| Overview |  PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 380/464 |
| MW | 278.26 |
| CAS# | N/A |
| Solvent | DMSO |
| Storage | F/D/L |
| Category | ProteinBiochemistry Generalproteins |
| Related | BiochemicalAssays |
1.PrepareFluorescamineworkingsolution:AddthewholecontentofDMSO(ComponentB)intothebottleofFluorescamine(ComponentA),andmixwell.
Note:2.5mLoffluorescamineworkingsolutionisenoughfor1plate.Unusedfluorescamineworkingsolutionshouldbestoredinsingleusealiquotsat-20oCandprotectedfromlight.
2.PrepareBSAstandardsolutions:DilutetheappropriateamountofBSAStandard,1mg/mL(ComponentC)intoPBStogetaBSAconcentrationof100-1.56µg/mLwith2Xdilutions.
Table1LayoutofBSAstandardsandtestsamplesinasolidblack96-wellmicroplate
BL | BL | TS | TS | …. | …. |
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BS1 | CS1 | …. | …. | …. | …. |
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BS2 | CS2 |
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BS3 | CS3 |
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BS4 | CS4 |
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BS5 | CS5 |
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BS6 | CS6 |
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BS7 | CS7 |
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Note:BS=BSAStandards,BL=BlankControl,TS=TestSamples.
Table2Reagentcompositionforeachwell
BSAStandard | BlankControl | TestSample |
SerialDilutions*:75μL | PBS:75μL | 75μL |
*Note:AddtheserialdilutionsofBSAstandardfrom100to1.56µg/mLwith2XdilutionsintowellsfromBS1toBS7induplicate(seeStep2).
3.Runproteinassay:
3.1 AddtheserialdilutionsofBSAstandardat75μL/well(seeTables1&2)intothe96-wellplate.A0µg/mLBSAcontrolisincludedasblankcontrol.
3.2 Add25μL/welloffluorescamineworkingsolution(fromStep1)intoBSAstandard,blankcontrol,andtestsamples(seeStep2,Table1)tomakethetotalassayvolumeof100µL/well.
Note:Fora384-wellplate,add30μLofsampleand10μLoffluorescamineworkingsolutionintoeachwell.
3.3 Incubatethereactionatroomtemperaturefor5to30minutes,protectedfromlight.
3.4 MonitorthefluorescenceincreasewithafluorescenceplatereaderatEx/Em=380/470nm.
| References&Citations |  PrinterFriendlyVersion |
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2. AdamouR,ColyA,DouabaleSE,SaleckML,Gaye-SeyeMD,TineA.(2005)Fluorimetricdeterminationofhistamineinfishusingmicellarmediaandfluorescamineaslabellingreagent.JFluoresc,15,679.
3. EggenreichK,ZachE,BeckH,WintersteigerR.(2004)Determinationof4-amino-m-cresoland5-amino-o-cresolbyhighperformanceliquidchromatographyandfluorescencederivatizationusingfluorescamine.JBiochemBiophysMethods,61,35.
4. SkelleyAM,MathiesRA.(2003)Chiralseparationoffluorescamine-labeledaminoacidsusingmicrofabricatedcapillaryelectrophoresisdevicesforextraterrestrialexploration.JChromatogrA,1021,191.
5. CesurN,ApakTI,Aboul-EneinHY,OzkirimliS.(2002)LCdeterminationofaminoglutethimideenantiomersasdansylandfluorescaminederivativesintabletformulations.JPharmBiomedAnal,28,487.
6. BelalF,ABDineH,Al-MajedA,KhalilNY.(2002)Spectrofluorimetricdeterminationofvigabatrinandgabapentininurineanddosageformsthroughderivatizationwithfluorescamine.JPharmBiomedAnal,27,253.
7. Bantan-PolakT,KassaiM,GrantKB.(2001)Acomparisonoffluorescamineandnaphthalene-2,3-dicarboxaldehydefluorogenicreagentsformicroplate-baseddetectionofaminoacids.AnalBiochem,297,128.
8. HongC,KondoF.(2000)Detection,quantitation,andidentificationofresidualaminopenicillinsbyhigh-performanceliquidchromatographyafterfluorescaminederivation.JFoodProt,63,1421.
9. KellyMT,FabreH,PerrettD.(2000)Determinationoftaurineinplasmabycapillaryzoneelectrophoresisfollowingderivatisationwithfluorescamine.Electrophoresis,21,699.
10. SeguraCarreteroA,Cruces-BlancoC,FernandezPeinadoS,ElBergmiR,FernandezGutierrezA.(1999)Fluorimetricdeterminationofprocaineinpharmaceuticalpreparationsbasedonitsreactionwithfluorescamine.JPharmBiomedAnal,21,969.
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司，前身为ABD Bioquest，总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年，一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术，综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究，引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络，为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
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1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.
Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
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1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
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MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml
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如果要是直接注射，就不知道了
