| Overview |  PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 497/520 |
| MW | N/A |
| CAS# | N/A |
| Solvent | N/A |
| Storage | F/D/L |
| Category | CellAnalysis CellCytotoxicity |
| Related | ApoptosisandCytotoxicity CellApoptosis |
| Spectrum | AdvancedSpectrumViewer |
- Culturecellstoanoptimaldensityforapoptosisinductionaccordingtoyourspecificprotocol.Werecommendabout30,000to50,000cells/wellforadherentcellsgrownina96-wellmicroplateculture,orabout1to2x106cells/mLfornon-adherentcells.Atthesametime,cultureanon-inducednegativecontrolcellpopulationatthesamedensityastheinducedpopulationforeverylabelingcondition.
Note:WetreatedHeLacellswith100nM-1µMstaurosporinefor4hourstoinducecellapoptosis.SeeFigure1fordetails. - FixationandPermeABIlization
a.Removecellmedia.
b.Add100μL/well/96-wellplateof4%formaldehydefixativebuffer(notsupplied)toeachwell.
Note:Fornon-adherentcells,adddesiredamount(suchas2x106cells/mL)of4%formaldehydefixativebuffer.
c.Incubateplatesfor20to30minutesatroomtemperature.
d.Removefixative.
Optional:add100μL/well/96-wellplateofthepermeabilizationreagent(0.2%TritonX-100inPBS,notsupplied)afterthefixationifneeded,andincubatetheplatefor10minutesatroomtemperature.
e.WashthecellswithPBS2-3times.
Optional:YoumayalsoprepareapositivecontrolforTUNELreactionusingDNAaseIbydigestingcellswithDNAaseIfor30minatroomtemperaturebeforeproceedtoTUNELreaction(Step3) - TUNELreaction
a.Preparereactionmixturejustbeforeusebasedonthenumberofsamplestobeassayed:ReactionComponents VolumePerWell 100XTunnelyte™Green(ComponentA) 0.5µL ReactionBuffer(ComponentB) 50µL Totalvolume 50.5µL
Note:Eachcelllineshouldbeevaluatedonanindividualbasistodeterminetheoptimalcelldensity.
b.Add50µLofthereactionmixture(fromStep3.1)toeachsampleandincubateat37ºCfor60minutes.
c.Removethereactionmixture,andwashthecells3-5timeswith200µL/wellofPBS - Monitorthefluorescenceintensitybyfluorescencemicroscope,flowcytometer,orfluorescencemicroplatereaderatEx/Em=490/520nm.
- Optional:Stainthenucleuswith1XHoechst(ComponentC,Ex/Em=350/460nm)forimageanalysis.
| References&Citations |  CitationExplorer |
Vaccarinalleviateshypertensionandnephropathyinrenovascularhypertensiverats
Authors:WeiweiCai,ZhenpengZhang,YiqiHuang,HaijianSun,LiyingQiu
Journal:ExperimentalandTherapeuticMedicine(2018):924--932
CO-releasingmolecules-2attenuatesox-LDL-inducedinjuryinHUVECsbyamelioratingmitochondrialfunctionandinhibitingWnt/β-cateninpathway
Authors:Hai-JianSun,Dong-YanXu,Yi-XinSun,TongXue,Chen-XingZhang,Zhi-XuanZhang,WeiLin,Ke-XueLi
Journal:BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications(2017)
Salusin-βmediateshighglucose-inducedendothelialinjuryviadisruptionofAMPKsignalingpathway
Authors:XuexueZhu,YuetaoZhou,WeiweiCai,HaijianSun,LiyingQiu
Journal:BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications(2017)
VaccarinprotectshumanmicrovascularendothelialcellsfromapoptosisviaattenuationofHDAC1andoxidativestress
Authors:XuexueZhu,YueyueLei,FanggenTan,LeileiGong,HaifengGong,WeiYang,TingChen,ZhixuanZhang,WeiweiCai,BaoHou
Journal:EuropeanJournalofPharmacology(2017)
AxlisrequiredforTGF-β2-induceddormancyofprostatecancercellsinthebonemarrow
Authors:KenjiYumoto,MatthewREber,JingchengWang,FrankCCackowski,AnnMDecker,EunsohlLee,AnaRitaNobre,JulioAAguirre-Ghiso,YounghunJung,RussellSTaichman
Journal:ScientificReports(2016)
GrowthArrest-Specific6(GAS6)PromotesProstateCancerSurvivalbyG1Arrest/SPhaseDelayandInhibitionofApoptoticPathwayDuringChemotherapyinBoneMarrow
Authors:EunsohlLee,AnnMDecker,FrankCCackowski,LuliaAKana,KenjiYumoto,YounghunJung,JingchengWang,LauraButtitta,ToddMMorgan,RussellSTaichman
Journal:Journalofcellularbiochemistry(2016)
RFX1--dependentactivationofSHP-1inducesautophagybyanovelobatoclaxderivativeinhepatocellularcarcinomacells
Authors:Jung-ChenSu,Ping-HuiTseng,Cheng-YiHsu,Wei-TienTai,Jui-WenHuang,Ching-HuaiKo,Mai-WeiLin,Chun-YuLiu,Kuen-FengChen,Chung-WaiShiau
Journal:Oncotarget(2014):4909
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司，前身为ABD Bioquest，总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年，一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术，综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究，引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络，为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
美国AATBioquestInc.(前身是ABDBioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。
1）我们提供反应荧光探针和发光探针，生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物，如蛋白、核酸以及其他碳水化合物；2）我们研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白，核酸和活细胞。3）我们不断的推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶，特别是检测水解酶和氧化还原酶类；4）我们致力于开发用于信号转导研究的试剂；5）我们提供生理和神经探针，特别是钙离子指示剂和膜电位探针。
作为AATBioquestInc.的中国区域代理，艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品，同时更为您售前售后全面技术支持。
AATBioquest,Inc.(formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOGyandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.
1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.
Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
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百奥森18分钟霉菌毒素检测试剂盒，有需要的可以了解下！多种规格型号可供选择
产品名称
黄曲霉毒素B1(AFB1）酶免检测试剂盒
黄曲霉毒素B1(AFB1）酶免检测试剂盒
赭曲霉毒素A（OTA）酶免检测试剂盒
玉米赤霉烯酮（ZEN）酶免检测试剂盒
玉米赤霉烯酮（ZEN）酶免检测试剂盒
呕吐毒素（DON）酶免检测试剂盒
黄曲霉毒素M1（AFM1）酶免检测试剂盒
总黄曲霉毒素(AFT）酶免检测试剂盒
T-2毒素（T-2）酶免检测试剂盒
伏马毒素B1（FB1）酶免检测试剂盒
牛胰岛素,是一种多肽
在1965年9月17日我国完成了结晶牛胰岛素的全合成。经过严格鉴定，它的结构、生物活力、物理化学性质、结晶形状都和天然的牛胰岛素完全一样。这是世界上第一个人工合成的蛋白质，为人类认识生命、揭开生命奥秘迈出了可喜的一大步。这项成果获1982年中国自然科学一等奖。
1953年，英国人F. SangerSanger由于测定了牛胰岛素的一级结构而获得1958年诺贝尔化学奖。
我用Promega公司的双荧光素酶检测试剂盒（E2920）检测到的firefly萤光素酶活性很低，只有4*10的3次方；海肾萤光素酶活性有10的6次方。
我用Ad293细胞做了转染，fireflyluciferase质粒：RanillaLuciferase质粒=0.1ug：0.025ug/一个孔（96孔板），共转染了二天，再进行双萤光素酶检测。
我想了解fireflyluciferase活性用promega的这个E2920-双萤光素酶试剂盒检测得到10的3次方，这种数值正常吗？
我做了3次重复实验，每次firefly萤光素酶活性很低，只有4*10的3次方；而海肾萤光素酶活性有10的6次方。
求指教？fireflyluciferase活性低？会是什么原因呢？
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