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enogene/EnoGeneFec™ 2200 Transfection Reagent/500μl/EGF2200-500
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enogene/EnoGeneFec™ 2200 Transfection Reagent/500μl/EGF2200-500
品牌 / 
enogene
货号 / 
EGF2200-500
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EnoGeneFec™ 2200 Transfection ReagentPDF

  • Catalog Number:

    EGF2200-500
  • Amount:

    500μl
  • Storage/Stability:

    and stabilityEnoGeneFec™ 2200 Transfection Reagent is provided in 1μg/μL concentration. It is shipped at room temperature and is stabilized for extended storage at +4°C for one year when very tightly closed.产品介绍EnoGene新推出的EnoGeneFec™ 转染试剂以最高的转染效率、使用方便、细胞毒性小、生物可降解为设计宗旨,EnoGene的新型配方克服了常见的阳离子或脂质体转染试剂带来的细胞毒性作用,更适合做长效和瞬时转染。使用这种新的转染试剂操作方便,可用于转染质粒、线性双链DNA、反义寡核苷酸及RNAi等,在实际使用中获得了非常理想的效果。EnoGeneFec™ 2200是针对原代细胞设计的转染试剂,可用于体外转染质粒、线性双链DNA、反义寡核苷酸及RNAi等。对常用的原代细胞转染效率可达60%以上。EnoGeneFec™ 2200可以形成微小的(平均大小约100-400nm)单层脂质体,靠静电作用结合到DNA的磷酸骨架上以及带负电的细胞膜表面,并与寡核苷酸等能形成稳定的较小的纳米胶体颗粒,通过细胞"内吞作用"进入细胞,能吸收溶酶体的H+,在复合体中形成酸性环境使核酸酶失活,保护DNA免受核酸酶的降解。进入细胞后,复合体囊泡肿胀破裂,将DNA释放到细胞质中,实现基因转染。。EnoGeneFec™ 2200与其他转染试剂相比无论在转染效果和实验操作上都有明显的优势,主要表现为:●转染效率很高,对大多数原代贴壁或原代悬浮细胞使用效果综合评价明显高于其它常用转染试剂●细胞毒性低,需要转染较大剂量的DNA时,毒性明显低于其它常用转染试剂●操作简单,以最短的时间完成转染,转染试剂-DNA复合物的形成时间只需20min试剂盒组分组分EnoGeneFec™ 2200 Transfection ReagentEGF2200-5000.5mlEGF2200-10001mlEGF2200-15001.5ml操作步骤(以6孔板为例)对于原代贴壁细胞:转染前18-24小时使用完全培养基在6孔细胞培养板,每孔接种2ml 细胞培液(根据细胞培养条件,可含血清及抗生素),约为1-3×105个细胞,转染前细胞密度应达到70-90%。若使用其他的培养板或培养皿,可以参照表1中提供的孔(或皿)表面积和体积相应的调整细胞接种数、EnoGeneFec™ 2200加量。表1:细胞培养孔(或皿)表面积和体积相应的调整细胞接种数、EnoGeneFec™ 2200加量培养板表面积(cm2/孔or皿)可容纳培养基体积(ml/孔or皿)DNA(或其他核苷酸类成分)用量(µg)EnoGeneFec™ 2200用量待加的无血清、无抗生素的培养基体积96孔0.30.1-0.20.2μg溶于 20 μl 培养基0.4μl 溶于 20 μl培养基50μl24孔20.50.2-1 μg溶于 25 μl 培养基2-4 μl 溶于 25 μl培养基0.4ml12孔41.00.5-2.0 μg溶于 100 μl培养基4-8 μl 溶于 100 μl培养基0.6ml6孔102.01.0-5.0 μg溶于 100 μl培养基10-20 μl 溶于 100 μl培养基0.8ml35 mm102.01.0-5.0 μg溶于 100 μl培养基10-20μl 溶于 100培养基0.8ml60mm205ml3.0-10.0μg 溶于 500 μl培养基10-20μl 溶于 500培养基2.4ml10-cm6010ml8.0-20.0 μg 溶于 1.5ml培养基90-200μl 溶于 800μl培养基6.4ml2. 转染复合物的制备:溶液A:将5µg 质粒DNA(或其他核苷酸类成分)加入到100μl无血清、无抗生素的培养基,在1.5ml无菌EP管中混匀后,室温放置5分钟。溶液B:EnoGeneFec™ 2200在使用前请震荡混匀。将10-20µl EnoGeneFec™ 2200加入到100μl 无血清、无抗生素的培养基中,在1.5ml无菌EP管中混匀,室温放置5分钟。将溶液A加入到溶液B中,轻轻混匀,室温放置20分钟,获得约200μl转染复合物 (注:该转染复合物在室温下5小时内是稳定的)。3.将800μl 无血清、无抗生素的培养基加入到上述的200μl转染复合物中,轻轻混匀,获得约1.0ml转染复合物溶液。将培养板中的培养基弃去,将获得的1.0ml转染复合物溶液加入到培养孔中覆盖细胞。4. 于5-8小时后,弃去每孔中的转染复合物溶液,加入2.0ml完全培养基(根据细胞培养条件,可含血清及抗生素),37℃孵育转染细胞18-24小时。6. 收集细胞用于分析。如要建立稳定转染,于转染24小时后将细胞按1:10传代至新鲜培养基中(根据细胞培养条件,可含血清及抗生素),传代次日可以换用选择培养基。对于原代悬浮细胞:1. 在制备转染复合物之前1小时,接种0.8ml 无血清、无抗生素的培养基细胞悬液(含3-5×105个细胞)至6孔细胞培养板中。若使用其他的培养板或培养皿,可以参照表1中提供的孔(或皿)表面积和体积相应的调整细胞接种数、EnoGeneFec™ 2200加量。2. 转染复合物的制备:溶液A:将5µg 质粒DNA(或其他核苷酸类成分)加入到100μl无血清、无抗生素的培养基,在1.5ml无菌EP管中混匀后,室温放置5分钟。溶液B:EnoGeneFec™ 2200在使用前请震荡混匀。将10-20µl EnoGeneFec™ 2200加入到100μl 无血清、无抗生素的培养基中,在1.5ml无菌EP管中混匀,室温放置5分钟。将溶液A加入到溶液B中,轻轻混匀,室温放置20分钟,获得约200μl转染复合物 (注:该转染复合物在室温下5小时内是稳定的)。3. 将上述的200μl转染复合物滴加到第一步接种了0.8ml 无血清、无抗生素的培养基细胞悬液 (含3-5×105个细胞)的培养孔中,轻轻混匀。4. 于5-8小时后,培养孔中加入0.1ml血清(可含抗生素),37℃孵育转染细胞18-24小时。5. 收集细胞用于分析。如要建立稳定转染,于转染24小时后将细胞按1:10传代至新鲜培养基中(根据细胞培养条件,可含血清及抗生素),传代次日可以换用选择培养基。注意事项1. 质粒DNA的质量使用高纯度的质粒DNA也是转染试验中的关键因素。为了保证试验的结果,建议对提取的质粒DNA的量和纯度进行检测。DNA含量(μg/mL)=50×(260 nm的读数)×稀释倍数,另外通过检测质粒DNA在260nm和280nm的OD值的比值(OD260/OD280)估计核酸的纯度,OD260/OD280=1.8说明DNA样本纯度较高。转染细胞的要求细胞的传代次数是影响转染效果的重要因素,推荐使用在5代以内的原代细胞进行转染试验。3. 血清的影响在EnoGeneFec™ 2200和DNA形成转染复合物的过程中不能添加血清。4. EnoGeneFec™ 2200的用量为了达到更高的转染效率,对于接种细胞密度在70%-90%之间的样本,可通过预试验在EnoGeneFec™ 2200(μl)∶DNA(μg)=1∶1 - 5∶1之间选择最佳的比例。EnoGeneFec™ 2200(μl)∶DNA(μg)的推荐比例为2∶1或5:1。对于一般细胞,2:1即可获得理想转染效果;对于较难转染的细胞,建议使用5:1。五、储存EnoGeneFec™ 2200以1μg/μl浓度液体形式提供,保存在4℃。常温运输。保存期:一年
  • Price:

    170$
  • Research Area:

    Stem Cells Cancer Cardiovascular Cell Biology Epigenetics & Nuclear Signaling Developmental Biologys Immunology Drug Discovery Products Metabolism Neuroscience Signal Transduction

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大鼠细胞因子>>>分装ELISA试剂盒    货号品名方法规格价格备注F15000大鼠Active Caspase-3ELISA48T/96T2000/3000进口分装F15010大鼠Active Caspase-7ELISA48T/96T2000/3000进口分装F15020大鼠Active Ca 查看更多>
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【摘要】:影响ELISA中非特异性显色的原因很多,如试剂盒特异性、检验标本中含酶标记物的干扰物,操作过程中的问题。本文就这一原因作一简要分析,以便可以通过以上措施把非特异显色降至最低限度,从而提高检测的特异性,并得到更准确、可靠的实验结果。 【关键词】ELISA非特异性显色 酶联免疫吸 查看更多>
无锡柏欧美地生物科技有限公司在发布的改良Lowry法蛋白定量试剂盒供应信息,浏览与改良Lowry法蛋白定量试剂盒相关的产品或在搜索更多与改良Lowry法蛋白定量试剂盒相关的内容。 查看更多>
 在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述,ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。  完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照 查看更多>
北京启维益成科技有限公司在发布的EpiQuik 总二甲基化组蛋白H3K9定量试剂盒(比色法)(48次)供应信息,浏览与EpiQuik 总二甲基化组蛋白H3K9定量试剂盒(比色法)(48次)相关的产品或在搜索更多与EpiQuik 总二甲基化组蛋白H3K9定量试剂盒(比色法)(48次)相关的内容。 查看更多>
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2019-03-18
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法BCA法基础上改进而成。众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有... 查看更多>
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中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会2013年的《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》,有需要的战友自行下载。

临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证.pdf(17431.6k)
模板,引物一样,只是试剂盒不一样,当然realtimepcr的protocol也不一样,可是不至于结果都是相反的吧?很是纳闷~~~希望高手赐教~
丙肝的核酸定量检测试剂盒哪个好
两个意义不一样啊,定性是确定你抗体是阴还是阳的,如果阳证明2个情况,一个是你感染了丙肝病毒,另一个是你曾经感染过这个病毒,现在已经好了。但是到底是哪个情况还要进一步做定量测试既病毒RNA检测。如果这个测试值在最低线以下就证明你现在没事,不具有传染性也不是患者只是携带者;如果高于最低线那你就是患者了,就需要治疗
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水

2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop

3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。

4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。

5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
Abbkine elisa试剂盒具体有细胞因子、激素以及其它蛋白,适用于人,小鼠,大鼠等样品! 使用便捷,灵敏度高,特异性强
EliKine™ 人 肝细胞生长因子 ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 干扰素-α ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 干扰素-γ ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 白介素-1α ELISA定量试剂盒
EliKine™ 小鼠 白介素-22 ELISA定量试剂盒
EliKine™ 小鼠 转化生长因子-β1 ELISA定量试剂盒
EliKine™ 小鼠 肿瘤坏死因子-α ELISA定量试剂盒
EliKine™ 小鼠 血管内皮生长因子 ELISA定量试剂盒
EliKine™ 大鼠 干扰素-γ ELISA定量试剂盒
EliKine™ 大鼠 白介素-1β ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 促甲状腺激素 ELISA定量试剂盒
bca法测定蛋白质浓度时,需要用参比溶液调0么,像平时测吸光度都需要先用参比溶液调0再测,看试剂盒说明书好像没说到要调0的,其次稀释液是不是用裂解液合适呢,另外做了标准曲线后,在562nm下比色,这比色的步骤是什么呢
请教国产的HBVDNA定量试剂盒1IU等于多少拷贝?到底是5.6还是1?
请问哪里可买到二肽酶DPPIV和GLP-1定量试剂盒.急,
谢谢谢
WST420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证,原卫生部于2013年7月6日发布,2013年12月1日实施.

WST420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证.pdf(17435.85k)
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水

2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop

3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。

4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。

5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
你的意思是模板为基因组gDNA对吧?!
只要引物设计的可以在基因组上做,那么理论上是没问题的!
只需要用RT-PCR荧光定量试剂盒里面的第二个,专门用来做Real-timePCR的那些试剂就可以了!