Ex/Em(nm) 460/None MW N/A CAS# N/A Solvent N/A Storage F/D/L Category CellBIOLOG y CellMetabolism Related RedoxEnzymes
Nicotinamideadeninedinucleotide(NAD+)andnicotinamideadeninedinucleotidephosphate(NADP+)aretwoimportantcofactorsfoundincells.NADHisthereducedformofNAD+,andNAD+istheoxidizedformofNADH.ItformsNADPwiththeadditionofaphosphategrouptothe2"positionoftheadenylnucleotidethroughanesterlinkage.NADPisusedinanabolicbiologicalreactions,suchasfattyacidandnucleicacidsynthesis,whichrequireNADPHasareducingagent.ThetrADI tionalNAD/NADHandNADP/NADPHassaysaredonebymonitoringofNADHorNADPHabsorptionat340nm.ThismethodsufferslowsensitivityandhighinterferencesincetheassayisdoneintheUVrangethatrequiresexpensivequartzmicroplate.OurAmplite™NADP/NADPHRatioAssayKitprovidesaconvenientmethodforsensitivedetectionofNADP,NADPHandtheirratio.TheNADPHprobeisachromogenicsensorthathasitsmaximumabsorbanceat~460nmuponNADHreduction.Theabsorbanceincreaseat~460nmisdirectlyproportionaltotheconcentrationofNADPHinthesolution.TheNADPHprobecanrecognizeNADPHinanenzyme-freereaction,andthesignalcanbeeasilyreadbyanabsorbancemicroplatereaderat~460nm.TheAmplite™ColorimetricNADPHAssayKitprovidesasensitiveassaytodetectaslittleas3µMNADPHina100µLassayvolume.Theassaycanbeperformedinaconvenient96-wellor384-wellmicrotiter-plateformat. Thisprotocolonlyprovidesaguideline,andshouldbemodifiedaccordingtoyourspecificneeds. 1.PrepareNADPHstocksolution:
Add200µLofPBSbufferintothevialofNADPHstandard(ComponentC)tohave1mM(1nmol/µL)NADPHstocksolution.
Note:TheunusedNADPHstocksolutionshouldbedividedintosingleusealiquotsandstoredat-20 o C.
2. PrepareNADP/NADPHreactionmixture:
2.1 Add8mLof NADPHProbebuffer(ComponentB-II)tothebottleofNADP/NADPHRecyclingEnzymeMixture(ComponentA) ,andmixwell.
2.2 Add2mL NADPHProbe(ComponentB-I)intoabovebottle(fromStep2.1) andmixwell.
Note:ThisNADP/NADPHreactionmixtureisenoughfor125~200assays.TheunusedNADP/NADPHreactionmixtureshouldbedividedintosingleusealiquotsandstoredat-20 o C.
3.PrepareseriallydilutedNADPHstandards(0to2μM):
3.1 Add2 µLof1mMNADPHstocksolution(fromStep1)into998 µLPBSbuffer(pH7.4)togenerate2 µM(2pmols/ µL)NADPHstandardsolution.
Note:DilutedNADPHstandardsolutionisunstable,andshouldbeusedwithin4hours.
3.2 Take200 µLof2 µMNADPHstandardsolution(fromStep3.1)toperform1:2serialdilutionstoget1,0.5,0.25,0.125,0.0625,0.0313and0 µMseriallydilutedNADPHstandards.
4. RunTotalNADP/NADPHAssay(total400assays/kit):
4.1 Addserialdilutionsof NADPH standardand NADP/NADPH containingtestsamplesintoa white/clearbottom 96-wellmicroplateasdescribedinTables1and2.
Note:Preparecellsortissuesamplesasdesired.LysisBuffer(ComponentG)canbeusedforlysingthecellsforconvenience.(Seeappendixfordetails).
Table1. Layoutof NADPH standardsandtestsamplesina white/clearbottom 96-wellmicroplate
BL
BL
TS
TS
….
….
NS1
NS1
….
….
….
….
NS2
NS2
NS3
NS3
NS4
NS4
NS5
NS5
NS6
NS6
NS 7
NS 7
Note: N S= NADPH Standards,BL=BlankControl,TS=TestSamples.
Table2 .Reagentcompositionforeachwell
NADPHStandard
BlankControl
TestSample
SerialDilutions*:50 μL
PBS:50 μL
50 μL
*Note:AddtheseriallydilutedNADPH standardsfrom0.0313μMto2μMintowellsfromNS1toNS7induplicate . HighconcentrationofNADPH (e.g.,>30μM,finalconcentration)willcausesaturatedsignalandmakethecalibrationcurvenon-linear.
4.2 Add50μLofNADP/ NADPHreactionmixture (fromStep2.2)intoeachwellof NADPH standard,blankcontrol,andtestsamples(fromStep4.1)tomakethetotalNADP/ NADPH assayvolumeof100 µL/well.
4.3 Incubatethereactionatroomtemperaturefor15minutesto2hours,protectedfromlight.
4.4 Monitortheabsorbanceincrease withanabsorbanceplatereader at460 nm .
5. RunNADP/NADPHRatioAssay(total250assays/kit):
5.1 Addseriallydiluted NADPH standardsand/or NADP/NADPH containingtestsamplesintoawhite/clear96-wellmicroplateasdescribedinTables3and4.
Note:Preparecellsortissuesamplesasdesired.LysisBuffer(ComponentG)canbeusedforlysingthecellsforconvenience.
Table3. Layoutof NADPH standardsandtestsamplesina white/clear 96-wellmicroplate
BL
BL
TS
TS
TS(NADPH)
TS(NADPH)
NS1
NS1
….
….
….
….
NS2
NS2
NS3
NS3
NS4
NS4
NS5
NS5
NS6
NS6
NS 7
NS 7
Note: N S= NADP/NADPH Standards;BL=BlankControl;TS=TestSamples;TS(NADPH)= TestSamplestreatedwithNADPHExtractionSolution(ComponentD) for15minutes,thenneutralizedby NeutralizationSolution (ComponentE).
Table4. Reagentcompositionsforeachwell
NADPHStandard
BlankControl
TestSample(NADP/NADPH)
TestSample(NADPHExtract)
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司,前身为ABD Bioquest,总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年,一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术,综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究,引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络,为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
美国AAT BioquestInc.(前身是ABD Bioquest,Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒 的公司。公司致力于光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学,免疫学,细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品,快速的丰富各个领域的产品。
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AATBioquest,Inc. (formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOG yandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.
1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.
Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台,
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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PlasmoTest™提供一种简便、快速、可靠的可视化方法检测细胞培养中的支原体污染。这种方法首次使用细胞检测支原体。PlasmoTest™包括两种主要成分:支原体感受器表达细胞和HEK-Blue™ Detection检测培养基。支原体感受器表达细胞可以通过HEK-Blue™ Detection培养基颜色变化检测支原体。支原体感受器细胞是通过一病原体受体—Toll 样受体2(TLR2)来检测支原体。在支原体存在的情况
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(德国)emfret (美国)Covance (美国)signalchem Lifescien/signalchem Lifesciences (美国)idtdna (美国)zeptometrix (美国)Macrocyclics (美国)Accurate Chemical (...
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Phosphorylation of SubstratesScott T. Eblen, N. Vinay Kumar, and Michael J. WeberDepartment of Microbiology and Cancer Center, University of Virginia Health Sy
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(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛(Nylon Wool Fiber)。2.烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3.装填尼龙毛柱,一次性注射
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1.原子标记技术Eu离子通过双功能螯合剂与被标记物相连,Eu螯合剂分子量仅600左右。因此对被标记的物质影响非常最小。用生物素、酶等大分子标记物,须通过一系列化学反应来检测,其过程受影响因素较多,用......
请问有园友用过碧云天的抗酒石酸酸性磷酸酶检测
试剂盒 吗?求交流,感谢!
有没有比较好的厂家生产的G6PD试剂可用于全自动生化分析仪的?最好是能做
血清 标本。
自己扩增了一个启动子,与pGL-3basic质粒连接,转染 细胞后用双荧光素酶检测试剂盒 检测,检测前需要确定一下转染条件,但是检测试剂盒比较贵,各位大侠是否有简便经济的方法呢?如何确定自己的启动子构建是否成功呢?
我用Promega 公司的双荧光素酶检测试剂盒 (E2920)检测到的firefly萤光素酶活性很低,只有4*10的3次方;海肾萤光素酶活性有10的6次方。
我用Ad293细胞做了转染 ,fireflyluciferase质粒:RanillaLuciferase质粒=0.1ug:0.025ug/一个孔(96孔板),共转染了二天,再进行双萤光素酶检测。
我想了解fireflyluciferase活性用promega的这个E2920-双萤光素酶试剂盒检测得到10的3次方,这种数值正常吗?
我做了3次重复实验,每次firefly萤光素酶活性很低,只有4*10的3次方;而海肾萤光素酶活性有10的6次方。
求指教?fireflyluciferase活性低?会是什么原因呢?
牛胰岛素:自牛胰腺提取而来,分子结构有三个氨基酸与人胰岛素不同,疗效稍差,容易发生过敏或胰岛素抵抗。动物胰岛素唯一的优点就是价格便宜。患者可以轻松负担。 牛胰岛素,是一种多肽 在1965年9月17日我国完成了结晶牛胰岛素的全合成。经过严格鉴定,它的结构、生物活力、物理化学性质、结晶形状都和天然的牛胰岛素完全一样。这是世界上第一个人工合成的蛋白质,为人类认识生命、揭开生命奥秘迈出了可喜的一大步。这项成果获1982年中国自然科学一等奖。 1953年,英国人F. SangerSanger由于测定了牛胰岛素的一级结构而获得1958年诺贝尔化学奖。
操作步骤(仅供参考): 1、 配制JC-1染色工作液: 取适量JC-1 Stain (200×),按照每50μl JC-1 Stain (200×)加入8ml ddH2O的比例稀释JC-1,剧烈Vortex充分溶解并混匀JC-1。然后再加入2ml JC-1 Buffer(5×),混匀后即为JC-1染色工作液。6孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml,其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推。 2、 设置阳性对照: 推荐CCCP(10mM)加入到细胞培养液中处理细胞。随后按照下述方法装载JC-1,进行线粒体膜电位的检测。对于特定的细胞,CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料确定。 3、对于悬浮细胞: a. 取1~6×105细胞,重悬于0.5ml细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。 b. 加入0.5ml JC-1染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育。 c. 在孵育期间,按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入4ml蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 Buffer(1×),并放置于冰浴。 d. 37℃孵育结束后, 4℃ 600g离心3~4min,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。 f. 再用JC-1 Buffer(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。 4、对于贴壁细胞: 注意:对于贴壁细胞,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,应先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。 a.吸除6孔板培养液,根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入1ml细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。 b. 加入1ml JC-1染色工作液,充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育。 c. 在孵育期间,按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 Buffer(1×),并放置于冰浴。 d. 37℃孵育结束后, 吸除上清,用JC-1 Buffer(1×)洗涤2次。 e. 加入2ml细胞培养液,培养液中可以含有血清和酚红。 f. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。 5、对于纯化的线粒体: a. 把配制好的JC-1染色工作液再用JC-1 Buffer(1×)稀释5倍。 b. 0.9ml 5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1ml总蛋白量为10~100μg纯化的线粒体。 c. 用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测:混匀后直接用荧光分光光度计进行时间扫描,激发波长为485nm,发射波长为590nm。如果使用荧光酶标仪,激发波长不能设置为485nm时,可以在475~520nm范围内设置激发波长。另外,也可以参考下面步骤6中的波长设置进行荧光检测。 d. 用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察:方法同下面的步骤6。 6、荧光观测和结果分析: 检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm,发射光设置为530nm;检测JC-1聚合物时,可以把激发光设置为525nm,发射光设置为590nm。出现红色荧光说明线粒体膜电位比较正常,细胞的状态也比较正常。 注意事项: 1、 JC-1 Stain(200×)应完全溶解混匀后使用,但应避免反复冻融。必须先把JC-1 Stain(200×)用ddH2O充分溶解混匀后,才可加入JC-1 Buffer(1×)。不可先配制JC-1 Buffer(1×)再加入JC-1 Stain(200×),否则导致JC-1很难充分溶解,严重影响后续的检测。 2、 对于6孔板中的样品,本试剂盒共可以检测100个样品;对于12孔中的样品,本试剂盒共可以检测200个样品。 3、 装载完JC-1后用JC-1 Buffer(1×)洗涤时,尽量使JC-1 Buffer(1×)保持4℃左右,此时的洗涤效果较好。 4、 勿把JC-1 Buffer(5×)全部配制成1×,因为操作过程中需直接使用JC-1 Buffer(5×)。 5、 如JC-1 Buffer(5×)中有沉淀,必须全部溶解后才能使用,为促进溶解可以在37℃加热。 6、 CCCP为线粒体电子传递链抑制剂,有一定毒性,请注意小心防护。
试剂盒,是指能完成一个特定实验的必需的试剂/器材的集合.试剂盒具有简单、快速、方便,适于现场操作等特点,对基体分析操作技能要求降低,更易实现流水化、标准化管理,有效排除了实验人员主观因素的影响,降低实验过程中的偶然误差,被广泛应用于检测领域. 试剂盒在全球市场上的研发与销售呈快速上升趋势,2005年全球市场销售额超过200亿美元,且以15%左右的速度逐年增长.一方面是试剂盒的迅猛发展,而另一方面试剂盒市场良莠不齐的现象愈加明显,试剂盒的生产、销售及认证认可体制尚不完善,没有相应的标准或质量评价政策.且其灵敏度,稳定性及假阴/阳性控制尚不能满足检测需要,采用试剂盒进行检测的公信度受到质疑. 同时,食品安全领域是当前问题最多、最受关注的领域,这个领域的检测包括了物理、化学、微生物及分子生物学基础理论,无论是按检测原理、用途还是其它分类方式,涉及食品安全检测项目的试剂盒的品种是最全最多的.因此,从该领域着手从事评价制度的研究,便于获得基础性数据结果,并由此推广至动植物检疫及其它领域. 随着H7N9禽流感疫情的不断发散,国家流感中心已经多次发放人感染H7N9禽流感检测试剂,覆盖了全国31个流感网络实验室,并表示,诊断试剂的广泛发放是实现关口前移,控制疫情传播、蔓延的重要手段.而一旦H7N9监测关口继续前移,主动监测范围扩大,病毒检测试剂的需求量将进一步加大. 可采用H7N9亚型禽流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)和H7N9禽流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法),定价分别为48人份/盒和48反应/盒,相比市场此前预期的100-200元之间的价格定位低了很多.在检验方法上,卫纪委提醒,前者需要配备全自动荧光PCR检测仪专用PCR扩增管和核酸分离试剂盒(硅胶膜吸附法)等必须设备及咽拭子样本,后者卫计委推荐采用达安基因生产的核酸提取试剂盒进行检验.
百奥森18分钟霉菌毒素检测试剂盒 ,有需要的可以了解下!多种规格型号可供选择
产品名称
黄曲霉毒素B1(AFB1)酶免检测试剂盒
黄曲霉毒素B1(AFB1)酶免检测试剂盒
赭曲霉毒素A(OTA)酶免检测试剂盒
玉米赤霉烯酮(ZEN)酶免检测试剂盒
玉米赤霉烯酮(ZEN)酶免检测试剂盒
呕吐毒素(DON)酶免检测试剂盒
黄曲霉毒素M1(AFM1)酶免检测试剂盒
总黄曲霉毒素(AFT)酶免检测试剂盒
T-2毒素(T-2)酶免检测试剂盒
伏马毒素B1(FB1)酶免检测试剂盒
G6PD酶活性检测问题:
G6PDHactivityreportedasnmole/min/mL(milliunit/mL):Oneunitistheamountofenzymethatcatalyzestheconversionof1.0µmoleofglucose-6-phosphateto6-phosphoglucono-δ-lactoneandgenerates1.0µmoleofNADH perminuteat37°C.
Sigma和BioVision 的G6PD活性试剂盒 都是检测生成的NADH,请问各位老师,为什么是NADH而不是NADPH呢,此为何解?
CSY-DS系列多功能食品安全检测仪是深圳市芬析仪器制造有限公司根据客户需求定制的多功能食品安全检测仪,根据不同的客户需求来定制多用途、款式的多功能食品安全检测仪;产品包括有手提式食品安全综合分析仪、手持式多功能食品安全检测仪、精密光谱食品安全分析仪、多通道(8通道、10通道、16通道、48通道、96通道)多功能食品安全检测仪,一体化食品安全执法检测仪;检测样品种类适用蔬菜及其制品、水果及其制品、水产品及其制品、畜禽产品及其制品、乳制品、粮油及其制品、调味品、酒类茶叶及其制品、食用菌、饮料、蛋制品、米豆面制品、糖果糕点类(小食品)、薯类及膨化食品、瓶(桶)装饮用水、婴幼儿配方乳粉、婴幼儿配方食品等食品、水产品及其制品、茶叶、保健品等;用户可根据需求选择检测项目。食品检测项目可达到100种以上。 公司产品通过ISO9001质量体系认证 公司通过ISO14001环境体系认证 公司产品获得国家多项专利证书 公司产品获得计算机软件著作权 核心科技:自主品牌深芬仪器、中国制造、专利产品、技术保障 运输保证:优质EPE珍珠棉缓冲材料、牛皮瓦楞纸、免熏蒸木箱满足出口及国内运输要求。 售后保证:仪器免费保修一年,终身维护值得信赖!
实验室要开展支原体检测,方法是PCR法,先要采购试剂盒 ,用过的同学给推荐一下好用的品牌呗