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Encapsula/Fluorescent PEGylated Phosphatidylglycerol (PG)-based ATP Liposomes (ATPsome®-PEG)/5-vials/fagg-207
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Encapsula/Fluorescent PEGylated Phosphatidylglycerol (PG)-based ATP Liposomes (ATPsome®-PEG)/5-vials/fagg-207
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Encapsula
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fagg-207
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Adenosine triphosphate (ATP) is the most abundant and primary carrier of the required energy for various functions in cells. Prolonged ischemia, reperfusion, anaerobic metabolism and lactate accumulation can lead to a dramatic decrease of ATP, cell swelling, cell rupture, and finally cell death by necrotic, necroptotic, apoptotic, and autophagic mechanisms. Due to drastic hydrolysis of ATP in vivo by ectoenzymes and poor cellular penetration, the direct delivery of ATP to the ischemic tissues is difficult.

To increase delivery of ATP to the tissues and protect from enzymatic degradation, encapsulation in liposomes has been proposed and demonstrated in various models of ischemia [1,2]. Studies on myocardial [1,3,4], liver [5-8], retina [9] and wound healing [10-12] ischemia have shown the ability of liposomal encapsulated ATP to prevent cell death and tissue dysfunction following ischemic events.

The encapsulation of ATP in liposomes markedly promotes its effectiveness by preventing the hydrolysis by extracellular enzymes, increasing ATP circulation time and enhancing its intracellular penetration. Depending on the type of the cell line and the target organ various types of liposomes with different surface charges such as anionic, cationic and neutral has been studied by various groups. Moreover, ATP encapsulated liposomes has been demonstrated to improve energy state and function of the cold-stored liver [6,7,13].

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蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多>
ImmunoWay生物的使命是用更好的产品和服务来帮助世界各地的生命科学的研究者,简化并加速他们的研究。专注于开发出创新的和可靠的免疫学和细胞学产品。ImmunoWay生物是开发高品质的与癌症、细胞凋亡、细胞生长和信号转导相关的ELISA试剂盒,细胞凋亡检测试剂盒,细胞代谢检测试剂盒,抗体,抗体/蛋白芯片的先驱。公司目前有八千多种抗体,其中信号传导相关的抗体1200 查看更多>
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通过前期的早期初筛,经过生物信息学分析,会筛选到具有统计学意义的一部分具有表达差异的蛋白。这些蛋白需要经过进一步的优化,寻找到与疾病或某些通路有关的具有表达差异的蛋白,进一步缩小蛋白范围,这时就需要使用结果更为准确的蛋白定量或鉴定工具。经过优化后,需要对得到的更小范围生物标志物进行大样本量的验证,最终确定哪些生物标志物可以用于疾病 查看更多>
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可能可以通过下面几个方法实现(仅供参考):
1. 使用预染 Marker,不过分子量不是特别准;
2. 所使用的 Marker 条带与待测蛋白质带有相同的抗原表位,比如都带有 His 融合标签;
3. 可以使用普通的 Marker 转膜使用 丽春红 等染色,然后在膜上标记出 Marker 各条带的位置。
我做脑组织的炎症因子的WB,但是很可惜,一个都做不出来,不知道什么原因,已经做很久了,怀疑是蛋白提取有问题,我使用的是国产的提取总蛋白试剂盒(RIPA+PMSF),蛋白浓度还可以,有6毫克/毫升,但是目的蛋白丰度比较低,现在想换一种蛋白质提取试剂盒,今天有一个试剂商向我推荐MERK公司的蛋白质提取试剂盒,可以提取膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白和细胞骨架蛋白,但是很贵,要5000多人民币,不知道是否有必要买,难道用总蛋白提取试剂盒不行吗?这个WB让我很苦恼!!!!谢谢。
电泳液和转膜液都可重复利用3次左右
考马斯亮兰染液也可以重复用。新配的染液10分钟即可,重复3次后要染30分钟。
一抗二抗可以重复利用,但是注意要在5%milk中加入0.2% sodium azide ,并且用完以后放入4度保存,我的经验重复使用4-5次是肯定没有问题的.如果保存不当,就会污染微生物,只能丢弃.
因为线粒体蛋白是细胞亚显微结构,必须用电镜观察,可以用,免疫电镜技术,和电镜放射自显影技术.推荐第二种:1放射性同位素标记的生物大分子前体参入,2,常规方法制片,3,在样品上敷上一层溴化银乳胶(要求更严格),在暗室里曝光数天(时间更长),经显影定影后,4移至电镜下观察,银颗粒所在位置即放射同位素标记的位置.
请问哪个公司的WB试剂盒好用?小弟刚接触,做WB的要的材料好多,不知有无合适的试剂盒可以减少工作量,请了解的大侠指教下!!
买了南京凯基的膜蛋白和浆蛋白提取试剂盒,浆蛋白有条带,可是膜蛋白跑了很久没跑出过条带。。。
之前是担心所需组织量不够(要求是200-300mg,我的组织只有20mg左右)才跑不出来,后来换用大鼠心脏测试,组织量绝对够。。。而且在跑western之前进行了说明书上的蛋白浓缩步骤,可是在加loADIngbuffer之后,蛋白沉淀怎么都溶解不掉~说明书也注明了如果有沉淀可以取上清继续上样,可是每次上样感觉样品往上浮,只有部分样品往孔里沉,而且跑出来什么都没有,连内参都没有。用的是β-actin的内参。。
western之前浓缩步骤如下:
1、取所得提取物,每100ul膜蛋白加入约300ul的溶解buffer和约100ul三氯乙酸(TCA)试剂,混匀后置冰上20-30min后,13000rpm,离心15min,尽可能去除上清。
2、沉淀加入1ml丙酮,室温静置10min后,13000rpm离心15min。
3、弃上清,沉淀真空旋干或置冰上干燥10min(敞开离心管盖),按适当体积比加入loadingbuffer(使用前没100ulloadingbuffer加入2-5ulβ-巯基乙醇)溶解,彻底分散(枪头反复吹吸或剧烈涡旋),煮沸5min。【注:加入loadingbuffer后如有部分难容物,可取上清继续上样。】
RT,本人打算检测某细胞株的抗凋亡能力,经文献查询应该是内源性细胞凋亡通路,所以我打算检测一下caspase9,caspase3/7,以及cleavedPARP
现在问题来了,文献中有的人是砸的western,有的是用的caspase酶活试剂盒(caspase9/3/7activitykit),我现在不知道应该选择哪种方式了......western嘛就是实验条件比较成熟,但是涉及一大堆什么totalcaspase,cleavedcaspase之类的东东;酶活试剂盒没用过,可能得慢慢摸条件....就价格来讲,两种方法花费差不多
请教各位做信号通路的大神,给我点建议吧,谢谢!
据我所知不是所用的单克隆抗体都适合用WB来检测的。有些抗体经过SDS-PAGE后蛋白会有些变性,这部分抗原决定簇会被破坏。然后你用一抗去识别是识别不出来的,也就是印染后会没有条带的。
当然做都是可以做,需要带上阴性和阳性的对照组,以区别出是抗体制备的问题还是抗原决定簇被破坏的问题。
不是的看你实验如何做了,试剂盒这块有技术支持的,你可以咨询下厂家,wb的实验需要的东西还是很多的,还是要参考详细的配方再做
口蹄疫病毒非结构蛋白3abc抗体检测elisa试剂盒具体的参考elisa试剂盒说明书本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
要做两个蛋白,这个试剂盒够用吗?
这个蛋白做了一个多月了,一直没有结果,我是用碧云天RIPA+PMSF提取的,请问这种膜蛋白需要用专门的膜蛋白提取试剂盒提蛋白吗?求指教求指教