商品信息
联系客服
郑重提醒：
无质量问题不接受退换货，下单前请仔细核对信息。
下单后请及时联系客服核对商品价格，订单生效后再付款。
Encapsula/Immunodox®-Biotin (PEGylated)/2-ml/IMD-1009-2-ml
免费咨询热线
4000-520-616
Description
Biotinylatedliposomescanbeconjugatednoncovalentlywith(strept)avidinthrougheitherdirectinteractionwiththeprotein/antibodyconjugatedto(strept)avidinorbycouplingwithotherbiotinylatedproteinsusing(strept)avidinasabridgingmolecule. Bothavidinand(strept)avidinformstrongnoncovalentbondwithbiotin.Thehighresistancetobreakdownmakesthemveryusefulinbioconjugatechemistry.However,streptavidinhasreplacedavidininmostbioconjugationapplicationsduetoitsenhancedproperties.NeutrAvidin(Thermofisher)isamodifiedavidinwithoutnegativeproperties.Itperformsmuchbetterthanoriginalavidinandsometimesstreptavidin.
Inordertoexploitthehigh-affinityinteractionofbiotinwith(strept)avidin,atwo-step“sandwich”protocol(MethodA)hasbeendevelopedforthepreparationoftargetedimmunoliposomes.Inthismethodology,(strept)avidinisfirstattachedtobiotinylatedliposomes,thenabiotin-modifiedprotein/antibodyisintroducedintothebiotinylated(strept)avidin-labeledliposomes.Thisnoncovalentapproachisrapid,extremelyversatileandapplicabletonumeroustargetingligandsofinterestwithrespecttoinvitroandinvivoapplications.Alternatively,insteadofforminga(strept)avidinbridge,(strept)avidinmoleculecanalsobecovalentlyconjugatedtoantibodyorligand(MethodB)andnon-covalentlyboundtoliposomescontainingbiotinonsurfaceinordertoformimmunoliposomes.
Immunodox®-BiotinisaPEGylatedproduct.Forotheraminereactive(PEGylatedandnon-PEGyalatedproducts)andalsoImmunodox®productssuitableforothertypesconjugationmethodsseehere.
FormulationInformation
Immunodox®-Biotin(PEGylated)
| LipidComposition | Concentration(mg/ml) | Concentration(mM) | MolarRatioPercentage |
|---|---|---|---|
| Total | 15.61mg/ml | 21.58mM | 100 |
| HydrogenatedSoyPC | 9.58 | 12.22 | 57 |
| Cholesterol | 3.19 | 8.25 | 38 |
| DSPE-PEG(2000) | 2.5 | 0.89 | 4 |
DSPE-PEG(2000)-Biotin | 0.34 | 0.22 | 1 |
| Buffers,LiposomeSizeandEncapsulatedDrugConcentration | Specification |
|---|---|
| InsideBuffer | AmmoniumSulfate |
| OutsideBuffer | PhosphateBufferedSaline |
| pH | 7.4 |
| LiposomeSize | 100nm |
| EncapsulatedDoxorubicin | 2mg/ml(3.45mM) |
ConjugationProtocol
MaterialsandEquipment
InordertoconjugateyourantibodyorproteintaggedwithbiotintoImmunodox®-Biotinliposomesyouwillneed:
- Laboratorymagneticstirrerisneededfordialysis.
- Vortexlaboratorymixerisrecommendedtohave.
- Float-A-Lyzer®withaproperMWCOthateasilyallowsthecleanupofyourliposomeconjugatedligandfromfreeandnon-conjugatedprotein/peptide/ligand.YouneedtomakesurethattheMWCOisbelow1,000,000dalton.At1,000,000daltontheporesizeonthedialysismembranegetscloseto100nmandthereforeyourliposomescanbedialyzedout.Youcannotusedialysiscassettesblindly.Pleaseunderstandthetechniquebeforeusingeitherspincolumnordialysiscassette.IfyoudonotusethecorrectMWCOyoucanloseyourentireprep.ForthisprotocolwerecommendMWCOof300,000dalton.
PreparationMethods
MethodA.Twostep“Sandwich”protocol;Creating(strept)avidinbridge
- ThetotallipidconcentrationinImmunodox®-Biotinis21.58mM.1%molofthelipidinliposomescontainsPEG-Biotingroupandonlyhalfofthemareexposedtotheoutsideoftheliposomes,whichisequalto0.11mMofreactiveconjugablelipid.For2mlvolumeliposome,thisisequalto2.20×10-7mol,andfor5mlvolumeliposome,thisisequalto5.50×10-7molofPEG-Biotin.PourImmunodox®-Biotininaconicaltubeandvortexitgentlywithonehand.Usetheotherhandandslowlyaddthe(strept)avidinsolutionuntilthetwosolutionaremixed.Youneedtouse10-foldmolarexcessof(strept)avidintoPEG-Biotinlipid.Incubatethesolutionfor1hatroomtemperature.
- Removetheunbound(strept)avidinfromtheprepbydialysis.Wepreferdialysistosizeexclusioncolumns.DialysisisamuchslowerprocessbuttherewillbeminimumlossofImmunodox®-Biotinaftertheprepiscleanedfromunbound(strept)avidin.Spincolumnsaremuchfaster;however,youcaneasilyloseover50%oftheliposomesonthespincolumn.WerecommendusingFloat-A-Lyzer®dialysiscassettewith300KMWCOfromSpectrumLabs.DialyzetheImmunodox®-Biotin/(strept)avidinsolutionin1literofPBSatpH7.4for8hours.Changethedialysisbufferwithafresh1literofPBSandletitdialyzeforanother8hours.Afterthisstep,Immunodox®-Biotin/(strept)avidinisseparatedfromunbound(strept)avidin.
- PourImmunodox®-Biotin/(strept)avidininaconicaltubeandvortexitgentlywithonehand.Usetheotherhandandslowlyaddthebiotinylatedantibodyorbiotinylatedligandsolutionuntilthetwosolutionaremixed.Youneedtouse2-foldmolarexcessofbiotinylatedantibody(ligand)toPEG-Biotinlipid.Incubatethesolutionfor1hatroomtemperature.
- Removethenon-conjugatedantibodyorligandfromtheprepbydialysisbyusingFloat-A-Lyzer®dialysiscassettewith300KMWCOfromSpectrumLabs.Dialyzetheimmunoliposomesolutionin1literofPBSatpH7.4for8hours.Changethedialysisbufferwithafresh1literofPBSandletitdialyzeforanother8hours.Afterthisstep,yourcleanedupimmunoliposomesolutionisreadytouse.
MethodB.Usingaantibody/protein/ligandwhichisalreadycovalentlyattachedto(strept)avidin(lesscommonmethod)
- ThetotallipidconcentrationinImmunodox®-Biotinis21.58mM.1%molofthelipidinliposomescontainsPEG-Biotingroupandonlyhalfofthemareexposedtotheoutsideoftheliposomes,whichisequalto0.11mMofreactiveconjugablelipid.Fora2mlvolumeliposomethisisequalto2.20×10-7molandfora5mlvolumeliposomesthisisequalof5.50×10-7molofPEG-Biotin.PourImmunodox®-Biotininaconicaltubeandvortexitgentlywithonehand.Usetheotherhandandslowlyaddtheantibodyconjugated(strept)avidinuntilthetwosolutionaremixed.Youneedtouse2-foldmolarexcessofantibodyconjugated(strept)avidin.Incubatethesolutionfor1hatroomtemperature.
- Removethenon-conjugatedantibodyorligandfromtheprepbydialysisbyusingFloat-A-Lyzer®dialysiscassettewith300KMWCOfromSpectrumLabs.Dialyzetheimmunoliposomesolutionin1literofPBSatpH7.4for8hours.Changethedialysisbufferwithafresh1literofPBSandletitdialyzeforanother8hours.Afterthisstep,yourcleanedupimmunoliposomesolutionisreadytouse.
LiposomeParticleCalculator
Immunodox®liposomesareunilamellarandsizedto100nm.Themolarconcentrationofliposomeis21.58mM.Byhaving liposomediameter(nm)andlipidconcentration(µM),youcancalculatethetotalnumberofthelipidsinoneliposomeandthenumberoftheliposomesinonemilliliteroftheliposomesolution.Tousethecalculatorclick here.
TechnicalNotes
- Doxorubicinisafluorescentmoleculewithλex470nmandλem585nm.Ifyouareusingafluorescenttagonyourantibodyorligand,thenyouneedtomakesurethattheywillnotinterferewitheachother.
- Toavoidprecipitationoflipidinthenoncovalentapproach,careneedstobeemployedinmaintainingahighratioof(strept)avidintobiotin-liposomes.Otherwise,thecouplingefficiencieswouldberelativelylow.
- Alternatively, Sepharose®CL-4BsizeexclusionspincolumncanbeusedinsteadofFloat-A-Lyzer®.However,keepinmindthatalargeamountofliposomeswillbelossonthecolumnduringtheprocess.Dialysisisamuchslowerprocessthatsizeexclusionhowevertherewillbeminimallossofliposomes.
- Ifyoudecidetouseadialysiscassette,youwillneedtomakesurethattheMWCOisbelow1,000,000dalton.At1,000,000dalton,theporesizeonthedialysismembranegetscloseto100nmandtherefore,yourliposomescanbedialyzedout.Youcannotusedialysiscassettesandspincolumnsblindly.Theycomeinvarioussizesandyouneedtochoosethecorrectsizewisely.
- IfyouareusingaligandorpeptidethatishydrophobicthenitisrecommendedtosolubilizeitinDMSOorDMFandthenaddthebuffertoit.Itisrecommendednottousemorethan5%volumeofDMSOorDMFinthesolution.DMFandDMSOarebothcompatIBLewithliposomesandtheyarealsomiscibleinwater.Otherorganicsolventsuchasethanolandchloroformarenotcompatiblewithliposomesandwillcausetheliposomestolyse.IfyouendupusingDMSOorDMFthenaftertheconjugationreactionisdone,youneedtoremoveDMSOandDMFfromtheliposomes.InordertodothatyouneedtouseadialysiscassettethatismadefromREGENERATEDCELLULOSEMEMBRANE. NOTE:NotallmembranesarecompatiblewithDMFandDMSO.Werecommendusinga Slide-A-Lyzer™MINIDialysisDevice withMWCOof2KmadefromregeneratedcellulosemembranemanufacturedbyThermoFisher.AfterDMSOorDMFisremoved,youcanuse Float-A-Lyzer® dialysisdeviceforthefinalstepofcleaninguptheprep
- Liposomesshouldbekeptat4°CandNEVERbefrozen.
Database
Directlinktothedatabasepageforeasynavigation:ImmunoliposomesConjugationDatabase
Appearance
Immunodox®-Biotinisaredtranslucentliquidmadeofnanosizeunilamellarliposomes.Usuallyduetothesmallsizeofliposomesnosettlingwilloccurinthebottomofthevial.Theliposomesarepackagedinanambervial.
EducationalVideo
Ordering/ShippingInformation
- Allliposomebasedformulationsareshippedonblueiceat4°Cininsulatedpackagesusingovernightshippingorinternationalexpressshipping.
- LiposomesshouldNEVERbefrozen.Icecrystalsthatforminthelipidmembranecanrupturethemembrane,changethesizeoftheliposomesandcausetheencapsulateddrugtoleakout.Liposomesinliquidformshouldalwaysbekeptintherefrigerator.
- ClientswhoorderfromoutsideoftheUnitedStatesofAmericaareresponsiblefortheirgovernmentimporttaxesandcustomspaperwork.EncapsulaNanoSciencesisNOTresponsibleforimportationfeestocountriesoutsideoftheUnitedStatesofAmerica.
- WestronglyencouragetheclientsinJapan,Korea,TaiwanandChinatoorderviaadistributor.Toughcustomsclearanceregulationsinthesecountrieswillcausedelayincustomclearanceoftheseperishableformulationsifordereddirectlythroughus.Distributorscaneasilyclearthepackagesfromcustoms.Toseethelistofthedistributorsclickhere.
- ClientsorderingfromuniversitiesandresearchinstitutesinAustraliashouldkeepinmindthattheliposomeformulationsaremadefromsyntheticmaterialandtheformulationsdonotrequirea“permittoimportquarantinematerial”.LiposomesareNOTBIOLOGicalproducts.
- Ifyouwouldlikeyourinstitute’sFedExorDHLaccounttobechargedforshipping,thenpleaseprovidetheaccountnumberatthetimeofordering.
- EncapsulaNanoScienceshasnocontroloverdelaysduetoinclementweatherorcustomsclearancedelays.YouwillreceiveaFedExorDHLtrackingnumberonceyourorderisconfirmed.ContactFedExorDHLinadvanceandmakesurethatthepaperworkforcustomsisdoneontime. AllsubsequentshippinginquiriesshouldbedirectedtoFederalExpressorDHL.
StorageandShelfLife
Storage
Immunodox®productsshouldalwaysbestoredatinthedarkat4°C,exceptwhenbroughttoroomtemperatureforbriefperiodspriortoanimaldosing.DONOTFREEZE.IfthesUSPensionisfrozen,theencapsulateddrugcanbereleasedfromtheliposomesthuslimitingitseffectiveness.Inaddition,thesizeoftheliposomeswillalsochangeuponfreezingandthawing.
ShelfLife
Immunodox®-Biotin(PEGylated)ismadeondailybasis.Thebatchthatisshippedismanufacturedonthesameday.Itisadvisedtousetheproductswithin4monthsofthemanufacturingdate.
ReferencesandbackgroundreADIng
1.HermansonGT.Bioconjugatetechniques.Academicpress;2013Jul25.
2.LoughreyHC,ChoiLS,WongKF,CullisPR,BallyMB.Preparationofstreptavidin-liposomesforuseinligand-specifictargetingapplications.Liposometechnology.1993;3:163-78.
3.HauglandRP,BhalgatMK.Preparationofavidinconjugates.ImmunochemicalProtocols.1998:185-96.
蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
ebiomall.com
公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
蚂蚁淘承诺
正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购： 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2018-05-03
型号 品牌 厂商性质 代理商 所在地 上海市 ...上海蚂蚁淘生物科技有限公司 | 第 10年 经营模式:...usbio/us biological/usbiological D9806-50L ... 查看更多
>
2021-09-07
上海哈灵生物科技有限公司在发布的组织巯基丙酮酸硫基转移酶（3-mercaptopyruvate sulfurtransferase；3-MST）活性比色法定量检测试剂盒供应信息，浏览与组织巯基丙酮酸硫基转移酶（3-mercaptopyruvate sulfurtransferase；3-MST）活性比色法定量检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与组织巯基丙酮酸硫基转移酶（3-mercaptopyruvate sulfurtransferase；3-MST）活性比色法定量检测试剂盒相关的内容。 查看更多
>
2018-05-18
(德国)emfret (美国)Covance (美国)signalchem Lifescien/signalchem Lifesciences (美国)idtdna (美国)zeptometrix (美国)Macrocyclics (美国)Accurate Chemical (... 查看更多
>
2021-07-17
"人铁蛋白ELISA检测试剂盒,人(FE)ELISAkit实验特点:敏感性高;特异性强;重复性好;试剂稳定、易保存，操作简便。了解更多上海远慕生物科技 查看更多
>
2021-07-22
喜讯！！！ 卓诚惠生自主研发的十四种食源性致病菌多重聚合酶链式反应（PCR）检测试剂盒和小肠结肠炎耶尔森氏菌多重聚合酶链式反应（PCR）检测试剂盒经过层层选拔，通过2016年北京市新技术新产品（服务）认证，获得北京市科学技术委员会颁发的《北京市新技术新产品（服务）证书》和牌匾。 A226N 十四种食源性致病菌多重聚合酶链式反应（PCR）检测试剂盒（专利号：ZL201310425507.7），可在3个小时内快... 查看更多
>
2021-09-06
上海晶抗生物工程有限公司 在发布的抗药蛋白(SRI)ELISA检测试剂盒供应信息，浏览与抗药蛋白(SRI)ELISA检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与抗药蛋白(SRI)ELISA检测试剂盒相关的内容。 查看更多
>
2018-04-27
人环氧合酶2(COX-2)ELISA试剂盒仅供研究使用 人环氧合酶2(COX-2)ELISA试剂盒实验目的本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人环氧合酶2（COX-2）的含量。有效期：6个月保存条件：2-8℃ 实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人环氧合酶2（COX-2）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物T 查看更多
>
2021-09-14
广州市益满生物科技有限公司在发布的疟疾快速检测试剂盒供应信息，浏览与疟疾快速检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与疟疾快速检测试剂盒相关的内容。 查看更多
>
2018-12-26
/* Style Definitions */ table.MsoNormalTable{mso-style-name:普通表格;mso-tstyle-rowband-size:0;mso-tstyle-colband-size:0;mso-style-noshow:yes;mso-style-parent:""; 查看更多
>
2018-05-03
呋喃妥因快速检测试剂盒 呋喃妥因快速检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测蜂蜜、鱼、虾、禽、肝脏等中的呋喃妥因代谢物（AHD）残留量。规 格：96T/盒检测样本：蜂蜜/组织/牛奶/奶粉/鸡蛋/蛋粉检测方法：酶联免疫法 呋喃妥因快速检测试剂盒 贮存条件：2～8℃保 质 期：12个月产品介绍相关产品技术文章文档下载 呋喃妥因快速检测试剂盒& 查看更多
>
2018-05-07
(德国)emfret (美国)Covance (美国)signalchem Lifescien/signalchem Lifesciences (美国)idtdna (美国)zeptometrix (美国)Macrocyclics (美国)Accurate Chemical (... 查看更多
>
2021-08-31
上海雅吉生物科技有限公司在发布的大肠菌群快速纸片检测试剂盒供应信息，浏览与大肠菌群快速纸片检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与大肠菌群快速纸片检测试剂盒相关的内容。 查看更多
>
常见问题
蚂蚁淘所售产品均为正品吗？
蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
Ebiomall是跨境直采平台，我们直接从厂家采购，自己的团队负责国际物流和清关，中间没有第三方，蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品，假一罚十。
下单后可以修改订单吗？
未确认状态的订单可以修改，打开“订单详情”页面，点击右上角的“修改订单”即可，若已审核确定，则订单无法修改。
商品几天可以发货？
现货产品付款审核后即可发货,大部分期货产品在3周左右即可到货,提供时必达服务的产品订单审核十天内即可发货。
订单如何取消？
如订单处于未确定状态，进入“我的订单"页面，找到要取消的订单，点击“取消订单”按钮。
可以开发票吗？
本网站所售商品都是正规清关，均开具13%正规发票，发票金额含配送费金额，另有说明的除外。
如何联系商家？
蚂蚁淘任何页面都有在线咨询功能，点击“联系客服”、“咨询”或“在线咨询”按钮，均可咨询蚂蚁淘在线客服人员，
或拨打4000-520-616，除此之外客户可在 联系我们页面找到更多的联系方式。
收到的商品少了/发错了怎么办？
同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出，可能不会同时送达，建议查看订单详情是否是部分发货状态；如未收到，可联系在线客服或者致电4000-520-616。
退换货/维修需要多长时间？
一般情况下，退货处理周期为客户收到产品一个月内（以快递公司显示签收时间为准），包装规格、数量、品种不符，外观毁损、短缺或缺陷，请在收到货24小时内申请退换货；特殊商品以合同条款为准。
商品咨询
葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PDH)活性检测试剂盒(比色法)的应用123
taylorfy2021-07-25
【讨论】乙肝检测试剂盒（时间分辨荧光免疫技术先进性）_问答详情_...123
莫莫2021-07-20
1.原子标记技术Eu离子通过双功能螯合剂与被标记物相连，Eu螯合剂分子量仅600左右。因此对被标记的物质影响非常最小。用生物素、酶等大分子标记物，须通过一系列化学反应来检测，其过程受影响因素较多，用......
线粒体膜电位检测试剂盒 （JC10）使用说明123
懒小猫148212018-02-06
操作步骤(仅供参考)：
1、 配制JC-1染色工作液：
取适量JC-1 Stain (200×)，按照每50μl JC-1 Stain (200×)加入8ml ddH2O的比例稀释JC-1，剧烈Vortex充分溶解并混匀JC-1。然后再加入2ml JC-1 Buffer(5×)，混匀后即为JC-1染色工作液。6孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml，其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推。
2、 设置阳性对照：
推荐CCCP(10mM)加入到细胞培养液中处理细胞。随后按照下述方法装载JC-1，进行线粒体膜电位的检测。对于特定的细胞，CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料确定。
3、对于悬浮细胞：
a. 取1～6×105细胞，重悬于0.5ml细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
b. 加入0.5ml JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育。
c. 在孵育期间，按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入4ml蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 Buffer(1×)，并放置于冰浴。
d. 37℃孵育结束后， 4℃ 600g离心3～4min，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
f. 再用JC-1 Buffer(1×)重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
4、对于贴壁细胞：
注意：对于贴壁细胞，如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测，应先收集细胞，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
a.吸除6孔板培养液，根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次，加入1ml细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。
b. 加入1ml JC-1染色工作液，充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育。
c. 在孵育期间，按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 Buffer(1×)，并放置于冰浴。
d. 37℃孵育结束后， 吸除上清，用JC-1 Buffer(1×)洗涤2次。
e. 加入2ml细胞培养液，培养液中可以含有血清和酚红。
f. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。
5、对于纯化的线粒体：
a. 把配制好的JC-1染色工作液再用JC-1 Buffer(1×)稀释5倍。
b. 0.9ml 5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1ml总蛋白量为10～100μg纯化的线粒体。
c. 用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测：混匀后直接用荧光分光光度计进行时间扫描，激发波长为485nm，发射波长为590nm。如果使用荧光酶标仪，激发波长不能设置为485nm时，可以在475～520nm范围内设置激发波长。另外，也可以参考下面步骤6中的波长设置进行荧光检测。
d. 用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察：方法同下面的步骤6。
6、荧光观测和结果分析：
检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm，发射光设置为530nm；检测JC-1聚合物时，可以把激发光设置为525nm，发射光设置为590nm。出现红色荧光说明线粒体膜电位比较正常，细胞的状态也比较正常。
注意事项：
1、 JC-1 Stain(200×)应完全溶解混匀后使用，但应避免反复冻融。必须先把JC-1 Stain(200×)用ddH2O充分溶解混匀后，才可加入JC-1 Buffer(1×)。不可先配制JC-1 Buffer(1×)再加入JC-1 Stain(200×)，否则导致JC-1很难充分溶解，严重影响后续的检测。
2、 对于6孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
3、 装载完JC-1后用JC-1 Buffer(1×)洗涤时，尽量使JC-1 Buffer(1×)保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
4、 勿把JC-1 Buffer(5×)全部配制成1×，因为操作过程中需直接使用JC-1 Buffer(5×)。
5、 如JC-1 Buffer(5×)中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
6、 CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，有一定毒性，请注意小心防护。
1、 配制JC-1染色工作液：
取适量JC-1 Stain (200×)，按照每50μl JC-1 Stain (200×)加入8ml ddH2O的比例稀释JC-1，剧烈Vortex充分溶解并混匀JC-1。然后再加入2ml JC-1 Buffer(5×)，混匀后即为JC-1染色工作液。6孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml，其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推。
2、 设置阳性对照：
推荐CCCP(10mM)加入到细胞培养液中处理细胞。随后按照下述方法装载JC-1，进行线粒体膜电位的检测。对于特定的细胞，CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料确定。
3、对于悬浮细胞：
a. 取1～6×105细胞，重悬于0.5ml细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
b. 加入0.5ml JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育。
c. 在孵育期间，按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入4ml蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 Buffer(1×)，并放置于冰浴。
d. 37℃孵育结束后， 4℃ 600g离心3～4min，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
f. 再用JC-1 Buffer(1×)重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
4、对于贴壁细胞：
注意：对于贴壁细胞，如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测，应先收集细胞，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
a.吸除6孔板培养液，根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次，加入1ml细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。
b. 加入1ml JC-1染色工作液，充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育。
c. 在孵育期间，按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 Buffer(1×)，并放置于冰浴。
d. 37℃孵育结束后， 吸除上清，用JC-1 Buffer(1×)洗涤2次。
e. 加入2ml细胞培养液，培养液中可以含有血清和酚红。
f. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。
5、对于纯化的线粒体：
a. 把配制好的JC-1染色工作液再用JC-1 Buffer(1×)稀释5倍。
b. 0.9ml 5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1ml总蛋白量为10～100μg纯化的线粒体。
c. 用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测：混匀后直接用荧光分光光度计进行时间扫描，激发波长为485nm，发射波长为590nm。如果使用荧光酶标仪，激发波长不能设置为485nm时，可以在475～520nm范围内设置激发波长。另外，也可以参考下面步骤6中的波长设置进行荧光检测。
d. 用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察：方法同下面的步骤6。
6、荧光观测和结果分析：
检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm，发射光设置为530nm；检测JC-1聚合物时，可以把激发光设置为525nm，发射光设置为590nm。出现红色荧光说明线粒体膜电位比较正常，细胞的状态也比较正常。
注意事项：
1、 JC-1 Stain(200×)应完全溶解混匀后使用，但应避免反复冻融。必须先把JC-1 Stain(200×)用ddH2O充分溶解混匀后，才可加入JC-1 Buffer(1×)。不可先配制JC-1 Buffer(1×)再加入JC-1 Stain(200×)，否则导致JC-1很难充分溶解，严重影响后续的检测。
2、 对于6孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
3、 装载完JC-1后用JC-1 Buffer(1×)洗涤时，尽量使JC-1 Buffer(1×)保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
4、 勿把JC-1 Buffer(5×)全部配制成1×，因为操作过程中需直接使用JC-1 Buffer(5×)。
5、 如JC-1 Buffer(5×)中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
6、 CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，有一定毒性，请注意小心防护。
各种细胞用快速支原体检测试剂盒和方法优缺点比较 123
幸福敲门响2021-07-24
实验室要开展支原体检测，方法是PCR法，先要采购试剂盒，用过的同学给推荐一下好用的品牌呗
PKA (Protein Kinase A) Activity Assay Kit:PKA(蛋白激酶A)活性检测...123
yjnyangjining2016-12-09
蛋白质糖基化的检测实验123
苏虹2017-01-19
食品安全检测方面的试剂盒和试纸条,一般哪个公司的比较好,谢谢?123
liuhua2018-01-24
CSY-DS系列多功能食品安全检测仪是深圳市芬析仪器制造有限公司根据客户需求定制的多功能食品安全检测仪，根据不同的客户需求来定制多用途、款式的多功能食品安全检测仪；产品包括有手提式食品安全综合分析仪、手持式多功能食品安全检测仪、精密光谱食品安全分析仪、多通道（8通道、10通道、16通道、48通道、96通道）多功能食品安全检测仪，一体化食品安全执法检测仪；检测样品种类适用蔬菜及其制品、水果及其制品、水产品及其制品、畜禽产品及其制品、乳制品、粮油及其制品、调味品、酒类茶叶及其制品、食用菌、饮料、蛋制品、米豆面制品、糖果糕点类（小食品）、薯类及膨化食品、瓶（桶）装饮用水、婴幼儿配方乳粉、婴幼儿配方食品等食品、水产品及其制品、茶叶、保健品等；用户可根据需求选择检测项目。食品检测项目可达到100种以上。
公司产品通过ISO9001质量体系认证
公司通过ISO14001环境体系认证
公司产品获得国家多项专利证书
公司产品获得计算机软件著作权
核心科技：自主品牌深芬仪器、中国制造、专利产品、技术保障
运输保证:优质EPE珍珠棉缓冲材料、牛皮瓦楞纸、免熏蒸木箱满足出口及国内运输要求。
售后保证:仪器免费保修一年,终身维护值得信赖！
公司产品通过ISO9001质量体系认证
公司通过ISO14001环境体系认证
公司产品获得国家多项专利证书
公司产品获得计算机软件著作权
核心科技：自主品牌深芬仪器、中国制造、专利产品、技术保障
运输保证:优质EPE珍珠棉缓冲材料、牛皮瓦楞纸、免熏蒸木箱满足出口及国内运输要求。
售后保证:仪器免费保修一年,终身维护值得信赖！
Insulin牛胰岛素试剂盒123
傲爆头1592018-02-06
牛胰岛素：自牛胰腺提取而来，分子结构有三个氨基酸与人胰岛素不同，疗效稍差，容易发生过敏或胰岛素抵抗。动物胰岛素唯一的优点就是价格便宜。患者可以轻松负担。
牛胰岛素,是一种多肽
在1965年9月17日我国完成了结晶牛胰岛素的全合成。经过严格鉴定，它的结构、生物活力、物理化学性质、结晶形状都和天然的牛胰岛素完全一样。这是世界上第一个人工合成的蛋白质，为人类认识生命、揭开生命奥秘迈出了可喜的一大步。这项成果获1982年中国自然科学一等奖。
1953年，英国人F. SangerSanger由于测定了牛胰岛素的一级结构而获得1958年诺贝尔化学奖。
牛胰岛素,是一种多肽
在1965年9月17日我国完成了结晶牛胰岛素的全合成。经过严格鉴定，它的结构、生物活力、物理化学性质、结晶形状都和天然的牛胰岛素完全一样。这是世界上第一个人工合成的蛋白质，为人类认识生命、揭开生命奥秘迈出了可喜的一大步。这项成果获1982年中国自然科学一等奖。
1953年，英国人F. SangerSanger由于测定了牛胰岛素的一级结构而获得1958年诺贝尔化学奖。
双荧光素酶报告基因检测试剂盒123
yingli9809802017-04-25
为您找到 67 件线粒体呼吸链复合物活性检测试剂盒 相关产品信息 123
lile_112012-02-04
那位大侠可以帮助小弟，需要检测线粒体呼吸链复合物活性，想找相关试剂盒，找到上海杰美有，不知道有谁用过，效果怎么样，还有没有别的好的推荐。
请教HPV分型试剂盒选择！！ 临床检验123
sky31782018-02-03
二楼说的太对了，我以前也用亚能的试剂做实验，每次都要过夜，太TM烦了，后来遇到港龙生物的来推销，就换了。
抗酒石酸酸性磷酸酶 抗酒石酸酸性磷酸酶批发价格、市场报价...123
dxy_yz4ityu22017-11-07
请问有园友用过碧云天的抗酒石酸酸性磷酸酶检测试剂盒吗？求交流，感谢！
▍
品牌分类
▍
官网分类
