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EquinetissueWesternblotsaremade ofhighqualitytotalproteinsextractedfromfreshlyharvested19differenthorsetissues(Panel#1). Proteinsamplearesubjectedtorigorousqualitycontrolprocedures.
Blotscanbeusedto:
- Quicklyassessspecificproteinexpressionacrossdifferenttissues.
- Determinesizeandrelativeabundanceofprotein indifferenttissues.
Qualitycontrol:
Everystepofpreparationofblots,fromharvestingtissuesandextractionofproteintoblottingiscarefullymonitoredtoensurethesuperiorqualityandperformance.
- Blotsaremadefromhighqualitytissuelysatesthatishomogenizedinaproteinlysisbuffercontainingcocktailof7mammalianproteaseinhibitors.Thequalityofproteinasindicatedbytheabsenceofsmear(nodegradation)andsharpnessandresolutionofproteinbandsareverifiedbydenaturedSDS-PAGEwithCoomassiebluestaining.
- TheefficiencyoftransferisroutinelycheckedbystainingproteinonmembraneswithreversIBLePonceaustaining.
- Theintegrityoftheblottedproteinistestedbyimmunostainingof b-actin.
Description:
Thetotalprotein samples (75ugeach) arefreshlyextractedfrom tissues,boiledinSDSsamplebuffer,fractionatedthough12.5%SDS-denaturinglargepolyacralamidegeleletrophoresis(SDSPAGE), andblottedontoPVDFmembranes.Eachblotisshippedinasealedbagatroomtemperatureandisgoodforoneyearifproperlystoreddryat4oCinasealedbagwithdescant.
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ebiomall.com
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台,
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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及时交付: 限时必达 畅选无忧
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蚂蚁淘的价格是真实透明的,并且具有很大的价格优势,不需要繁杂的询价比价; 报价单与合同可以直接在线生成或打印;就像在京东购物一样, 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购,订单详情会告诉您所有进程。
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2021-09-22
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2021-09-13
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2021-09-23
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2021-09-15
ImmunoWay生物的使命是用更好的产品和服务来帮助世界各地的生命科学的研究者,简化并加速他们的研究。专注于开发出创新的和可靠的免疫学和细胞学产品。ImmunoWay生物是开发高品质的与癌症、细胞凋亡、细胞生长和信号转导相关的ELISA试剂盒,细胞凋亡检测试剂盒,细胞代谢检测试剂盒,抗体,抗体/蛋白芯片的先驱。公司目前有八千多种抗体,其中信号传导相关的抗体1200 查看更多
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2021-09-21
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2021-09-20
蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多
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2021-09-16
通过前期的早期初筛,经过生物信息学分析,会筛选到具有统计学意义的一部分具有表达差异的蛋白。这些蛋白需要经过进一步的优化,寻找到与疾病或某些通路有关的具有表达差异的蛋白,进一步缩小蛋白范围,这时就需要使用结果更为准确的蛋白定量或鉴定工具。经过优化后,需要对得到的更小范围生物标志物进行大样本量的验证,最终确定哪些生物标志物可以用于疾病 查看更多
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2021-09-11
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2021-09-09
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2021-09-17
蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多
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2021-09-08
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【求助】有人用过凯基膜蛋白提取试剂盒么~跑wb着急啊~ 蛋白质和...123
cooloe2021-08-01
买了南京凯基的膜蛋白和浆蛋白提取试剂盒,浆蛋白有条带,可是膜蛋白跑了很久没跑出过条带。。。
之前是担心所需组织量不够(要求是200-300mg,我的组织只有20mg左右)才跑不出来,后来换用大鼠心脏测试,组织量绝对够。。。而且在跑western之前进行了说明书上的蛋白浓缩步骤,可是在加loADIngbuffer之后,蛋白沉淀怎么都溶解不掉~说明书也注明了如果有沉淀可以取上清继续上样,可是每次上样感觉样品往上浮,只有部分样品往孔里沉,而且跑出来什么都没有,连内参都没有。用的是β-actin的内参。。
western之前浓缩步骤如下:
1、取所得提取物,每100ul膜蛋白加入约300ul的溶解buffer和约100ul三氯乙酸(TCA)试剂,混匀后置冰上20-30min后,13000rpm,离心15min,尽可能去除上清。
2、沉淀加入1ml丙酮,室温静置10min后,13000rpm离心15min。
3、弃上清,沉淀真空旋干或置冰上干燥10min(敞开离心管盖),按适当体积比加入loadingbuffer(使用前没100ulloadingbuffer加入2-5ulβ-巯基乙醇)溶解,彻底分散(枪头反复吹吸或剧烈涡旋),煮沸5min。【注:加入loadingbuffer后如有部分难容物,可取上清继续上样。】
之前是担心所需组织量不够(要求是200-300mg,我的组织只有20mg左右)才跑不出来,后来换用大鼠心脏测试,组织量绝对够。。。而且在跑western之前进行了说明书上的蛋白浓缩步骤,可是在加loADIngbuffer之后,蛋白沉淀怎么都溶解不掉~说明书也注明了如果有沉淀可以取上清继续上样,可是每次上样感觉样品往上浮,只有部分样品往孔里沉,而且跑出来什么都没有,连内参都没有。用的是β-actin的内参。。
western之前浓缩步骤如下:
1、取所得提取物,每100ul膜蛋白加入约300ul的溶解buffer和约100ul三氯乙酸(TCA)试剂,混匀后置冰上20-30min后,13000rpm,离心15min,尽可能去除上清。
2、沉淀加入1ml丙酮,室温静置10min后,13000rpm离心15min。
3、弃上清,沉淀真空旋干或置冰上干燥10min(敞开离心管盖),按适当体积比加入loadingbuffer(使用前没100ulloadingbuffer加入2-5ulβ-巯基乙醇)溶解,彻底分散(枪头反复吹吸或剧烈涡旋),煮沸5min。【注:加入loadingbuffer后如有部分难容物,可取上清继续上样。】
ProcartaPlex Mouse MCSF Simplex 96 tests_上海钰博生物科技...123
尛佐佐0033F2018-02-05
simplex tests是一种试剂瓶,分为广口瓶和细口瓶,和试剂盒是不一样的。
一、广口瓶。
广口瓶是用于盛放固体试剂的玻璃容器,有透明和棕色两种,棕色瓶用于盛放需避光保存的试剂(例如硝酸银等大部分硝酸盐)。广口瓶一般用于存放试剂,瓶口内部磨砂,用于与瓶塞配合使用。
取用试剂时,瓶塞要倒放在桌上,用后将塞塞紧,必要时密封。由于瓶口内侧磨砂,一般跟玻璃磨砂塞配套,因而玻璃塞的广口瓶不能盛放强碱性试剂。如果盛放碱性试剂,要改用橡皮塞,因为强碱与玻璃中的二氧化硅反应,生成硅酸盐,使口与塞粘连。
二、细口瓶。
一种用于存放液体试剂的玻璃容器,细口方便液体倾倒,并且能够避免试剂挥发,因此口比较小。有透明和棕色两种,棕色瓶用于盛放需避光保存的试剂。
取用试剂时,瓶塞要倒放在桌上,用后将塞塞紧,必要时密封。由于瓶口内侧磨砂,一般跟玻璃磨砂塞配套,因而不能盛放强碱性试剂。如果盛放碱性试剂,要改用橡皮塞。
一、广口瓶。
广口瓶是用于盛放固体试剂的玻璃容器,有透明和棕色两种,棕色瓶用于盛放需避光保存的试剂(例如硝酸银等大部分硝酸盐)。广口瓶一般用于存放试剂,瓶口内部磨砂,用于与瓶塞配合使用。
取用试剂时,瓶塞要倒放在桌上,用后将塞塞紧,必要时密封。由于瓶口内侧磨砂,一般跟玻璃磨砂塞配套,因而玻璃塞的广口瓶不能盛放强碱性试剂。如果盛放碱性试剂,要改用橡皮塞,因为强碱与玻璃中的二氧化硅反应,生成硅酸盐,使口与塞粘连。
二、细口瓶。
一种用于存放液体试剂的玻璃容器,细口方便液体倾倒,并且能够避免试剂挥发,因此口比较小。有透明和棕色两种,棕色瓶用于盛放需避光保存的试剂。
取用试剂时,瓶塞要倒放在桌上,用后将塞塞紧,必要时密封。由于瓶口内侧磨砂,一般跟玻璃磨砂塞配套,因而不能盛放强碱性试剂。如果盛放碱性试剂,要改用橡皮塞。
博凌科为 高纯质粒小量制备试剂盒试用注意事项?及工作原理是怎样...123
wling1592021-08-04
博凌科为 高纯质粒小量制备试剂盒
原理简介:
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐,低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐,高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项:
◆ 第一次使用时,将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后(终浓度100ug/ml)置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会有混杂有微量RNA残留, 这时可在溶液P1中补加RNase A即可。
◆ 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入45ml无水乙醇,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◆ 温度低时溶液P2中SDS可能会出现浑浊或者析出沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
试剂盒特点:
◆ 产量高---一次提取高达30ug以上的质粒。
◆ 纯度高---OD260/OD280一般为1.80~1.85本试剂盒提取的质粒纯度好,能充分保证测序所需要的读长(用于ABI3730测序一般可达1000bp有效读长)。
◆ 快速,方便,不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
提示
BIOTEKE的质粒提取试剂盒既适用于革兰氏阴性菌中质粒的提取,同时也可从革兰氏阳性菌中提取质粒。由于革兰氏阳性菌外被一层较厚的细胞壁,会严重阻碍细菌细胞的裂解,因此必须在裂解细胞前破除,方法如下:
收集适量的菌体,加入250ul溶液P2,充分悬浮菌液,加入溶菌酶使其终浓度在10-20mg/ml左右在37℃处理30分钟左右。加入溶菌酶的浓度和处理的时间可根据不同的菌主和具体实验条件进行调整。
原理简介:
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐,低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐,高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项:
◆ 第一次使用时,将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后(终浓度100ug/ml)置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会有混杂有微量RNA残留, 这时可在溶液P1中补加RNase A即可。
◆ 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入45ml无水乙醇,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◆ 温度低时溶液P2中SDS可能会出现浑浊或者析出沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
试剂盒特点:
◆ 产量高---一次提取高达30ug以上的质粒。
◆ 纯度高---OD260/OD280一般为1.80~1.85本试剂盒提取的质粒纯度好,能充分保证测序所需要的读长(用于ABI3730测序一般可达1000bp有效读长)。
◆ 快速,方便,不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
提示
BIOTEKE的质粒提取试剂盒既适用于革兰氏阴性菌中质粒的提取,同时也可从革兰氏阳性菌中提取质粒。由于革兰氏阳性菌外被一层较厚的细胞壁,会严重阻碍细菌细胞的裂解,因此必须在裂解细胞前破除,方法如下:
收集适量的菌体,加入250ul溶液P2,充分悬浮菌液,加入溶菌酶使其终浓度在10-20mg/ml左右在37℃处理30分钟左右。加入溶菌酶的浓度和处理的时间可根据不同的菌主和具体实验条件进行调整。
有些文章中WB结果中有Marker,是怎么做到的?悟空问答123
众神小三4922021-07-30
可能可以通过下面几个方法实现(仅供参考):
1. 使用预染 Marker,不过分子量不是特别准;
2. 所使用的 Marker 条带与待测蛋白质带有相同的抗原表位,比如都带有 His 融合标签;
3. 可以使用普通的 Marker 转膜使用 丽春红 等染色,然后在膜上标记出 Marker 各条带的位置。
1. 使用预染 Marker,不过分子量不是特别准;
2. 所使用的 Marker 条带与待测蛋白质带有相同的抗原表位,比如都带有 His 融合标签;
3. 可以使用普通的 Marker 转膜使用 丽春红 等染色,然后在膜上标记出 Marker 各条带的位置。
【求助】如何选择转染试剂盒 实验方法123
fengtingting20102021-08-02
要检测Foxp3如何选择WB的试剂盒,什么叫稀释倍数呢。这个试剂盒里一般都有什么。国内与国外应该质量差不多吧,我中山的怎么样
【实验求助】检测凋亡的caspase通路是选择WB还是酶活试剂盒 ...123
futuo19882021-08-06
免疫荧光染色法中,标记一种抗体只能检测一种抗原的方法是A、补体...123
棕油菊花2032021-08-08
美国IDEXX公司 本实验室长期使用中,主要是伪狂犬抗体检测,鉴别诊断以及猪瘟抗体检测。每一个盒子大概5000-6000之间。 敏感性与特异性非常好。 国产的就不行了。如果是初步检测武汉科前的还不错,兰州兽医研究所的也可以。
Brava辅助的超大容量自体脂肪移植隆乳 123
阿瑟51002018-01-18
口蹄疫病毒非结构蛋白3abc抗体检测elisa试剂盒具体的参考elisa试剂盒说明书本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
wb抗体_wb抗体【价格,厂家,图片,批发,采购】123
jianglili9692021-08-12
【讨论】抗体有效性ELISA确认,但不能用于WB的原因 免疫学讨论版...123
E妖胤龉N2021-07-27
timp可以做elisa,因为有专门的elisa试剂盒是用于检测timp,所以是可以用elisa方法进行检测的!
【求助】关于WB内参的问题~~~~急求解释 蛋白质和糖学论坛123
2021-07-23
浓缩胶的目的使得loading的样品能够在同一条水平线上进入分离胶,如果电压太大前端的蛋白容易在后面的蛋白赶上来前进入分离胶。而在分离是理论上(实际上也是)小电压长时间分离的效果会更好,但是在操作过程中没...
求助:为什么目标蛋白可以被wb检测出来但用elisa检测不出来 免疫学...123
荣傲达2018-02-09
据我所知不是所用的单克隆抗体都适合用WB来检测的。有些抗体经过SDS-PAGE后蛋白会有些变性,这部分抗原决定簇会被破坏。然后你用一抗去识别是识别不出来的,也就是印染后会没有条带的。
当然做都是可以做,需要带上阴性和阳性的对照组,以区别出是抗体制备的问题还是抗原决定簇被破坏的问题。
当然做都是可以做,需要带上阴性和阳性的对照组,以区别出是抗体制备的问题还是抗原决定簇被破坏的问题。

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