)2.5ul
引物F1ul(10pmol/ul)
R1ul(10pmol/ul)
酶（瓶1）0.75ul
DNA1ul（100pg）
程序：35个循环，退火温度55度。
第一次通过探针标记得到了相应的PCR标记产物，亮度和对照相当，片段大小比标记的探针模板大，证明整个过程应该没有问题。
但一个月后重新用相同的体系，相同的程序，只是探针模板的量不同却什么都扩不出来。不知道问题出在哪了！
其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
操作步骤：
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
在弱碱性（pH 8~9）、暗处、室温或40℃条件下，氨基酸的α-氨基很容易与2,4-二硝基氟苯（缩写为FDNB或DNFB）反应，生成黄色的2,4-二硝基苯氨基酸（dinitrophenyl amino acid，简称DNP-氨基酸）。多肽或蛋白质的N-末端氨基酸的α-氨基也能与FDNB反应，生成一种二硝基苯肽（DNP-肽）。由于硝基苯与氨基结合牢固，不易被水解，因此当DNP-多肽被酸水解时，所有肽键均被水解，只有N-末端氨基酸仍连在DNP上，所以产物为黄色的DNP-氨基酸和其它氨基酸的混合液。混合液中只有DNP-氨基酸溶于乙酸乙酯，所以可以用乙酸乙酯抽提并将抽提液进行色谱分析，再以标准的DNP-氨基酸作为对照鉴定出此氨基酸的种类。因此2,4-二硝基氟苯法可用于鉴定多肽或蛋白质的N-末端氨基酸。
