| Overview | PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 550/None |
| MW | N/A |
| CAS# | N/A |
| Solvent | N/A |
| Storage | F/D/L |
| Category | SmallMoleculeDetection DiagnosticMolecules |
| Related | RedoxEnzymes BiochemicalAssays |
1.Prepare2XAldeView™Yellowreactionmixture:
Add5mLofAssaySolution(ComponentB)intothebottleofAldeView™Yellow(ComponentA),andmixwell.
Note1:5mLofthe2XAldeView™Yellowreactionmixtureisenoughfor1plate.Thereactionmixtureisnotstable.Usewithin2hours.
Note2:Assaysolution(ComponentB)ispotentiallyhazardous.Weargloveswhenhandlingit.
2.Prepareserialdilutionsofaldehydestandard(0to1mM):
2.1 Add1mLofDilutionBuffer(ComponentD)intothevialofAldehydeStandard(ComponentC)tomakea10mMaldehydestandardstocksolution.
Note:Theunused10mMAldehydestandardstocksolutionshouldbedividedintosingleusealiquotsandstoredat-20oC.
2.2 Take100μLof10mMaldehydestandardstocksolution(fromStep2.1)toperform1:10,and1:3serialdilutionstoget1000,300,100,30,10,3,1,0.3,and0μMserialdilutionsofaldehydestandard.
2.3 Addserialdilutionsofaldehydestandardandaldehyde-containingtestsamplesintoa96-wellwhite/clearbottommicroplateasdescribedinTables1and2.
Note1:BothBSAandTween20willinterferetheassay,uselessthan0.001%BSAand0.01%Tween20inthesamples.
Note2:Ifthealdehyde-containingsamplesarefromtheenzymereactionsuchasfructose-1,6-bisphosphatewithfructose-1,6-bisphosphatealdolase,prepare50µLofenzymereaction(25µLfora384-wellplate)asdesired.Incubatetheenzymereactionat37oCforatleast1hour.Thecomponentsofenzymereactionshouldbeoptimizedasneeded(e.g.anoptimizedbuffersystemmightberequiredforaspecificenzymereaction).
Note3:Inmostcases,DilutionBuffer(ComponentD)canalsobeusedforrunningenzymereactionifyoudonothaveanoptimizedenzymebuffer.
Table1LayoutofAldehydestandardsandtestsamplesinawhite/clearbottom96-wellmicroplate
BL | BL | TS | TS | …. | …. |
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AS1 | AS1 | …. | …. | …. | …. |
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AS2 | AS2 |
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AS3 | AS3 |
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AS4 | AS4 |
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AS5 | AS5 |
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AS6 | AS6 |
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AS7 | AS7 |
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Note:AS=AldehydeStandards,BL=BlankControl,TS=TestSamples.
Table2Reagentcompositionforeachwell
AldehydeStandard | BlankControl | TestSample |
SerialDilutions*:50μL | Assaybuffer:50μL | 50μL |
*Note:Addtheserialdilutionsofaldehydestandardfrom0.3μMto1000μMintowellsfromAS1toAS7induplicate.
3.Runaldehydeassay:
3.1 Add50μLof2XAldeView™Yellowreactionmixtures(fromStep1)intoeachwellofthealdehydestandard,blankcontrol,andtestsamples(seeStep2.3)tomakethetotalaldehydeassayvolumeof100µL/well.
Note:Fora384-wellplate,add25μLofsampleand25μLofaldehydereactionmixtureintoeachwell.
3.2 Incubatethereactionmixtureatroomtemperaturefor30to60minutes,protectedfromlight.
3.3 Monitortheabsorbanceincreasewithanabsorbanceplatereaderat405or550nm.
Note:DifferentconcentrationsofthealdehydemightformdifferentcolorswithAldeView™Yellow.Atlowerconcentration,theabsorbanceat405nmgivesthebestresult.However,athigherconcentration,theabsorbancetendstoshiftto550nm.
| References&Citations | CitationExplorer |
BiologicalActivityofPeptide-conjugatedPolyionComplexMatricesConsistingofAlginateandChitosan
Authors:ChikaraFujimori,JunKumai,KyotaroNakamura,YingziGu,FumihikoKatagiri,KentaroHozumi,YamatoKikkawa,MotoyoshiNomizu
Journal:PeptideScience(2016)
HepaticDeficiencyofAugmenterofLiverRegenerationExacerbatesAlcohol-InducedLiverInjuryandPromotesFibrosisinMice
Authors:SudhirKumar,JiangWang,RichaRani,ChandrashekharRGandhi
Journal:PloSone(2016):e0147864
Integratedself-assemblingdrugdeliverysystempossessingdualresponsiveandactivetargetingfororthotopicovariancancertheranostics
Authors:Chun-JuiLin,Chen-HsiangKuan,Li-WenWang,Hsi-ChinWu,YunchingChen,Chien-WenChang,Rih-YangHuang,Tzu-WeiWang
Journal:Biomaterials(2016):12--26
Fiber-opticproteasesensorbasedonthedegradationofthingelatinfilms
Authors:BastienSchyrr,StéphanieBoder-Pasche,RéalIscher,RitaSmajda,GuyVoirin
Journal:SensingandBio-SensingResearch(2015):65--73
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1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典Lowry法快4倍而且更加方便。
2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl 。
3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80。
4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
加入荧光标记探针,巧妙地把核算扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起,借助于荧光信号来检测PCR产物。一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定CT值,从而根据CT值确定起始DNA的拷贝数,做到真正意义上的DNA定量。另外由于CT值是一个完全客观的参数,CT值越小,模版DNA的起始拷贝数越小。因此,利用CT值确定DNA拷贝数实时PCR方法比普通终点定量方法更加准确
LOQ-定量限LOD-检测限
现在跑tricine-sds-page电泳老是跑不好,
我刚做了bradford定量,
觉得差异与空菌对照还是挺明显的,
但是这个方法只能初略的估计,
还是不能精确定量,
做HPLC我现在还没有条件,
所以我想能不能用BCA或者lowry法先进行定量啊?
这种方法如果做出来结果的话,
能不能发个sci之类的文章啊?
希望高手们指点一下!
谢谢了
MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml
楼主自己看看经销商价格

