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Dourui1986
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嗯，磷酸化蛋白的抗体一定要选好，最好不要买santa的，可以买upstate的,就是millipore的，或者abcam的。第一，血清成分复杂，最好用密理博的Montage Albumin Deplete Kit去除血清里50%的白蛋白第二，磷酸化蛋白提取蛋白的时候，最好加入原钒酸钠，和磷酸酶抑制剂，防止蛋白脱磷酸化。第三，不要用牛奶做封闭剂，用BSA。因为牛奶中含有磷酸化酪蛋白，防止非特异带。第四，如果条带杂带多，而且，条带弱，可以选择millipore的signal boost，增加条带特异性，而且，增强条带的亮度。
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