Description:
Arapidmethodforgeneexpressionanalysis,PURExpress
®isanovelcell-freetranscription/translationsystemreconstitutedfromthepurifiedcomponentsnecessaryforE.colitranslation.Withminimalnucleaseandproteaseactivity,thePURExpresssystempreservestheintegrityofDNAandRNAtemplates/complexesandresultsinproteinsthatarefreeofmodificationanddegradation.Transcriptionandtranslationarecarriedoutinaone-stepreaction,andrequirethemixingofonlytwotubes.Withresultsavailableinafewhours,PURExpresssavesvaluablelaboratorytimeandisidealforhighthroughputtechnologies.
PURExpressCitations
Figure1:ProteinexpressionusingthePURExpress®InVitroProteinSynthesisKit
25μlreactionscontaining250ngtemplateDNAand20unitsRNaseInhibitorwereincubatedat37°Cfor2hours.2.5μlofeachreactionwasanalyzedbySDS-PAGEusinga10–20%Tris-glycinegel.Thereddotindicatestheproteinofinterest.MarkerMistheProteinLadder(NEB#P7703).Figure2:Incorporationof35S-methionineenablesvisualizationofproteinbyautorADIography
25μlreactionscontaining250ngtemplateDNA,20unitsRNaseInhibitorand2μl35S-metwereincubatedat37°Cfor2hours.2.5μlofeachreactionwasanalyzedbySDS-PAGE,thegelwasfixedfor10minutes,driedfor2hoursat80°Candexposedtox-rayfilmfor5hoursat-80°C.Figure3:SchematicdiagramofproteinsynthesisandpurificationbyPURExpress
Figure4:ExpressionandreversepurificationofDHFR(A)andT4DNALigase(B)usingPURExpress
125μlreactionswerecarriedoutaccordingtorecommendationsintheaccompanyingmanual.Sampleswereanalyzedona10–20%Tris-glycinegelandstainedwithCoomassieBlue.Notethatinbothcases,thedesiredproteincanbevisualizedinthetotalproteinfraction.Thereddotindicatestheproteinofinterest.MarkerMistheProteinLadder(NEB#P7703).Highlights
- CleanerSystem-sampledegradationeliminated
- Easy-to-use-proteinexpressioncompleteinapproximatelytwohours
- SimpleAnalysis-proteincanoftenbevisualizeddirectlyonaCoomassiestainedgel
KitComponents
Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
| Storeat(°C) | Concentration |
FactorMix | | |
E.coliRibosome | -80 | |
PURExpressSolutionA | | |
Control(DHFR)template | | |
Notes:
TheDHFRcontroltemplateisnowsuppliedat125 ng/µl.Use2µlforthepositivecontrolreaction.Weuse60pmolesofribosomesinastandard25 μlreaction.Thesuppliedcontrolribosomesareenoughfortworeactions.Note:Usingasmalleramountofribosomesisposs
IBLebuttheproteinyieldmaybelower. Fordetailedusageinformationpleaserefertotheproductmanual.PURExpressControlTemplatesequencefiles:Fasta,GenBankStorage:Allkitcomponentsshouldbestoredat-80°C.
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该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的,我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权; 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程, 确保货物的来源; 正规报关,提供13%增值税发票。
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穆斯塔法Khammash领导的研究人员已经开发出一种新方法,它使用蓝光控制DNA的转录成RNA在单个细胞。这项技术也可以用于组织工程和干细胞研究。转录是一项基本生物过程的基因复制的RNA分子。这涉及到蛋白质,包括转录因子和称为rna聚合酶的分子机器。
转录因子的转录过程开始,必须首先连接到一个特定的DNA的一部分。这触发各种流程,导致DNA的RNA聚合酶的对接。这种蛋白质复杂然后螺旋分解双螺旋为了阅读的顺序基因并将其复制到一个RNA分子。所谓的信使RNA是一种便携式拷贝基因功能的蛋白质
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中国将开发自主知识产权肿瘤基因表达谱芯片
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Clusterin是一种由CLU基因编码的蛋白质,它在大多数人体组织中表达,特别是在压力下,它有助于保护细胞。
由开罗大学男科和性学系的Taymour Mostafa领导的一个埃及研究小组发现,不育男性的精子中CLU的表达要高得多。
Mostafa和他的同事检查了124名男性的精液样本,其中一些人的精子活力降低,精子细胞形状异常或精子数量低。与健康精子的男性相比,他们发现精子功能障碍男性的凝聚素蛋白及其mRNA前体水平显着升高。他们还发现凝聚素水平与精子质量密切相关,因此CLU的表达越
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神经系统疾病会对性别产生不同的影响。例如,男孩患自闭症的几率比女孩高几倍,而多发性硬化症在女性中更为普遍。根据Nature Communications最近的一项研究,这种不平等可能取决于某些基因在男性和女性大脑中表达的差异。
一个国际科学家团队,包括在伦敦大学学院神经病学研究所工作的Daniah Trabzuni,获得沙特阿拉伯费萨尔国王专科医院和研究中心的奖学金,研究了137名美国白种人尸检后的脑和脊髓样本。研究人员发现,所有脑细胞中2.6%的基因在男性和女性中的表达方式不同。在大
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产品:GEO数字基因表达谱分析平台(工具)
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上海杰美基因医药科技有限公司在发布的SAGE基因表达文库构建技术服务供应信息,浏览与SAGE基因表达文库构建技术服务相关的产品或在搜索更多与SAGE基因表达文库构建技术服务相关的内容。
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上海杏园瑞民生物工程有限公司在发布的Apoptosis PCR Array凋亡基因表达PCR芯片 384孔板供应信息,浏览与Apoptosis PCR Array凋亡基因表达PCR芯片 384孔板相关的产品或在搜索更多与Apoptosis PCR Array凋亡基因表达PCR芯片 384孔板相关的内容。
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让基因表达分析实现高通量之原理&性能优势 一次性检测84个基因、372个基因不再是问题; 想快速找到差异样本间的差异表达基因,只要会操作qPCR,就会做这个试剂盒;
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在水中浓度非常低的汞集中在整个食物链中,从藻类到浮游动物,再到小鱼,再到最大的鱼 - 我们吃的鱼。对于食用高度污染鱼类的人来说,汞会导致严重且不可逆转的神经系统疾病。虽然我们知道该元素的极端毒性,但在食物链的下游会发生什么,一直到第一级的微藻和汞的门户?瑞士日内瓦大学(UNIGE)的一个研究小组首次使用分子生物学工具解决了这个问题。科学家测量了汞对藻类基因表达的影响方式,即使其在水中的浓度非常低,与欧洲环境保护标准相当。科学报告。UNIGE研究团队由环境生物地球化学和生态毒理学教授Ve
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2、核酸提取及相关服务 2-1 、 DNA 类提取: ( 1 )人、大鼠、小鼠各种组织、细胞、血液的小、中、大量的全基因组 DNA 提取。 ( 2 )细菌的小、中、大量的基因组 DNA 提取。 ( 3 )酵
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转录 - 将DNA片段读入蛋白质合成的RNA模板 - 是几乎所有细胞过程的基础,包括生长,响应刺激和繁殖。现在,怀特黑德研究所的研究人员已经完全理解了转录是如何被控制的以及转录因子在这个过程中的作用。该模式的转变,在一篇文章中在线12月7日在该杂志描述的细胞,铰链上起着关键作用的小蛋白质的基因组结构,给了我们新的见解在转录和基因表达的变化控制如何导致疾病。转录有几个重要的参与者,必须在正确的时间在正确的地方:转录机制,转录因子,启动子和增强子。根据现有模型,转录因子是与基因组的增强子区
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【摘要】目的:探讨BAI1mRNA表达水平与不同级别胶质瘤间的关系。方法:选取病理分级为WHOⅡ、Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤标本依次为12例、12例、14例,正常脑组织标本6例;提取总RNA,用半定量RT-PCR法检测BAI1基因的转录表达情况。结果:BAI1mRNA在所有正常脑组织和26例(68.4%)胶质瘤中表达。正常脑组织的BAI1基因转录表达水平高于胶质瘤组,P<0.05;各级胶质瘤间BAI1基因转录表达水平差异没有统计学意义。结论:BA...
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本人最近在用双向电泳技术研究一种细菌(H)不同血清型的两个菌株(H1和H2)的分泌蛋白差异,结果经双向电泳筛选出一些差异蛋白。之后挑取其中二个差异蛋白利用实时荧光定量PCR相对定量方法分析其转录水平。结果发现这两个蛋白在菌株H1的表达量远低于在菌株H2的表达,但是荧光定量PCR分析发现这两个蛋白的转录水平菌株H1是菌株H2的五十倍,现在正为此事烦恼,哪位高人能给些指点呢?
一个基因要转录并表达,需要经过mRNA,如果知道基因序列,可以采用RT-PCR的方法鉴定mRNA是否表达,如果有mRNA一般就是表达蛋白,如果没有mRNA一般不表达蛋白。
基因转录是指DNA分子转录成RNA
翻译是指mRNA在核糖体的帮助下翻译成肽链
基因表达则是二者的统一,即DNA转录成RNA,RNA翻译成肽链,并最终折叠成有意义的蛋白质
是的,必须,rna病毒需要逆转录成DNA之后进行这个步骤,朊病毒需要逆转两次之后进行。但是注意这是必须的两步,不是只有两步。
转录组数据中,RPKM是Reads Per Kilo bases per Million reads的缩写,代表每百万reads中来自于某基因每千碱基长度的reads数。
转录是遗传信息由DNA转换到RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步,转录是mRNA以及非编码RNA(tRNA、rRNA等)的合成步骤。是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以ATP、CTP、GTP、UTP四种核苷三磷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。
最近导师要求做一个关于PARP家族蛋白在肝癌和癌旁组织中转录以及表达情况的初步研究,以确定目前的课题是否有很大价值。我之前一直在做湿实验,没有生信背景,所以对这个工作比较头疼。我不会编程(只有很浅薄的R基础),而且没有统计学基础,所以直接上网查找有没有可以在网上直接进行分析的网站。我一开始是上cbioportal上对肝癌的mRNA转录谱进行分析(我只会看网站上红得蓝的表达上调下调的标记,不会看zscore什么的。。。),但网站里面提供的对照是一个所谓的标准正常人。我没查到这个所谓的标准正常人是什么,而且导师说肝癌可能存在个体差异,所以要求用肝癌及其对应的癌旁组织的转录谱和表达谱进行分析。我上GEO搜索癌旁组织(paracanceroustissue),根本什么想要的结果都没有。我现在完全是一头雾水,无从下手,希望有做相关领域工作的前辈们或是做与之类似的工作的前辈们提供指导,非常感谢!
某种转录因子有四种不同的亚型(N1N2N3N4),我想检测它们在某种细胞内的表达情况,能不能提取这种细胞的蛋白,然后跑western,通过敷育四种对应的
抗体最后来确认哪种亚型表达得多,哪种亚型表达得少呀?我做了三次western,结果在对应的分子量区域都没有呈现条带出来!有前辈说这样做是无意义的,因为细胞可能对不同抗体的敏感性不同,所以跑western时用一种样本分别敷四种抗体的话是没有可比性的。真的是这样吗?我看文献里也有人做不同蛋白亚型在组织中的表达,他们能做出来条带。求各路大神指点啊!(抱拳)
如题,我现在做出了一个蛋白相对于正常组织,在肿瘤里表达升高。想做某转录因子调控它的表达。查了转录因子预测的网站,每个预测的都很不一样,而且参与其调控的转录因子有几十个。我该怎么办呢?用什么实验技术或者方法能找到一个能做的呢?
准备做双荧光酶报告基因,设计了A转录因子过表达质粒,和启动子报告基因,考虑能不能直接用A转录因子蛋白代替A转录因子过表达质粒;这样用报告基因
转染细胞再加A转录因子到
细胞培养液中培养,这样能不能行得通?
最近导师要求做一个关于PARP家族蛋白在肝癌和癌旁组织中转录以及表达情况的初步研究,以确定目前的课题是否有很大价值。我之前一直在做湿实验,没有生信背景,所以对这个工作比较头疼。我不会编程,所以直接上网查找有没有可以在网上直接进行分析的网站。我一开始是上cbioportal上对肝癌的mRNA转录谱进行分析,但网站里面提供的对照是一个所谓的标准正常人。我没查到这个所谓的标准正常人是什么,而且导师说肝癌可能存在个体差异,所以要求用肝癌及其对应的癌旁组织的转录谱和表达谱进行分析。我上GEO搜索癌旁组织(paracanceroustissue),根本什么想要的结果都没有。我现在完全是一头雾水,无从下手,希望有做相关领域工作的前辈们或是做与之类似的工作的前辈们提供指导,非常感谢!
这句话翻译成英文是:Genes are expressed by transcription and translation, and what controls transcription