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AAT Bioquest/StrandBrite™ Green Fluorimetric RNA Quantitation Kit *High Selectivity*/17657/100 Tests
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AAT Bioquest/StrandBrite™ Green Fluorimetric RNA Quantitation Kit *High Selectivity*/17657/100 Tests
品牌 / 
AAT Bioquest
货号 / 
17657
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Ex/Em(nm)508/528
MWN/A
CAS#N/A
SolventN/A
StorageF/D/L
CategoryNucleicAcidDetection
RNADetection
RelatedLabelingCells
FluorescenceImaging
BiochemicalAssays
ThemajorchallengetoanalyzeRNAinlivecellsistheinterferencescausedbyDNA.Toaddressthesedifficulties,AATBioquesthasdevelopedtheStrandBrite™RNAGreen,anexcellentRNA-selectiveprobethatgeneratessignificantlyenhancedgreenfluorescenceuponbindingtoRNA.Ithasbeensuccessfullyusedforflowcytometricanalysisoflivecells.StrandBrite™RNAGreenreADIlygetsintolivecells.Ithastheexcitation/emissionof490/540nm.IntheDNasedigesttest,nosignificantchangeoffluorescenceintensityinfixedcellsstainedwithStrandBriteRNAGreenwasobserved.Incontrast,afterRNasedigestion,theinitialfluorescencesignaldecreasedimmediately.TheseresultsindicatethatinitialfluorescencesignalwasgeneratedfromthespecificinteractionofStrandBriteRNAGreenwithRNAincells.ShortexposureoflivecellstoantinomycinDdidcauseinhibitionofRNAsynthesisduring6hoursafterdrugremovalinadose-dependentmanner.ThesedatademonstratethatStrandBriteRNAGreenisasensitiveRNA-selectivedyeforstainingnucleolarRNAinliveandfixedcells.StrandBriteRNAGreenhaslessDNAinterferencesthanthecommonlyusedSYTO®RNASelect™dye.StrandBrite™RNAGreenisahighlyRNA-selectivefluorescentprobe.DuetoitsexcellentcellpermeABIlityandspectralproperties,ithasbeensuccessfullyusedforflowcytometricRNAanalysisandfluorescencemicroscopeinlivecells.Itcanbewellexcitedwiththe488nmbluelaserandmonitoredinFITCchannel.StrandBrite™RNAGreenprovidesavaluablemethodforidentifyingandlabelingcellswithasingleincubationstepandcandiscriminateRNAfromDNAwithbetterselectivitythanthecommonlyusedSYTO®RNASelect™.

Thisprotocolonlyprovidesaguideline,andshouldbemodifiedaccordingtoyourspecificneeds.

1.Preparing1Xassaybuffer

Preparea1Xassaybufferbydilutingthe10Xassaybuffer(ComponentB)withsterile,distilled,nuclease-freewater.

2.PreparingStrandBrite™RNAGreenworkingsolution

PrepareStrandBrite™RNAGreenworkingsolutionbymakinga200-folddilutionoftheconcentratedDMSOsolutionin1Xassaybuffer(fromStep1).Forexample,add10µLofStrandBrite™RNAGreen(ComponentA)into2mLof1Xassaybuffer. Protecttheworkingsolutionfromlightbycoveringitwithfoilorplacingitinthedark.

Note1:Werecommendpreparingthissolutioninaplasticcontainerratherthanglass,asthedyemayadsorbtoglasssurfaces.

Note2:Forbestresults,thissolutionshouldbeusedwithinafewhoursofitspreparation.

3.PrepareserialdilutionsofRNAstandard(0to20µg/mL):

3.1   Add10μLof2mg/mLRNAstocksolution(ComponentC)to990µLof1Xassaybuffer(fromStep1)tohave20μg/mLRNAsolution,andthenperform1:2serialdilutionstogetapproximately20,10,5,2.5,1.25,0.625,0.313,and0µg/mL.

Note:UnusedRibosomalRNAStandard(ComponentC)shouldbedividedintosingleusealiquotsinnuclease-freeplasticvialsandstoredat≤-20ºC.

3.2   AddRNAstandardsandRNAcontainingtestsamplesintoa96-wellsolidblackmicroplateasdescribedinTables1and2.

Table1.LayoutofRNAstandardsandtestsamplesinasolidblack96-wellmicroplate

BL

BL

TS

TS

….

….

 

 

 

 

 

 

RS1

RS1

….

….

….

….

 

 

 

 

 

 

RS2

RS2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

RS3

RS3

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

RS4

RS4

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

RS5

RS5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

RS6

RS6

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

RS7

RS7

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

*Note:RS=RNAStandards;BL=BlankControl;TS=TestSamples

Table2.Reagentcompositionforeachwell

RNAStandard

BlankControl

TestSample

Serialdilutions*100μL

1Xassaybuffer100μL

100μL

*Note:AddtheseriallydilutionsofRNAstandardsfrom0.3to20µg/mLintowellsfromRS1toRS7induplicate.

 

4.RunRNAassay:

4.1   Add100μLofStrandBrite™RNAGreenworkingsolution(fromStep2)toeachwelloftheRNAstandard,blankcontrol,andtestsamples(seeStep3)tomakethetotalRNAassayvolumeof200µL/well.

Note:Fora384-wellplate,add25μLsampleand25μLofStrandBrite™RNAGreenworkingsolutionperwell.

4.2   Incubatethereactionatroomtemperaturefor2to5minutes,protectedfromlight.

4.3   MonitorthefluorescenceincreasewithafluorescencemicroplatereaderatEx/Em=490/540nm(cutoffat515nm).

Note:Tominimizephotobleachingeffects,keepthetimeforfluorescencemeasurementconstantforallsamples.

References&Citations
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1.   PetersonEJ,KireevD,MoonAF,MidonM,JanzenWP,PingoudA,PedersenLC,SingletonSF.(2013)InhibitorsofStreptococcuspneumoniaesurfaceendonucleaseEndAdiscoveredbyhigh-throughputscreeningusingaPicoGreenfluorescenceassay.JBiomolScreen,18,247.

2.   ChenY,SonnaertM,RobertsSJ,LuytenFP,SchrootenJ.(2012)ValidationofaPicoGreen-basedDNAquantificationintegratedinanRNAextractionmethodfortwo-dimensionalandthree-dimensionalcellcultures.TissueEngPartCMethods,18,444.

3.   MorenoLA,CoxKL.(2010)QuantificationofdsDNAusingtheHitachiF-7000FluorescenceSpectrophotometerandPicoGreendye.JVisExp.

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5.   DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationtofastandultra-sensitivepg/mlDNAquantitation.JImmunolMethods,362,95.

6.   AbiodunOO,GbotoshoGO,AjaiyeobaEO,HappiCT,HoferS,WittlinS,SowunmiA,BrunR,OduolaAM.(2010)ComparisonofSYBRGreenI-,PicoGreen-,and[3H]-hypoxanthine-basedassaysforinvitroantimalarialscreeningofplantsfromNigerianethnomedicine.ParasitolRes,106,933.

7.   DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationfordouble-strandedDNAquantification.AnalBiochem,396,8.

8.   HoldenMJ,HaynesRJ,RabbSA,SatijaN,YangK,BlasicJR,Jr.(2009)FactorsaffectingquantificationoftotalDNAbyUVspectroscopyandPicoGreenfluorescence.JAgricFoodChem,57,7221.

9.   IkedaY,IwakiriS,YoshimoriT.(2009)DevelopmentandcharacterizationofanovelhostcellDNAassayusingultra-sensitivefluorescentnucleicacidstain"PicoGreen".JPharmBiomedAnal,49,997.

10.   RenX,XuQH.(2009)Label-freeDNAsequencedetectionwithenhancedsensitivityandselectivityusingcationicconjugatedpolymersandPicoGreen.Langmuir,25,43.


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人白三烯C4LTC4定量试剂盒检测样:血清、血浆、组织匀浆液和细胞液等液体检测量:50微升-100微升elisa技术操作简单、快速、敏感性高、特异性强 厂家特色:提供免费人白三烯C4LTC4定量试剂盒代测服务试剂盒保存:收到试剂盒后保存于-20℃。试剂盒实验:定性/定量分析 人白三烯C4LTC4定量试剂盒里面的酶标板可以拆卸,需要多少拆卸多少。 试剂盒保存:2-8℃人结蛋白Des,elisa,进口试剂盒小鼠血管活性肠肽(VIP)试剂盒操 查看更多>
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2020-03-03
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丙肝的核酸定量检测试剂盒哪个好
两个意义不一样啊,定性是确定你抗体是阴还是阳的,如果阳证明2个情况,一个是你感染了丙肝病毒,另一个是你曾经感染过这个病毒,现在已经好了。但是到底是哪个情况还要进一步做定量测试既病毒RNA检测。如果这个测试值在最低线以下就证明你现在没事,不具有传染性也不是患者只是携带者;如果高于最低线那你就是患者了,就需要治疗
目前eAg定量对抗病毒治疗中的乙肝患者监测具有较大临床意义,价格又比HBVDNA定量有很大优势。国内也有好多权威专家推荐使用,比如《2004年拉米夫定临床应用专家共识》中就有,但是相应的试剂盒却很少......
cea-trfia定量检测试剂盒每家价格不一定但和原装进口得价格相差不大 就看大家优惠力度如何乐
中国疾病预防控制中心招标很多都是广州健仑生物科技有限公司供应的,希望可以帮到你
ELISA包被条件123
战的逆袭882018-04-02
这个问题好神奇。吃的话应该没问题。不管是哪个公司的试剂盒,里面包含的无非就是反转录酶,扩增酶(这两种本质是蛋白,能消化的)。荧光染料 SYBR green,这个染料也是低度的,可以替代EB的低度染料。和一些无机盐的缓冲液。也是没有有毒的物质。

如果要是直接注射,就不知道了
需要试剂盒么,我们用天根的mixture 和 sybergreen, 引物自己网上找别人用过的, 反转录cDNA
蛋白定量 ( BCA)试剂盒123
俺样最高VE2018-03-25
用杭州昊鑫生物独家代理的艾德莱BCA蛋白定量试剂盒比较好
1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典Lowry法快4倍而且更加方便。
2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl 。
3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80。
4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
实时荧光定量PCR(qPCR)用什么试剂盒比较好
加入荧光标记探针,巧妙地把核算扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起,借助于荧光信号来检测PCR产物。一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定CT值,从而根据CT值确定起始DNA的拷贝数,做到真正意义上的DNA定量。另外由于CT值是一个完全客观的参数,CT值越小,模版DNA的起始拷贝数越小。因此,利用CT值确定DNA拷贝数实时PCR方法比普通终点定量方法更加准确
荧光定量PCR诊断试剂盒不需要做回收实验,实验做完使用仪器自带的软件对实验数据进行分析即可。反应结束后,不要打开反应管以免对环境造成污染。应该用塑料袋包好,将其送到安全的地方处理。
Bradford试剂盒浓度测定范围约在25μg~500μg/ml
MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml
楼主自己看看经销商价格
各位同仁好,我想问下关于考马斯亮蓝法测定蛋白(小肽)浓度的准确度到底有多高?为什么我同一个东西三次测得的结果的都不一样,而且相差很大!我的小肽第一次测得是3.7mg/ml(稀释15倍),第二次测得为3.0mg/ml(稀释15倍),第三次测得为2.5mg/ml,可以肯定我的蛋白没有降解,而且测定时间间隔不超过两天。不知道大家对于该法测定蛋白浓度时有什么好的见解~~~OD595值应控制在多少最好?我的稀释15倍时OD值在0.5-0.6之间,但是我稀释7.5倍,OD595落在0.7-0.8之间,这样的话后面算出来的值肯定比前面的低,请问我该如何取舍呢?谢谢大家给予建议!!!
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