
Overview:
c-KIT is a proto-oncogene and a type 3 transmembrane receptor for MGF (mast cell growth factor, also known as stem cell factor). c-KIT was first identified as the cellular homolog of the feline sarcoma viral oncogene v-kit. c-KIT together with its ligand regulates growth and activation of a variety of hemopoietic and non-hemopoietic cells. Mutations in c-KIT are associated with gastrointestinal stromal tumors, mast cell disease, acute myelogenous lukemia, and piebaldism. Recently, deregulation of the KIT receptor TK by the prevalent activation loop mutation D816V has served as a focal point in therapeutic strategies aimed at curbing neoplastic mast cell growth (2).
Gene Aliases:
PBT, SCFR, CD117
Genbank Number:
NM_000222
References:
1. Berger, S A.: Signaling pathways influencing SLF and c-kit-mediated survival and proliferation. Immunol Res. 2006;35(1-2):1-12.2. Gotlib, J.: KIT mutations in mastocytosis and their potential as therapeutic targets. Immunol Allergy Clin North Am. 2006 Aug;26(3):575-92.
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1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
定性ELISA只能粗略表示样本待测物含量在某个特定值以上或以下,定性ELISA通常设置阳性对照(P)、和阴性对照(N),结果分别用“阴性”和“阳性”表示。ELISA定性测定的“阴性”和“阳性”的判断标准是试剂盒所确定的阳性判断值,即cut-off值。
定量ELISA是通过一系列不同已知浓度的标准品所对应的OD值做出标准曲线,然后将样本的OD值代入标准曲线,计算出样本中待测物的含量。百特纯大分子Meretciel的定量ELISA试剂盒还可以。
谢谢谢
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml
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