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U-protein/VWF-A1 domain, human, residues 1238-1481, glycosylated/V003/100 ug
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U-protein/VWF-A1 domain, human, residues 1238-1481, glycosylated/V003/100 ug
品牌 / 
U-Protein Express BV
货号 / 
V003
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RecombinantVWF-A1domain
residues1238-1481(475-718ofmatureVWF)
containsN-linkedglycans
100ug

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VonWillebrandFactor
vonWillebrandantigenII
F8VWF

Sendanemailtoinfo@U-proteinexpress.comforbulkquantities

U-proteinExpressBV是一家专门的合同研究机构,提供用于研究和临床前应用的(哺乳动物)重组蛋白抗体的快速大规模生产,并在位于荷兰乌得勒支乌得勒支科学公园的最先进实验室设施中运营。员工在DNA克隆、哺乳动物细胞培养和蛋白质生产方面经验丰富。自2002年以来,已为生物技术、制药工业和学术界生产了5000多种不同的重组抗体和蛋白质。


U-ProteinExpress的rPEX技术基于HEK293或CHO细胞系中的瞬时蛋白生产,成功率超过90%,可以生产难以表达的蛋白质,如双特异性抗体和抗原


U-ProteinExpress蛋白纯化原则

蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白

蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),防止目的蛋白被降解。精细纯化阶段则需要更高的分辨率,此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来,要用更小的树脂颗粒以提高分辨率,常用离子交换柱和疏水柱,应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性,柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力,洗脱峰越窄,柱效越好。仅有好的选择性,洗脱峰太宽,蛋白照样不能有效分离。



U-ProteinExpress重组抗体使制备人源化抗体和人源抗体成为可能,而这是其他常规的多克隆或单克隆抗体制备方法所不可能做到的。主要包括四个方面的技术:抗体库技术,包括组合抗体库、噬菌体抗体库、细菌和酵母展示的抗体库、核糖体展示的抗体库及其抗体库的筛选技术;重组抗体基因的改造和表达,包括抗体亲和力成熟、抗体人源化改造和稳定性改造,以及抗体基因在原核、酵母、昆虫、哺乳动物细胞、植物及转基因动物中的表达;重组抗体效应功能的提高,涉及抗体与同位素、药物、毒素结合的"导向药物"、双特异性抗体、抗体一酶融合蛋白、免疫细胞因子及细胞内抗体;抗体特异性分析和鉴定,主要介绍抗体的分离和纯化、抗体标记技术、抗体亲和力测定、抗体的抗原表位分析、抗体基因测序和结构模建,以及常用的抗体鉴定技术,如ELISA免疫组化、FACS分析、免疫沉淀和Westernblot等。本书涵盖了当前重组抗体制备和改造中的大部分技术,因此对从事抗体研制的技术人员、生物技术公司及有关专业的大专院校师生均有一定参考价值。


U-ProteinExpress蛋白纯化步骤

分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。

前处理
分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去种皮以免受单宁等物质的污染,油料种子最好先用低沸点的有机溶剂如乙醚等脱脂。然后根据不同的情况,选择适当的方法,将组织和细胞破碎动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆机破碎或用超声波处理破碎。植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物质组成的细胞壁,一般需要用石英砂玻璃粉和适当的提取液一起研磨的方法或用纤维素酶处理也能达到目的。细菌细胞的破碎比较麻烦,因为整个细菌细胞壁的骨架实际上是一个借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子,非常坚韧。破碎细菌细胞壁的常用方法有超声波破碎,与砂研磨、高压挤压或溶菌酶处理等。组织和细胞破碎后,选择适当的缓冲液把所要的蛋白提取出来。细胞碎片等不溶物用离心或过滤的方法除去。
如果所要的蛋白主要集中在某一细胞组分,如细胞核、染色体核糖体或可溶性细胞质等,则可利用差速离心的方法将它们分开,收集该细胞组分作为下步纯化的材料。如果碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质细胞器结合的,则必须利用超声波或去污剂使膜结构解聚,然后用适当介质提取。
粗分离
当蛋白质提取液(有时还杂有核酸、多糖之类)获得后,选用一套适当的方法,将所要的蛋白与其他杂蛋白分离开来。一般这一步的分离用盐析等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大,既能除去大量杂质,又能浓缩蛋白溶液。有些蛋白提取液体积较大,又不适于用沉淀或盐析法浓缩,则可采用超过滤、凝胶过滤、冷冻真空干燥或其他方法进行浓缩。
细分离
样品经粗分级分离以后,一般体积较小,杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化,一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳法,包括区带电泳等电点聚焦等作为最后的纯化步骤。用于细分级分离的方法一般规模较小,但分辨率很高。
结晶是蛋白质分离纯化的最后步骤。尽管结晶过程并不能保证蛋白一定是均一的,但是只有某种蛋白在溶液中数量上占有优势时才能形成结晶。结晶过程本身也伴随着一定程度的纯化,而重结晶又可除去少量夹杂的蛋白。由于结晶过程中从未发现过变性蛋白,因此蛋白的结晶不仅是纯度的一个标志,也是断定制品处于天然状态的有力指标。
离子层析法
当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改变pH等办法将吸附的蛋白质洗脱下来。
有机溶剂提取
蛋白质纯化有机溶剂提取的原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白质在水中的溶解度显著降低;而且在一定温度、pH值和离子强度下,引起蛋白质沉淀的有机溶剂的浓度不同,因此,控制有机溶剂的浓度可以分离纯化蛋白质。例如,在冰浴中磁力搅拌下,在4℃预冷的培养液中缓慢加入乙醇(-25℃),可以使冰核蛋白析出,从而纯化冰核蛋白。由于在室温下,有机溶剂不仅能引起蛋白质的沉淀,而且伴随着变性。因此,通常要将有机溶剂冷却,然后在不断搅拌下加入有机溶剂防止局部浓度过高,蛋白质变性问题就可以很大程度上得到解决。对于一些和脂质结合比较牢固或分子中极性侧链较多、不溶于水的蛋白质,可以用乙醇、丙酮丁醇等有机溶剂提取,它们有一定的亲水性和较强的亲脂性,是理想的提取液。冷乙醇分离法提取免疫球蛋白最早由Cohn于1949年提出,用于制备丙种球蛋白。冷乙醇法也是WHO规程和中国生物制品规程推荐的方法,不仅分辨率高、提纯效果好、可同时分离多种成分,而且有抑菌、清除和灭病毒的作用。



U-ProteinExpress常用产品报价单

产品名货号公司分类商城分类美金价
U-protein/Adrenocorticotropichormonemonoclonalantibody/P-Ab0001/100microgramP-Ab0001Antibodies功能性抗体300.00
U-protein/ComplementC2,human/C001/200microgramC001Complementproteins其它天然蛋白390.00
U-protein/Fam3D,human/F002/100microgramF002Cytokines细胞因子425.00
U-protein/Alkalinephosphatase,placenta,human,secreted(glycerolbuffer)/A002/0.25mgA002Enzymes其它酶475.00
U-protein/Beta2-GlycoproteinI/G002/0.1mgG002Haematology其他试剂420.00
U-protein/FSH,Daniorerio/F001/100microgramF001Hormones激素450.00
U-protein/CD36extracellulardomain,human/C007/100microgramC007Receptors受体750.00
U-ProteinExpress/Mannose-bindingproteinC/0.1mg/M001M001Complementproteins其它重组蛋白470.00



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NaOH溶液、CuSO4溶液、Na2SO4溶液、MgSO4溶液
乙醇,乙醛,盐酸,CU(OH)2悬浊液
anaohna2co3nahco3ba(oh)2
bhclna2so4nano3na2co3
chclnaohna2co3nacl
dba(oh)2nahco3alcl3nahso4
下列各种溶液,不用其它试剂就能鉴别的是()
A、Na2CO3HClH2SO4NaNO3
B、K2CO3H2SO4HNO3BaCl2
C、HClHNO3AgNO3NaCl
D、NaOHFeCl3MgCl2BaCl2
下列各组溶液里,不用任何其他试剂就能鉴别的是
A.H2SO4Na2SO4AgNO3BaCl2.
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请问下有无同学需要H37RA的?我是做EAE模型的,上个月购买了BDDifco公司的H37RA(货号),因为购买的时候只能整盒6支购买,但我们用不了那么多,所以想问问有无同学需要的,100mg/支,800元/支或用等价试剂交换。地址广州。有需要的请私信,谢谢!

1.KOH,Na2SO4,AlCL3
2.NaHCO3,Ba(OH)3,H2SO4
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求购上图结构的N-保护的三氨基丙烷衍生物,以及荧光染料BODIPY和铂试剂。主要是该结构化合物或者合成该化合物的前体

A.KOH溶液和AlCl3溶液B.Na2CO3溶液和盐酸
C.MgCl2溶液和氨水D.盐酸和NaAlO2溶液
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不用其他试剂,可以鉴别石蕊、盐酸、氢氧化钙、氢氧化钠、碳酸钠五种溶液,第四个被鉴别出来的物质是(  )A.盐酸B.氢氧化钙C.氢氧化钠D.碳酸钠