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GPCR靶点与代谢性疾病研究
来自 : mayitao
英文名称:细胞荧光标记试剂盒(CellBriteCytoplasmicMembrane-LabelingKit)总访问:1372
亲脂性碳菁类染料DiI,DiOandDiD通过径向扩散穿过细胞膜并对整个细胞进行染色,被用来有效持久的标记细胞膜和间质膜结构。这类细胞示踪剂以较低的细胞毒性(对细胞活性、发育或其它基本的生理特性无明显影响)和抗胞间转移性(不会从标记细胞扩散到非标记细胞,避免了交叉染色)在以下实验中广泛使用:细胞融合实验细胞粘附细胞迁移DII以及与其结构类似的PKH26荧光染料的亲脂性给实验的实际操作(需要甘露醇调剂渗透压等)带来了繁琐的步骤,为了提高科研者的工作效率,Biotium的细胞膜荧光示踪试剂盒(CellBriteCytoplasmicMembraneStainingKits)应运而生了,盒中的即用型染色试剂直接加入带有培养基的悬浮细胞或者贴壁细胞进行染色,大大方便了广大工作者,而且在荧光颜色上也可进行一些根据需要的选择:橘红色荧光(DiI)绿色荧光(NeuroDiO)红色荧光(DiD)蓝色荧光(DiB)还可大胆设计一下:双染料混合,标记细胞,对细胞的融合和稳定聚集的研究是不是带来了新的色彩?显微镜的滤光片配置这里要特别说明一下,避免临时抓狂!显微镜MicroscopyDiIandNeuroDiO=OmegaXF52,Chroma51004DiIandDiD=OmegaXF92,Chroma51007DiI,NeuroDiOandDiD=OmegaXF93,Chroma61005DiB,NeuroDiOandDiI=Chroma61000V2
流式细胞术FlowCytometryCellslabeledwithDiI,NeuroDiOandDiDcanbeanalyzedusingtheconventionalFL2,FL1andFL3flowcytometerdetectionchannels,respectively.备注:OmegafiltersaresuppliedbyOmegaOptical,Inc.(www.omegafilters.com).ChromafiltersaresuppliedbyChromaTechnologyCorp.(www.chroma.com).DiI和DiO的荧光最大激发与发射波长相差65nm,因此两者可组合进行双色标记。DiO的染色强度通常弱于DiI,在固定的组织中有时会完全阴性。DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料,常用于神经元的示踪。DiA可与DiI双色标记神经细胞。在固定的组织中,当DiO染色失败时使用DiA可能会获得良好的标记效果。DiD是DiI的类似物,其荧光激发和发射波长明显红移,该特性有利于避免自发荧光和光毒性作用,且使该染料适合双色标记。DiR的荧光最大激发与发射波长处于近红外区,许多组织在此区光学表现为透明。产品选购:
References1.JCellBiol103,171(1986);2.JCellBiol135,63(1996);3.Cytometry21,160(1995);4.JBiolChem273,33354(1998);5.JCellBiol136,1109(1997);6.AnticancerRes18,4181(1998);7.JImmunolMethods156,179(1992);8.MethodsCellBiol33,469(1990);9.USPatent4,783,401.

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