BayoubiolabsBiochemicalsCatalogThelowestcostperloADIngDNAladdersintheworldSeetheladdersummarychartbelow.DNALaddersforconventionalelectrophoresis20bpDNAladder50bpDNAladder100bpDNAladder200bpDNAladder500bpDNAladder1kilobaseDNAladderSupercoiledPlasmidladderVectorspUCandM13DNAReadytoLigateVectorsReadytoLigatepUC18andM13mp18MolecularBIOLOGyKitsSupercoil-It™PlasmidPurificationKitExonuclease-It™PlasmidPurificationKitRepair-It™DNARepairKitRecombinantEnzymesRecombinantEnzymes
LowestCostperLoadingintheWorld:only60centsperloading,byfartheleastexpensiveintheindustry25BluntEndedBandsat20bpto500bpin20bpincrements.Thebandsareallbluntended,avoidinganyartifactscausedbybandreannealing.Bothpolyacrylamidegelelectrophoresisanda3%Metaphorgelresolvebandsfrom20bpto500bp.Allbandsonpolyacrylamideareverysharp.ThelowerbandsontheMetaphorgelwillappearslightlydiffuseduetothepoorerresolvingcapABIlityofMetaphorforverysmallfragments.Polyacrylamideprovides250loadingspertube,Metaphorprovides125loadingspertube.HighIntensityBandat100bpforeasybandidentificationIdealforaccuratelysizingsmallerPCRproductsandsmallsizedrestrictiondigestsSuppliedasa500ulstocksolutioninTEbuffer,whichissufficientfor250loadingsforpolyacrylamidegelsor125loadingsforMetaphorgels.Anadditionaltube,labeledas"WorkingSolution",issuppliedformakingconvenientinstantuseworkingsolutions.Theenclosedproductinformationsheetinstructshowtomixtheworkingsolution.
我们生产高质量，低成本的动物和体外应用质粒。我们不生产供人类使用的质粒。我们不生产用于产生供人类使用的病毒的质粒（例如腺病毒、逆转录病毒和任何其他病毒）。经验：我们从1996年开始提供定制的质粒制备服务。我们有大量生产各种类型和大小质粒的经验。我们经常向制药和基因治疗行业的客户提供散装质粒。我们的服务是完全保密的。你只提供给我们一个小样本（1微克）你的质粒或在大肠杆菌宿主质粒。剩下的我们来做。四秤：我们提供五秤-8升，16升，32升，100升和400升。对于8升、16升和32升的天平，细菌宿主生长在摇瓶中。对于100升和400升的天平，细菌寄主生长在工业发酵罐中。在更大范围内，每升的服务成本大幅下降。产量：我们的质粒产量通常是在LB肉汤中生长的制剂产量的两倍。我们使用专有的丰富的肉汤配方，以实现这一较高的产量。基于pUC的质粒的典型产量为每升10到15毫克。我们通常会获得更高的收益。我们的最高产量是每公升32毫克。我们8升和16升的平均产量分别为100毫克和200毫克。100升刻度的产量在1-2克之间。产量高度依赖于单个质粒。根据客户的要求，我们可以在大规模发酵之前获得估计的质粒产量。如果对客户而言，质粒的估计产量低得不可接受，客户可以免费取消制备。质粒质量：该质粒是由我们自己专有的质粒制备工艺制备的。该质粒的生物活性与桥根质粒相似。质粒通常大于90%的超螺旋。最终的质粒产物内毒素、RNA、蛋白质、RNase、DNase、核苷酸和核苷污染较低。质粒不暴露于紫外线或诱变溴化乙锭，确保最大的生物活性。超螺旋纯化：我们是世界上唯一一家提供最高纯度超螺旋纯化质粒的公司。在超螺旋纯化过程中，我们去除了大部分有缺口的质粒和大部分残留的染色体DNA污染。我们可以在任何刻度上执行此过程-从8升到400升或更高。超冷净化工艺效率高。在这个过程中，只有不到5%的超螺旋质粒丢失。最终的质粒产物通常大于99%的超螺旋。此过程是专有的。超螺旋纯化是可选的。点击这里查看凝胶照片中的超螺旋纯化示例。缓冲液选择：最终的质粒产物通常作为干颗粒提供。或者，质粒可以在任何缓冲液中以客户要求的任何浓度供应。质量控制：用琼脂糖凝胶电泳对最终的质粒产物进行检测，以确定质粒的大小和纯度。所述质粒产物具有包括总产率、质粒浓度、Abs260/Abs280比值和凝胶照片的数据表。快速服务：8升和16升刻度的一周周转时间。100升刻度的两周周转时间。最终的质粒产品由客户承担费用，在一夜之间发货，通常总共大约30美元。保证：巴渝生物实验室生产的质粒材料在性质上是实验性的，按原样提供给客户，不作任何适销性或特定用途的适用性保证，也不作任何其他明示或暗示的保证
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逆转录（reverse transcription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的复制形式，需逆转录酶的催化。艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。
逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别，但是逆转录是RNA类病毒自主行为，在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程；反转录是进行基因工程过程中，人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA，并以之为模板人工合成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程，但地点不同，相对性的来说，逆转录在体内，反转录在体外。
2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管，依次加入2～5μgRNAnμL
3、65℃保温5min，然后冰浴5min；
4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份
RNase抑制剂（40u/μL）0.5μL
10×M-MLVReactionBuffer2μL
DTT（200mM）1μL
逆转录酶（M-MLV）1μL
5、轻轻混匀后，然后2000rpm离心20s；
6、先在37℃保温1hr，然后70℃保温15min；
7、上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。向左转|向右转
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面：
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase，实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时，要求RNA必须有PolyA，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，所以对RNA样品的质量要求较高，最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（<500bp）的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT，引物设计质量影响RT的结果，而且不同引物退火温度本来就不相同，所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择，一般不推荐。向左转|向右转
