PlasmoTest™提供一种简便、快速、可靠的可视化方法检测细胞培养中的支原体污染。这种方法首次使用细胞检测支原体。
PlasmoTest™包括两种主要成分：支原体感受器表达细胞和HEK-Blue™Detection检测培养基。
支原体感受器表达细胞可以通过HEK-Blue™Detection培养基颜色变化检测支原体。支原体感受器细胞是通过一病原体受体—Toll样受体2（TLR2）来检测支原体。在支原体存在的情况下TLR2启动下游信号通路，活化NF-kB和一些其他的转录因子。这些转录因子诱导SEAP（分泌型胚胎碱性磷酸酶）分泌到上清中，SEAP可以引起HEK-Blue™Detection培养基的蓝紫色变化。
规格
•支原体检测范围5.102-5.105cfu/ml
•无假阳性结果：出现阳性结果即可确认细胞污染。
•提供两种规格：
–rep-pt1试剂盒:检测250个样本
欲进行更多实验，仅购买检测补充剂即可。
内容列项
PlasmoTest™试剂盒(#rep-pt1)250个样本:
–HEK-Blue™-2cells：1个含3-5x106活细胞的运输板，室温运输。
–HEK-Blue™Selection：2支1毫升的250X基因筛选抗生素试剂。
–Normocin™:1毫升500X的Normocin™
(1毫升可配制500毫升细胞培养液)
–HEK-Blue™Detection:1袋
(可配制50毫升检测试剂)
–HEK-Blue™Water:60毫升，瓶装
–阳性对照：1管
–阴性对照：1管
内容摘要
HEK-Blue™-2细胞是支原体感受器细胞，由HEK293改造获得。细胞稳定表达TLR2及活化其信号通路所需的多种基因，同时共表达优化的SEAP报告基因。SEAP报告基因受控于转录因子NF-kB和AP-1启动子。
HEK-Blue™Selection包含多种基因筛选抗生素，这些抗生素保证HEK-Blue™-2细胞中各种转基因的稳定性。此外，试剂盒含有Normocin™，用以保护HEK-Blue™-2细胞免受支原体，细菌或真菌的污染。
HEK-Blue™Detection是特异性检测SEAP的试剂。在SEAP水解后，底物即可出现紫色或蓝色的变化。
参考文献
–LincolnCK,GabridgeMG.,1998.Cellculturecontamination:sources,consequences,prevention,andelimination.MethodsCellBiol.57:49-65.
–UphoffCC,DrexlerHG.,2002.ComparativePCRanalysisfordetectionofmycoplasmainfectionsincontinuouscelllines.InVitroCellDevBiolAnim.38:79-85.
–DoyleA,GriffithsJB.,1998.Thecell:selectionandstandardization.In:Cellandtissueculture:laboratoryproceduresinbiotechnology.Doyle,AandGriffithsJB(Eds),WileyandSons,Ltd.pp.35-52.
–McGarrityG.etal.,1992.Mycoplasmasandtissueculturecells.In:Maniloff,J.,McElhaney,R.N.,Finch,L.R.,Baseman,J.B.(Eds),Mycoplasmas,MolecularBIOLOGyandPathogenesis,AmericanSocietyforMicrobiology,WashingtonDC,pp.445-54.
产品引用文献
2017–Toxicology,S0300-483X(17)30059-8.
EffectofInterleukin(IL)-8onbenzo[a]pyrenemetabolismandDNAdamageinhumanlungepithelialcells.
ShiQ.etal.
2016–Nature.,538(7623):123-126.
AccessorysubunitsareintegralforassemblyandfunctionofhumanmitochondrialcomplexI.
StroudDA.etal.
2016–NatProtoc.,11(11):2170-2188.
Remodelingsomaticnucleiviaexogenousexpressionofprotamine1tocreatespermatid-likestructuresforsomaticnucleartransfer.
CzernikM.etal.
2016–JControlRelease.,226:238-47.
Transcendingepithelialandintracellularbiologicalbarriers;aprototypeDNAdeliverydevice.
McCaffreyJ,McCruddenCM,AliAA,MasseyAS,McBrideJW,McCruddenMT,Vicente-PerezEM,CoulterJA,RobsonT,DonnellyRF,McCarthyHO
2016–PLoSOne.,11(1):e0147344.
ZEB1mediatesacquiredresistancetotheepidermalgrowthfactorreceptor-tyrosinekinaseinhibitorsinnon-smallcelllungcancer.
YoshidaT,SongL,BaiY,KinoseF,LiJ,OhaegbulamKC,Muñoz-AntoniaT,QuX,EschrichS,UramotoH,TanakaF,NasarreP,GemmillRM,RocheJ,DrabkinHA,HauraEB.
