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荧光素酶报告基因质粒阴性对照性能参数,报价/价格,图片
来自 : mayitao
货号:JLE001L
保存条件:-20℃
英文名:M-MLVreversetranscriptase
保质期:1年
供应商:佳兰生物
数量:大量
规格:10000U

产品说明:逆转录酶能以RNA或单链DNA为模板起始合成互补的DNA链。MMLVReverseTranscriptase(RNaseH-)M-MLV逆转录酶的突变型,点突变去除了RNaseH的活性中心,使RNaseH的活性降低,减少了逆转录反应中RNA的降解,使CDNA第一链的得率增加,更容易获得全长cDNA

 

来源:E.coli菌株,含有突变型莫洛尼氏鼠白血病病毒(M-MLV)逆转录酶基因。 

产品应用:第一链cDNA的合成;RT-PCR反应。

 

 

产品纯度:200U的本酶和1μg16S23SrRNA37下孵育1h,电泳条带无肉眼可见的变化。

 

推荐的反应条件:

cDNA第一链的合成

1)在无RNasePCR管中加入:OligodT12-18(1μg/μl)或随机引物(50-250ng)1μlTotalRNA(10ng-5μg)mRNA(1-500ng)xμldNTP(10mMeach)1μlDEPCddOH2(14-x)μl

2)70保温10分钟后迅速冰浴2-10分钟。

3)离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。

4)向上述反应液中加入:5×RTBuffer4μlRNasin(40U/μl)1μl;轻轻吸打混匀。

5)42保温2分钟(OligodT12-18或基因特异引物);如果是随机引物则25保温10分钟。

6)加入1μlMMLV逆转录酶,混匀后42保温50分钟。

7)70保温15分钟后置冰上冷却,得到cDNA。该产物可直接用于第二链的合成或RT-PCR扩增反应,保存请置于-20

温馨提示:不可用于临床治疗。
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