BayoubiolabsBiochemicalsCatalogThelowestcostperloADIngDNAladdersintheworldSeetheladdersummarychartbelow.DNALaddersforconventionalelectrophoresis20bpDNAladder50bpDNAladder100bpDNAladder200bpDNAladder500bpDNAladder1kilobaseDNAladderSupercoiledPlasmidladderVectorspUCandM13DNAReadytoLigateVectorsReadytoLigatepUC18andM13mp18MolecularBIOLOGyKitsSupercoil-It™PlasmidPurificationKitExonuclease-It™PlasmidPurificationKitRepair-It™DNARepairKitRecombinantEnzymesRecombinantEnzymes
LowestCostperLoadingintheWorld:only60centsperloading,byfartheleastexpensiveintheindustry25BluntEndedBandsat20bpto500bpin20bpincrements.Thebandsareallbluntended,avoidinganyartifactscausedbybandreannealing.Bothpolyacrylamidegelelectrophoresisanda3%Metaphorgelresolvebandsfrom20bpto500bp.Allbandsonpolyacrylamideareverysharp.ThelowerbandsontheMetaphorgelwillappearslightlydiffuseduetothepoorerresolvingcapABIlityofMetaphorforverysmallfragments.Polyacrylamideprovides250loadingspertube,Metaphorprovides125loadingspertube.HighIntensityBandat100bpforeasybandidentificationIdealforaccuratelysizingsmallerPCRproductsandsmallsizedrestrictiondigestsSuppliedasa500ulstocksolutioninTEbuffer,whichissufficientfor250loadingsforpolyacrylamidegelsor125loadingsforMetaphorgels.Anadditionaltube,labeledas"WorkingSolution",issuppliedformakingconvenientinstantuseworkingsolutions.Theenclosedproductinformationsheetinstructshowtomixtheworkingsolution.
我们生产高质量,低成本的动物和体外应用质粒。我们不生产供人类使用的质粒。我们不生产用于产生供人类使用的病毒的质粒(例如腺病毒、逆转录病毒和任何其他病毒)。经验:我们从1996年开始提供定制的质粒制备服务。我们有大量生产各种类型和大小质粒的经验。我们经常向制药和基因治疗行业的客户提供散装质粒。我们的服务是完全保密的。你只提供给我们一个小样本(1微克)你的质粒或在大肠杆菌宿主质粒。剩下的我们来做。四秤:我们提供五秤-8升,16升,32升,100升和400升。对于8升、16升和32升的天平,细菌宿主生长在摇瓶中。对于100升和400升的天平,细菌寄主生长在工业发酵罐中。在更大范围内,每升的服务成本大幅下降。产量:我们的质粒产量通常是在LB肉汤中生长的制剂产量的两倍。我们使用专有的丰富的肉汤配方,以实现这一较高的产量。基于pUC的质粒的典型产量为每升10到15毫克。我们通常会获得更高的收益。我们的最高产量是每公升32毫克。我们8升和16升的平均产量分别为100毫克和200毫克。100升刻度的产量在1-2克之间。产量高度依赖于单个质粒。根据客户的要求,我们可以在大规模发酵之前获得估计的质粒产量。如果对客户而言,质粒的估计产量低得不可接受,客户可以免费取消制备。质粒质量:该质粒是由我们自己专有的质粒制备工艺制备的。该质粒的生物活性与桥根质粒相似。质粒通常大于90%的超螺旋。最终的质粒产物内毒素、RNA、蛋白质、RNase、DNase、核苷酸和核苷污染较低。质粒不暴露于紫外线或诱变溴化乙锭,确保最大的生物活性。超螺旋纯化:我们是世界上唯一一家提供最高纯度超螺旋纯化质粒的公司。在超螺旋纯化过程中,我们去除了大部分有缺口的质粒和大部分残留的染色体DNA污染。我们可以在任何刻度上执行此过程-从8升到400升或更高。超冷净化工艺效率高。在这个过程中,只有不到5%的超螺旋质粒丢失。最终的质粒产物通常大于99%的超螺旋。此过程是专有的。超螺旋纯化是可选的。点击这里查看凝胶照片中的超螺旋纯化示例。缓冲液选择:最终的质粒产物通常作为干颗粒提供。或者,质粒可以在任何缓冲液中以客户要求的任何浓度供应。质量控制:用琼脂糖凝胶电泳对最终的质粒产物进行检测,以确定质粒的大小和纯度。所述质粒产物具有包括总产率、质粒浓度、Abs260/Abs280比值和凝胶照片的数据表。快速服务:8升和16升刻度的一周周转时间。100升刻度的两周周转时间。最终的质粒产品由客户承担费用,在一夜之间发货,通常总共大约30美元。保证:巴渝生物实验室生产的质粒材料在性质上是实验性的,按原样提供给客户,不作任何适销性或特定用途的适用性保证,也不作任何其他明示或暗示的保证
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没有序列识别的功能,他就是简单的催化相邻DNA链的5-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需ATP作辅酶。 不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接,也催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。
反转录酶(Reversetranscripatase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
在进行RT反应之前,应考虑以下几个方面:
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA,高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中,要特别防止RNase的污染,同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中,在缓冲液和还原剂(如DTT)存在的条件下加入,因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性,从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA,B,C对RNA的降解,并不能防止皮肤上的RNase,因此尽管使用了这些抑制剂,也要小心不要从手指上引入RNase,实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时,要求RNA必须有PolyA,所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT,所以对RNA样品的质量要求较高,最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应,建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT,尤其适合模板丰度很低的情况(比如某个gene表达量很低)。选择随机引物时,第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板,然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系,一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng,如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng,可能会导致小片段产物(<500bp)的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT,引物设计质量影响RT的结果,而且不同引物退火温度本来就不相同,所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择,一般不推荐。向左转|向右转